不同免疫程序下鸽新城疫抗体水平测定与分析

江 斌 林 琳 吴胜会 张世忠 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013

鸽新城疫又称鸽瘟或鸽Ⅰ型副黏病毒病，是由禽Ⅰ型副黏病毒引起的、流行于鸽群中的一种急性和高度接触性传染病。因其病原、症状、病变均与鸡新城疫相似，所以通常称之为鸽新城疫[1]。该病传播迅速、发病率高、病死率高，是目前危害鸽业发展的头号传染病，在多数鸽（肉鸽和信鸽）场中都不同程度地存在。在临床上，有些急性病例会导致鸽群大量死亡，特别是幼鸽的病死率更高；有些病例是散发，病程较长，会导致部分患鸽零星死亡[2]。为了探索鸽场良好的免疫程序，对两批鸽采用不同的新城疫免疫程序，免疫后定期抽血监测新城疫抗体，以期为鸽场制定免疫程序提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 阿氏液、1%鸡红细胞、磷酸盐缓冲液，按有关方法自行配制，4℃冰箱保存备用。

1.1.2 抗原与标准血清 鸡新城疫抗原、鸡新城疫阳性血清和阴性血清等由中国兽药监察所提供。

1.1.3 设备 96孔V型微量板、微量移液器（配滴头）、微型震荡器、温箱等。

1.1.4 疫苗 鸡新城疫活疫苗（L系）由山东齐鲁动物保健品有限公司提供；鸡新城疫、传染性支气管炎、H9亚型禽流感三联灭活疫苗（简称新支流三联灭活疫苗），由普莱柯生物工程股份有限公司提供。1.1.5 试验鸽 在福州效区某肉鸽场选100羽20日龄幼鸽，分二组进行免疫和抗体跟踪监测。

1.2 方法

1.2.1 疫苗免疫 试验Ⅰ组：20日龄乳鸽50羽首免鸡新城疫活疫苗（L系），剂量为2羽份，采用生理盐水稀释后滴鼻免疫；40日龄时再次采用鸡新城疫活疫苗（L系）二免，剂量为3羽份，采用饮水免疫（控制2 h内饮完）。试验Ⅱ组：20日龄乳鸽50羽首免鸡新城疫活疫苗（L系），剂量为2羽份，采用滴鼻免疫；40日龄时再次采用鸡新支流三联灭活疫苗肌内注射免疫，剂量为每羽0.3mL。

1.2.2 采血化验 两组试验鸽于二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分别进行静脉采血，每组抽取10羽，每羽采血1mL进行抗体测定。

1.2.3 测定方法 按照《GB16550-1996新城疫检测技术规范》进行新城疫抗体测定，HI抗体滴度以log2表示[3]。

1.2.4 判定标准 HI抗体滴度≥4 log2判定为免疫合格[3]。

1.2.5 生物统计 利用Excel进行数据差异性统计分析。

2 结 果

两组鸽新城疫抗体监测结果见表1。Ⅰ组在二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分别抽血10份进行新城疫HI抗体滴度测定，结果相应的HI抗体滴度平均值为4.8log2、5.1log2、4.2log2、3.5log2和2.7log2，其中抗体合格率分别为60%、70%、30%、10%和0%。Ⅱ组在二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分别抽血10份进行新城疫HI抗体滴度测定，结果相应的HI抗体滴度平均值为4.9log2、6.7log2、6.2log2、5.6log2和4.8log2，其中抗体合格率分别为70%、100%、100%、100%和90%。相比之下，二免后第10 d时两组之间HI抗体滴度均值差异不显著（P＞0.05），而在其它各时间点两组HI抗体滴度均值差异均非常显著（P＜0.01）。

从图1看出，Ⅰ组二免70多天后HI抗体滴度逐渐下降到免疫合格线（4log2）以下，免疫抗体保护期约70 d；Ⅱ组二免130 d后，HI抗体滴度平均值为4.8log2，说明免疫抗体保护期可达4个多月。

表1 两组鸽新城疫抗体监测情况表

3 小结与讨论

1）通过两组不同免疫程序下鸽新城疫的免疫抗体跟踪监测，可以看出Ⅱ组的HI抗体滴度要显著高于Ⅰ组，且抗体保护期可达4个多月。建议肉种鸽和信鸽场要采用活疫苗与灭活疫苗相结合的免疫程序。新城疫的病原是Ⅰ型副黏病毒，与鸡城疫病毒都属一个血清型，但由于宿主不同，毒株之间的毒力和生物学特性差别仍较大[4]。鸽新城疫病毒与鸡新城疫病毒在攻毒中存在交叉保护现象，所以，现在生产实践中都用鸡新城疫疫苗免疫来预防鸽新城疫，但一些学者认为使用鸡新城疫疫苗的免疫效果比用专门的鸽新城疫疫苗效果差，保护不完全[4]。影响新城疫抗体水平高低的因素有多方面，除了与免疫程序有关外，还与所使用疫苗种类、疫苗质量、鸽群健康状况、鸽场饲养管理水平等均有关。

图1 两组鸽新城疫抗体消长曲线图

2）新城疫疫苗种类有很多，大体可分活疫苗和灭活疫苗两大类。常见的活疫苗有鸡新城疫L系，新支120、N79株、克隆30等；常见的灭活疫苗有鸡新城疫灭活疫苗、鸽瘟灭活疫苗、新支二联灭活疫苗、新流二联灭活疫苗、新支流三联灭活疫苗、新支减三联灭活疫苗、新支流法四联灭活疫苗、新支减流四联灭活疫苗等，不同的疫苗所产生的免疫效果有所不同，不同厂家的疫苗以及不同佐剂疫苗，其免疫效果也不尽相同，各个鸽场要因地制宜地选用相应的疫苗进行防疫。鸽群的健康水平对新城疫疫苗的应答反应也不一样，健康的鸽群一般会产生良好的免疫效果，老弱病残的鸽对疫苗免疫应答效果差。在生产实践中，时常见到鸽场新城疫免疫失败。究其原因，除了疫苗品种和质量外，还与疫苗保存、疫苗使用剂量不当、免疫程序不合理、消毒隔离措施不力、鸽群不健康等都有关[5-6]。

此外，在日常工作中要加强饲养管理，做好消毒和隔离措施，每间隔2个月要对鸽群每个阶段按比例抽血进行新城疫抗体监测，要求群体的新城疫抗体滴度都要≥4log2，有的学者建议群体的新城疫抗体滴度要达5log2以上才能确保鸽群的健康。