猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体水平测定与分析

（福建省宁德市动物疫病预防控制中心，福建宁德 352100）

猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS），是一种由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）诱发的急性、高度接触性传染病，也称为“猪蓝耳病”，该病主要引起妊娠母猪繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状[1]。PRRS于1987年在美国首次被发现，于1991年在荷兰首次分离出病毒，世界动物卫生组织（OIE）将其列为B类传染病；在我国于1996年首次被发现，并于2006年在全国20多个省份呈暴发式流行，我国将该病列为一类动物传染病，在2008年将其列入我国强制免疫接种病种。

自从2017年国家取消对猪蓝耳病的强制免疫以及2018年8月非洲猪瘟传入我国之后，由于疫苗费用及生物安全等因素，大部分猪场工作重心都有所转移，致使猪蓝耳病有抬头的趋势。

鉴于猪蓝耳病为免疫抑制性疾病，感染该病的猪群极易继发细菌性疾病，导致死亡率骤升，从而造成很大的经济损失。为了解在取消强制免疫之后猪蓝耳病的免疫状况，准确掌握猪群的猪蓝耳病免疫抗体水平，笔者对福建省宁德市2017年秋至2019年春季猪蓝耳病免疫抗体进行监测，同时对结果进行分析，以便及时发现工作中存在的问题，为今后更好地开展疫病防控工作提供参考依据。现将免疫抗体监测结果作如下报告。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源

在福建省宁德市9县（市、区）规模猪场内随机抽取78场（次），共采集1 230份猪全血，冷藏送至实验室，分离血清，4℃保存待检。猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗，由齐鲁动物保健品有限公司及上海海利生物技术股份有限公司生产；猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗，由勃林格殷格翰动物保健品有限公司及哈尔滨维科生物技术开发公司生产。

1.1.2 检测试剂

猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测试剂盒，购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。

1.1.3 主要设备

高速台式冷冻离心机，SW-CJ净化工作台，电热恒温培养箱，酶标仪，可调微量移液器。

1.2 方法

1.2.1 检测方法

按照GB/T 18090-2008，使用间接ELISA方法进行检测，结合检测试剂盒使用说明书进行。

1.2.2 结果判定

试验成立条件，即阳性对照平均OD650－阴性对照平均OD650≥0.150，而且阴性对照平均OD650≤0.150。结果用S/P表示，S/P＝[（样品OD650－阴性对照平均OD650）]/[（阳性对照平均OD650－阴性对照平均OD650）]＊100。S/P＜0.4表示阴性，S/P≥0.4表示阳性。

2 结果与分析

2.1 猪蓝耳病整体免疫抗体阳性率

由表1可以看出，自2017年秋至2019年春，从9个县（市、区）共采集样品1 230份，其中阳性样品1 045份，平均阳性率为84.96%。G县的阳性率最高，为93.33%；阳性率最低的是H县，为70.00%。各县（市、区）免疫抗体阳性率均达到国家规定的阳性率（70%）以上，说明该病整体免疫水平较为良好，但各县（市、区）之间的抗体水平差异较为明显。

表1 2017年秋至2019年春各县 （市、区）猪蓝耳病免疫抗体阳性率

2.2 各县 （市、区）猪蓝耳病免疫抗体阳性率

自2017年秋至2019年春，共采集血液样品4次，分别为270份、270份、420份、270份；除2018年秋以外，每个县（市、区）采集的样品均为30份。由图1可以看出，这4批样品中，不同县（市、区）检测得到的阳性率均不尽相同；部分县（市、区）4次检测所得抗体合格率也存在明显差异，这说明了其免疫水平不够稳定，而且C、E、H 3县的免疫抗体合格率均有低于国家规定标准（70%）的情况出现，需要引起重视。

2.3 4批次猪蓝耳病病毒免疫抗体检测结果

由表2可以看出，2017年秋猪蓝耳病免疫抗体阳性率为87.41%；2018年春猪蓝耳病免疫抗体阳性率为86.67%；2018年秋猪蓝耳病免疫抗体阳性率为85.00%；2019年春猪蓝耳病免疫抗体阳性率为80.74%。4批次抗体均达到农业农村部规定的70%以上合格率的标准。

表2 2017年秋至2019年春猪蓝耳病免疫抗体检测结果

2.4 猪蓝耳病一免与二免抗体阳性率比较

根据采样单，此4批次共1 230份猪血清样品中，有745份仅免疫1次，剩余485份免疫2次。一免样品的猪蓝耳病抗体平均阳性率为77.72%，二免样品的猪蓝耳病抗体平均阳性率为96.08%。可以看出，免疫2次后猪蓝耳病抗体平均阳性率高于免疫1次，而且二者的抗体平均阳性率差异极显著（＜0.01） （表 3）。

2.5 猪蓝耳病灭活苗与弱毒苗免疫效果比较

在1 230份猪血清样品中，有410份猪血清样品来自采用灭活苗免疫的猪只，剩余的820份血清样品来源的猪只采用弱毒苗免疫。灭活苗免疫的样品猪蓝耳病抗体平均阳性率为83.41%，弱毒苗免疫的样品猪蓝耳病抗体平均阳性率为86.59%。可以看出，灭活苗免疫后猪蓝耳病抗体平均阳性率略高于弱毒苗免疫后猪蓝耳病抗体平均阳性率，二者的抗体平均阳性率差异不显著（＞0.05） （表 4）[2]。

3 讨论

猪蓝耳病与猪瘟、口蹄疫一样，是当前猪场流行的主要传染病之一，对养殖业来说，该病极具毁灭性。2008—2017年，国家对猪蓝耳病实行强制免疫。虽然2017年后该病退出强制免疫，但不代表着猪蓝耳病消失，广大养殖场（户）切不可掉以轻心。猪蓝耳病主要引起怀孕母猪的流产，及猪群整体（特别是仔猪）的呼吸系统疾病。猪蓝耳病病原为猪蓝耳病病毒，是一种易重组、变异频率高的RNA病毒。该病毒极易引起猪群免疫抑制，从而引起继发性感染，促使死亡率增高。在非洲猪瘟流行环境下，为提高猪群整体抵抗力，规模猪场更应当继续按照早前国家制定的强制免疫计划、方案进行免疫。

表3 猪蓝耳病一免与二免抗体阳性率比较

表4 猪蓝耳病灭活苗与弱毒苗免疫抗体阳性率比较

按照国家免疫计划要求，我市于2017年开始取消了对猪蓝耳病的强制免疫。本文选取2017年秋季以来我市规模猪场进行监测及分析，用以了解强制免疫取消后我市猪蓝耳病免疫情况。

从以上检测及统计分析结果可以看出，对采集的1 230份猪血清样品进行免疫抗体水平检测，结果显示全市猪蓝耳病免疫抗体平均水平为84.96%，虽然达到农业农村部规定的免疫抗体合格率最低要求（70%），但E、H两县平均抗体合格率仅74%、70%，未达到我省早前所规定“春秋防期间，免疫抗体合格率需要达到80%”的要求。此外，各县（市、区）阳性率参差不齐，存在一定差异。如C、E、H等3县，猪蓝耳病合格率最高时分别达到96.67%、96.67%、93.33%，最低时仅有46.67%、33.33%、53.33%，差异显著，存在重大动物疫情漏洞，作为疫控工作人员，需引起注意，及时提醒相关养殖场（户）人员，及时补免。

本研究对全市9个县（市、区）从2017年秋至2019年春，分4批次抽血、检测。虽然每次检测所得猪蓝耳病平均抗体合格率均在80%以上，但是通过观察可以发现：猪蓝耳病平均抗体合格率从2017年秋的87.41%，到2019年春的80.74%，一直处于下降状态，且随着时间的推移，下降的幅度越来越大。这可能与以下两个方面的原因有关：一方面，随着国家对猪蓝耳病强制免疫取消的时间推移，部分养殖场（户）人员思想上有所松懈，认为该病免疫不再重要，造成免疫效果不佳；另一方面，从2018年秋季开始，全国暴发非洲猪瘟疫情，使得各养殖场（户）工作重心转移至非洲猪瘟防控上，而无暇顾及猪蓝耳病等疫病的防控与免疫。

就猪群猪蓝耳病疫苗免疫次数而言，根据检测结果分析可得，二免的血清样品平均抗体阳性率比一免的血清样品平均抗体阳性率高很多，差异极显著。只免疫1次的血清样品猪蓝耳病平均抗体阳性率为77.72%，而进行2次免疫后平均抗体阳性率迅速提升至96.08%，这说明在猪场实际生产活动过程中，一免的猪群免疫抗体合格率较二免而言，有所差距。此次监测还发现，我市进行猪蓝耳病二免的数量仅为39.43%；虽然一免的合格率能达到70%以上，但为提高猪群抵抗力及群体保护力，我们应当向广大养殖场（户）大力推广二免，以提高免疫抗体合格率。

根据采样调查表可以发现，相比猪繁殖与呼吸综合征灭活苗，猪繁殖与呼吸综合征弱毒苗在我市的使用范围更广。此次所采集的1 230份血清样品中，有三分之二使用的疫苗为弱毒苗。检测结果显示，弱毒苗及灭活苗二者所得平均抗体阳性率分别为86.59%、83.41%，弱毒苗使用效果会比灭活苗效果好一些，但二者差异不显著。弱毒苗具有免疫力强、效果好、持续时间长等优点，多用来对母猪进行免疫，使新生仔猪获得较多的母源抗体，从而能够提高仔猪成活率。与此同时，由于减毒的原因使得抗原性减弱，会导致其免疫原性受到限制；也会由于减毒不够彻底，导致临床感染、免疫抑制。此外，母源抗体极易对弱毒苗的免疫过程产生影响。灭活苗不会有散毒、毒力返强而造成新疫源地的风险，安全性高；母源抗体对灭活苗的免疫过程影响极少；但其效果较弱毒苗差，持续时间也较短。总而言之，猪场在实际生产中应该根据猪群的蓝耳病病毒感染情况、猪群阶段等因素，而选择使用弱毒疫苗或者灭活疫苗免疫。