HS-SPME-GC-MS分析青皮挥发性成分

韩蔓 江汉美 马银宇

摘要：采用顶空固相微萃取法（HS-SPME）和氣质联用法（GC-MS）对青皮的挥发性成分进行分析。结果表明，从青皮中分离出68个峰，鉴定出56种成分，占总挥发性成分的87.98%，分别有右旋萜二烯（15.06%）、芳樟醇（10.88%）、顺式香芹醇（7.88%）、反式香芹醇（6.49%）、（E，Z）-α-法尼烯（6.26%）、α-松油醇（3.59%）等。首次采用HS-SPME-GC-MS联用技术分析青皮挥发性成分，旨在为其进一步开发利用提供科学依据。

关键词：青皮;顶空固相微萃取;气质联用技术;挥发性成分

中图分类号：S666.2;O657.63         文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2020）01-0142-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.01.032           开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Abstract： Using HS-SPME and GC-MS to extract and analyze the volatile constituents in Citri reticulatae pericarpium viride. The results showed that 68 peaks were detected from Mori folium， 56 components were identified， accounting for 87.98% of volatile components， including （+）-p-Mentha-1，8-diene（15.06%）， Linalool（10.88%）， cis-Carveol（7.88%）， trans-Carveol（6.49%）， α-Farnesene（6.26%）， α-Terpineol（3.59%）. HS-SPME-GC-MS combined technique was used to analyze the volatile components of Citri reticulatae pericarpium viride for the first time， providing reference for its further development and utilization.

Key words： Citri reticulatae pericarpium viride; HS-SPME; GC-MS; volatile component

青皮为芸香科植物橘（Citrus reticulata Blanco）及其栽培变种的干燥幼果或未成熟果实的果皮，包括个青皮、四花青皮。青皮之名始载于《珍珠囊》，且《本草品汇精要》将其以“青橘皮”之名列于果部上品。2015版《中华人民共和国药典》中收载有青皮，性味苦辛，微温，归肝、胆、胃经，有疏肝破气，消积化滞之功效，主要用于胸胁胀痛、疝气疼痛、乳癖、乳痈、食积气滞、脘腹胀痛[1]。青皮主要含有挥发油、黄酮类化合物、氨基酸类等化学成分，并对心血管、消化和呼吸系统有广泛的药理作用[2]，为临床常用理气药。其中，挥发油是青皮主要活性成分之一，多采用传统水蒸气蒸馏法提取，相较而言顶空固相微萃取更为快速、高效和简便。故本试验首次采用HS-SPME-GC-MS对青皮的挥发性成分进行提取和比较分析，旨在为青皮资源的进一步开发利用提供参考依据。

1  材料与方法

1.1  仪器

手动固相微萃取装置（德国IKA公司）;气相-质谱-计算机联用仪（美国Hewlett-Packard公司，6890/5973型）;65 μm聚二甲基硅氧烷-二乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纤维头（美国Supelco公司）;顶空瓶（15 mL）;JY1002型电子天平（上海浦春计量仪器有限公司）。

1.2  试剂

青皮药材购于湖北强康中药饮片有限公司，产地为广州新会，经湖北中医药大学生药教研室张秀桥教授鉴定为芸香科植物橘的干燥幼果。将青皮药材打成粉末，并过16目筛得青皮粉末。

1.3  方法

1.3.1  顶空固相微萃取条件  经过综合考察得出最佳固相微萃取条件：取青皮粉末0.5 g，置于15 mL顶空瓶中，插入装有65 μm PDMS/DVB萃取纤维头的手动进样器，110 ℃下预平衡15 min，再伸出萃取头顶空萃取25 min，取出立即插入色谱仪进样口（温度230 ℃）中，解吸6 min。

1.3.2  气相色谱-质谱条件

1）色谱条件。色谱柱HP-5MS（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;载气He（99.999%）;流速0.8 mL/min;进样口温度230 ℃;采用程序升温，初始温度为50 ℃，以10 ℃/min升温至230 ℃。

2）质谱条件。离子源为EI源;离子源温度230 ℃;四级杆温度150 ℃;电子能量70 eV;倍增管电压1.2 kV;接口温度230 ℃;质荷比（m/z）35～550。

2  结果与分析

通过数据处理系统和面积归一化法对各总离子流中的各组分相对百分含量进行计算，然后通过NIST 08质谱数据库对各峰的质谱图进行检索，并结合其相对保留时间，确定各个组分。从青皮中分离出68个峰，鉴定出56种成分，占总挥发性成分的87.98%。其中，青皮中挥发性成分含量最高的为右旋萜二烯，占总挥发性成分的15.06%，其次为芳樟醇，占总挥发性成分的10.88%，顺式香芹醇（7.88%）、反式香芹醇（6.49%）、（E，Z）-α-法尼烯（6.26%）、α-松油醇（3.59%）、（E）-β-金合欢烯（2.94%）等含量也较高。具体结果见图1和表1。

3  討论

青皮中的挥发性成分主要包括脂肪烃类、烯类、醇类、单萜类、倍半萜等。其中，含量最高的右旋萜二烯可以抑制胆固醇的合成并有抗癌作用[3]。诸多体内外试验表明，芳樟醇具有镇痛、镇静催眠、抗焦虑、抗肿瘤、抗炎等药理活性[4];香芹醇（葛缕醇）可抑制大鼠被动皮肤过敏反应和5-羟色胺引起的皮肤血管渗透性增强[5];松油醇具有平喘、抑菌作用[6];金合欢烯、大根香叶烯D、荜澄茄烯等多种倍半萜均有抑菌解热作用[7];（-）-4-萜品醇有镇咳平喘和抗过敏作用[8];β-榄香烯具有较高的抗肿瘤活性，应用前景广阔[9];百里香酚具有较强的止痛、抗炎和抑菌作用[10]等，这些具有药理作用的挥发性成分为青皮在临床上用于胸胁胀痛、疝气疼痛提供物质基础。同时，首次采用顶空固相微萃取-气相-质谱联用技术对青皮的挥发性化学成分进行分析，也为青皮资源的进一步开发利用提供了参考依据。

参考文献：

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[2] 陈  红，刘传玉，李承晏.青皮的化学及药理作用研究进展[J]. 中草药，2001（11）：93-95.

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[10] 胡薏冰，柳克铃，李若存.GC法测定云威灵软胶囊中百里香酚和异丁酸百里香酯的含量研究[J].中医药导报，2007（7）：98-99，115.