泰安地区16648例妊娠妇女不规则抗体筛查分析*

张 群 孙倩倩 江新泉

1.公共卫生学院，山东第一医科大学(山东省医科院)，山东 泰安 271016；2.泰安市中心医院输血科，山东 泰安 271000；3.山东省泰山疗养院检验科，山东 泰安 271000

随着近年来输血医学的发展，人们逐渐认识到不规则抗体的重要性。伴随着输血技术的提高，由ABO、RhD血型系统引起的溶血反应越来越少，而因不规则抗体所致的血型鉴定困难、疑难配血、新生儿溶血病、溶血反应等情况的发生却逐年升高[1]。近年来的研究表明，红细胞血型不规则抗体主要是通过妊娠、输血、移植、注射免疫物质等诱导而产生的[2]。2015年，十八届五中全会决定，全面放开二孩政策。二孩政策开放后，多次妊娠的妇女随之增加，不规则抗体阳性率也随之增高。本研究旨在分析二孩政策开放后，多次妊娠妇女不规则抗体分布情况，以改进输血策略，提高临床输血安全。

1 材料与方法

1.1一般资料

选取2015年01月—2018年12月，在泰安市中心医院拟行剖宫产的妊娠妇女16648例为研究对象，年龄为17～53岁，孕周为12～40周，妊娠次数1～9次。应用EDTA抗凝管，采集患者静脉全血2～3 ml。

1.2仪器与试剂

强生AUTOVUE Innova全自动血型及配血分析仪、BioVue 孵育器、 BioVue 离心机、台式低速离心机、血清学专用离心机。强生抗人球蛋白(IgG，C3b/C3d)检测卡、不规则抗体筛选细胞、抗体鉴定谱细胞，细胞生产厂家为上海血液生物医药有限公司提供。试剂均批检合格并在有效期内使用。

1.3方法

1.3.1不规则抗体筛查采用全自动检测方法 将患者血液样本离心分离后，应用强生Autovue Innova全自动血型及配血分析仪对患者血液样本进行不规则抗体筛查并对结果进行判读。

1.3.2不规则抗体的特异性鉴定 分别取不规则抗体阳性患者的血清40μl加入抗人球蛋白检测卡1～11号孔，在抗人球蛋白检测卡中分别加入3%的1～10号谱细胞各10μl和3%的自身细胞10μl。置于37 ℃孵育器内孵育15 min，然后使用专用离心机离心5 min，观察实验结果。红细胞沉积于孔底者为阴性，红细胞凝集于微柱表面或者微柱中间者为阳性结果。对比患者血清与1～10号谱细胞产生的凝集程度，与自身红细胞不凝集者为特异性抗体，并根据患者血清与谱细胞的反应格局判定抗体的特异性，结合患者抗原表型确定不规则抗体特异性。患者血清与所有谱细胞及自身红细胞均凝集者为非特异性抗体。所有操作严格按照标准操作规程及仪器和试剂使用说明书的要求进行操作。

1.4统计方法

数据统计采用SPSS23.0进行分析，计数资料用率表示，采用χ2检验，以P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1不规则抗体检出情况

在16648例妊娠妇女中，共计检出不规则抗体阳性结果174例，不规则抗体阳性检出率为1.05%(174/16648)。同种特异性抗体149例，主要为Rh血型系统106例(60.92%)，MNS血型系统34例(19.54%)，Lewis 血型系统17例(9.77%)，P血型系统2例(1.15%)。非特异性抗体主要为自身抗体4例，(2.29%)和其他未鉴定出的抗体11例(6.32%)。其中检出的主要抗体为抗-E占39.66%、抗-M占19.54%。见表1。

2.2不同妊娠次数不规则抗体比较

在16648例妊娠妇女中，无妊娠史妇女4400例，不规则抗体阳性0.61%(27/4400)；有一次妊娠史妇女1822例，不规则抗体阳性率0.77%(14/1822)；有两次妊娠史妇女5644例，不规则抗体阳性率1.20%(68/5644)；有三次及以上妊娠史妇女4782例，不规则抗体阳性率1.36%(65/4782)。妊娠次数与不规则抗体成正相关，差异有统计学意义(χ2=15.224，P=0.002)。见表2。

表1 妊娠妇女不规则抗体分布

表2 妊娠次数与不规则抗体产生的相关性分析

3 讨 论

不规则抗体通常是由于曾经输血或者妊娠接触到外来红细胞抗原引起的同种免疫产生的抗体。据Tormey等[3]报道，红细胞同种免疫中有21.7%产生多种同种抗体。有临床意义的红细胞同种抗体与溶血性输血反应有关，也是影响血型鉴定结果的重要因素之一。不规则抗体导致的溶血性输血反应会引起寒战、发热，影响治疗效果，严重者甚至危及生命[4]。对孕妇而言，不规则抗体的产生会导致免疫溶血性反应，母体的不规则抗体进入胎儿血液循环中造成红细胞破坏或使其寿命缩短，轻则导致胎儿黄疸、贫血、水肿及肝脾肿大，重则危及孕妇及胎儿或新生儿生命[5]。

在16648例妊娠妇女中，不规则抗体阳性检出率为1.05%，这与国内汉族人群不规则抗体的检出率为0.38%～2.38%基本相符[6-7]。同种特异性抗体检出149例，其主要分布Rh血型系统106例(60.92%)，MNS血型系统34例(19.54%)，Lewis血型系统17例(9.77%)，与国内其他地区报道Rh血型系统不规则抗体阳性占46.7%～75.8%[8-9]结果相近。

本次研究中Rh血型系统主要抗体是抗-E，占39.66%，而位居第二的抗-D抗体占6.32%，这表明抗-E是目前最常见的抗体。我国人群中E抗原频率为43%，临床因RhE血型不合的比率是RhD血型的2.5倍[10]。目前，由于国内输血相关法律法规只要求ABO、RhD同型输血，因而患者因输血后产生抗-D概率较低。但对于Rh血型系统的其他重要抗原E、C、c、e尚未进行常规检测，以至于Rh血型系统不规则抗体产生最多，尤其是抗-E。当患者有过妊娠或者输血后，使得体内产生抗-E、抗-C、抗-c等抗体的概率增加[11-12]。故对育龄期女性，尤其有流产史、妊娠史及输血史的孕妇加强Rh系统其他抗原检测应引起重视。本研究还发现其他血型系统相关的抗体，其中抗-M占有较高的比例，达19.54%，抗-M在MNS血型系统同种抗体中所占比例较高,常以IgM的形式存在，也有较多患者存在天然抗体，大多数抗-M只在低于37℃的温度下发生反应，最佳反应温度是4℃，所以这类抗体临床意义不大[13]。Lewis血型系统检出阳性结果17例，由于Lewis血型系统的抗原在组织液中大量存在，可以中和部分抗体，因此, Lewis血型系统的常见抗体很少引起溶血性输血反应。

非特异性抗体主要为自身抗体4例，主要是患有自身免疫性疾病的孕妇。11例为无法鉴定出抗体的特异性，其可能存在以下几方面原因：①存在多种特异性抗原，或同种抗体合并自身抗体，谱细胞无法鉴别其特异性。②稀有或特殊抗体特异性，不在谱细胞抗原谱的范围之内。③其他原因[14]。

不同妊娠次数孕妇的不规则抗体检测结果存在显著差异，有一次妊娠史妇女不规则抗体阳性率为0.77%，有两次妊娠史妇女不规则抗体阳性率1.20%，有三次及以上妊娠史妇女不规则抗体阳性率1.36%，既往妊娠≥2次组不规则抗体阳性率显著高于既往妊娠1次和无妊娠史组，多次妊娠妇女的不规则抗体阳性率高于无妊娠史女性，可能与孕产妇受到多次妊娠免疫刺激有关[15]。

随着二胎政策的开放，多次妊娠现象越来越多，妊娠次数增加，不规则抗体产生的概率成比例上升，易导致用血时配血困难或者无血可输及新生儿溶血病等。因此，建议孕产妇早期开展妊娠妇女不规则抗体筛查，避免因不规则抗体导致的新生儿溶血性疾病等。同时，输血前应常规检测Rh血型系统的五种抗原，同表型输血，减少不规则抗体的产生，对保证临床安全、有效输血治疗具有重要的临床意义。