糖尿病肾病患者血清碳水化合物反应元件结合蛋白水平变化及临床意义

韩兵 陈烨 齐丽

[摘要] 目的 研究2型糖尿病（T2DM）患者血清碳水化合物反應元件结合蛋白（ChREBP）水平变化及与糖尿病肾病（DN）的关系。 方法 选取2016年2月～2018年12月辽宁省阜新市第二人民医院（妇产医院）（以下简称“我院”）收治的T2DM患者193例，根据尿白蛋白肌酐比值（UACR）结果进行分组，UACR≤30的患者为单纯T2DM组（123例），UACR>30的患者为DN组（70例）。另取同期在我院接受体检的50名健康人作为对照组。比较三组临床资料，酶联免疫吸附试验检测血清ChREBP水平，logistic回归分析DN影响因素，受试者工作特征曲线分析血清ChREBP诊断DN的能效。 结果 DN组糖尿病病程长于T2DM组（P < 0.05）;T2DM组、DN组的空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均高于对照组，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）低于对照组（均P < 0.05）;DN组24 h尿白蛋白排泄率（24 h UAER）、ChREBP水平高于对照组、T2DM组，肾小球滤过率（eGFR）低于对照组、T2DM组（均P < 0.05）;T2DM组24 h UAER、ChREBP水平高于对照组，eGFR低于对照组（均P < 0.05）。糖尿病病程、24 h UAER以及ChREBP均是DN的独立危险因素。截断值为154.36 ng/mL时，灵敏度为0.872，特异度为0.834。 结论 血清ChREBP水平在DN患者中异常高表达，临床可检测血清ChREBP水平用于早期DN的诊断。

[关键词] 2型糖尿病;糖尿病肾病;碳水化合物反应元件结合蛋白;诊断

[中图分类号] R587.1          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）03（c）-0173-04

[Abstract] Objective To study the changes of serum carbohydrate response element binding protein（ChREBP） level in patients with type 2 diabetes mellitus （T2DM） and its relationship with diabetic nephropathy （DN）. Methods From February 2016 to December 2018， 193 cases with T2DM patients who admitted to the Second People′s Hospital and Gynecology and Obstetrics Hospital of Fuxin City of Liaoning Province （“our hospital” for short） were selected. According to the results of urinary albumin creatinine ratio （UACR）， the patients whose UACR≤30 were in simple T2DM group （123 cases）， and the patients with UACR>30 were in DN group （70 cases）， and 50 healthy people receiving physical examination in our hospital during the same period were selected as control group. Clinical data in three group were compared. The serum ChREBP level was detected by enzyme-linked immunosorbent assay and logistic regression analysis was conducted DN influencing factors. The energy efficiency of serum ChREBP in the diagnosis of DN was analyzed by the receiver operating characteristic curve of subjects. Results The duration of diabetes in DN group was longer than that of simple T2DM group （P < 0.05）. The levels of fasting blood-glucose （FBG）， glycosylated hemoglobin （HbA1c）， total cholesterol （TC），triglyceride （TG） and low density lipoprotein cholesterin （LDL-C） in simple T2DM group and DN group were higher than those of control group， while the level of high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） was lower than that of control group （all P < 0.05）. The 24 h urinary albumin excretion rate （24 h UAER） and ChREBP levels of DN group were higher than those of control group and simple T2DM group， and the glomerular filtration rate （eGFR） was lower than that of control group and simple T2DM group （all P < 0.05）. The levels of 24 h UAER and ChREBP insimple T2DM group were higher than those in control group， and the eGFR was lower than that in control group （all P < 0.05）. Duration of diabetes， 24 h UAER and ChREBP levels were independent risk factors for DN. The cut-off value was 154.36 ng/mL， the sensitivity was 0.872， and the specificity was 0.834. Conclusion Serum ChREBP level is abnormally highly expressed in DN patients， and clinical detection of serum ChREBP level can be used for early diagnosis of DN.

[Key words] Type 2 diabetes mellitus; Diabetic nephropathy; Carbohydrate response element binding protein; Diagnosis

糖尿病腎病（DN）是糖尿病患者微血管并发症之一，也是导致肾功能衰竭的重要原因之一[1]。我国DN的发病率呈逐年升高的趋势，严重威胁着居民的生命健康安全[2]。临床早期有效诊断并及时治疗，可有效逆转肾功能损伤，提高患者生存质量及预后[3]。碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）是响应葡萄糖的关键转录因子之一，在机体多种器官中均有表达，肝脏、小肠、肾脏等组织中的表达较高，其主要作用于乙酰辅酶A羧化酶、磷酸果糖激酶、脂肪酸合成酶等靶基因，介导脂质合成以及糖酵解过程[4]。高糖激活ChREBP途径，且在肾系膜细胞中引起多种信号，这些信号导致糖尿病肾小球病变，提示ChREBP可能与DN的发生、发展密切相关[5]。本文通过研究2型糖尿病（T2DM）患者血清ChREBP水平变化，旨在探讨其与DN的关系，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年2月～2018年12月辽宁省阜新市第二人民医院（妇产医院）（以下简称“我院”）收治的T2DM患者193例。

纳入标准：①符合中华医学会糖尿病学分会《中国2型糖尿病防治指南（基层版）》[6]中T2DM相关诊断标准，空腹血糖（FBG）水平≥7.0 mmol/L，口服糖耐量试验2 h时血糖水平≥11.1 mmol/L，糖化血红蛋白水平≥6.5%;②受试者对本研究知情同意。排除标准：①合并慢性感染、免疫系统、神经系统疾病者;②妊娠期或哺乳期妇女;③合并其他类型慢性肾脏疾病或泌尿系感染者;④合并糖尿病酮症酸中毒或糖尿病高血糖高渗性综合征者;⑤临床病历资料缺失者;⑥心、肺、肝等重要脏器发生病变者。

根据尿白蛋白肌酐比值（UACR）进行分组，UACR≤30的患者为单纯T2DM组（123例），UACR>30的患者为DN组（70例）。另取同期于我院接受体检的50名健康人作为对照组。本研究经我院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

①收集受试者一般资料，包括年龄、性别、身高、体重、体重指数（BMI）、吸烟以及糖尿病病程。②采用7060型全自动生化分析仪检测FBG、糖化血红蛋白（HbA1c）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、24 h尿白蛋白排泄率（24 h UAER），计算估算肾小球滤过率（eGFR）。③血清ChREBP水平检测：抽取空腹静脉血5 mL，3000 r/min离心15min，离心半径10 cm，取血清，置于-80℃冰箱中备用，采用酶联免疫吸附试验检测血清ChREBP水平（长沙达尔峰科技有限公司，批号：20160126），按照试剂盒说明书进行规范操作。

1.3统计学方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，两组间比较采用t检验;计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验;logistic回归分析DN影响因素;ROC曲线分析血清ChREBP诊断DN的价值。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料及临床资料比较

三组年龄、性别、BMI及吸烟人数比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。DN组的糖尿病病程长于T2DM组，差异有统计学意义（P < 0.05）。T2DM组、DN组FBG、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平均高于对照组，而HDL-C水平低于对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。且DN组24 h UAER、ChREBP水平高于对照组、T2DM组，eGFR低于对照组、T2DM组;T2DM组24 h UAER、ChREBP水平高于对照组，eGFR低于对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表1。

2.2 logistic回归分析

糖尿病病程、24 h UAER及ChREBP均是DN的独立危险因素。见表2。

2.3 ROC曲线分析

血清ChREBP诊断DN的截断值为154.36 ng/mL，曲线下面积为0.796，95%CI：0.684～0.895，灵敏度为0.872，特异度为0.834。见图1。

3 讨论

随着糖尿病发病率的不断上升以及人民生活方式的改变，DN的发病率不断增加，目前已成为我国引起慢性肾脏病和终末期肾脏病最常见的病因[7]。随着糖尿病病程的延长，以及非酶性糖基化终末产物形成、蛋白激酶C信号通路的激活、氧化应激反应、多元醇通路激活和己糖胺通路活性增高等机制的共同参与，导致糖尿病微血管病变，继而引起包括DN在内的一系列并发症[8]。DN的临床表现为蛋白尿和/或eGFR下降，因此与糖尿病未累及肾脏的患者比较，DN患者肾脏功能指标如血肌酐、24 h UAER和蛋白尿水平较高。此外，FBG、HbAlC等生化指标不仅可以反应患者血糖控制水平，还可以反应DN的发生风险[9-13]。糖尿病患者多伴有脂肪代谢异常，易引发高甘油三酯血症，影响肾小球滤过，最终导致肾脏损伤[14]。

本研究结果显示，DN组糖尿病病程长于T2DM组，并且随着糖尿病病程的不断延长，T2DM患者发生DN的风险越高，是DN发生的独立危险因素，与国内相关研究结果一致[15]。UAER升高是DN患者最常见的特征[16-17]，是目前临床广泛用于反映机体尿白蛋白的敏感指标，具有较高的可靠性以及稳定性。本研究结果显示，与T2DM组及对照组比较，DN组24 h UAER水平较高，且是DN发生的独立危险因素。因此，美国糖尿病协会（ADA）最新发布的指南[18]推荐，病程≥5年的T1DM和所有T2DM患者应每年进行UAER的评估。

ChREBP是2001年被发现的一种新的葡萄糖信号通路中的转录因子，与其形成的化合物可以与糖酵解和脂肪合成相关基因启动子区的序列结合，直接激活糖、脂代谢基因的转录，调控机体内糖、脂代谢[19-20]。糖尿病患者异常的葡萄糖和胰岛素有可能通过调节ChREBP的活性造成肾脏糖、脂代谢紊乱，导致肾脏纤维化及肾功能受损。经过高血糖处理过的肾系膜细胞，ChREBP蛋白表达显著上升，同时会增加ChREBP去磷酸化程度以及糖基化程度，且转位进入细胞核，进一步促进基因的转录。ChREBP是一种碱性/环-螺旋-环/亮氨酸拉链（bHLH/LZ）转录因子，在肝脏内大量表达，同时也是糖、脂代谢过程中的重要因子[21]。而ChREBP于高糖状态下，其蛋白表达明显上调，增加去磷酸化程度以及糖基化程度，进入细胞核后，进一步促进基因的转录[22-23]。有研究发现[5，24]，高糖可能是通过激活ChREBP的途径，促进低氧因子HIF1以及脂质合成基因与纤维化相关基因的表达，参与DN的发生、发展过程。本研究结果显示，DN组ChREBP水平高于T2DM组及对照组，且ChREBP是DN的独立危险因素，ChREBP水平越高，DN的发生风险越大。因此，其可以作为DN的风险评估指标。ROC曲线分析发现，血清ChREBP诊断DN具有较高的特异度和敏感度，诊断价值相对更高，可作为DN的临床诊断指标之一，有助于DN的早期诊断。

综上所述，血清ChREBP水平在DN患者中明显高表达，且能够反应糖尿病进展至DN的风险，临床可通过检测患者的血清ChREBP水平用于早期DN的诊断。

[参考文献]

[1]  Tsai YC，Lee CS，Chiu YW，et al. Angiopoietin-2，Renal Deterioration，Major Adverse Cardiovascular Events and All-Cause Mortality in Patients with Diabetic Nephropathy [J]. Kidney Blood Press Res，2018，43（2）：545-554.

[2]  Kim YC，Shin N，Lee S，et al. Effect of post-transplant glycemic control on long-term clinical outcomes in kidney transplant recipients with diabetic nephropathy：A multicenter cohort study in Korea [J]. PLoS One，2018，13（4）：e0195566.

[3]  赵艾苹，魏剑芬，王建荣，等.糖尿病微血管病变患者血清25-OH维生素D3水平的变化及其影响因素[J].中国医师杂志，2019，21（1）：102-104.

[4]  张国华，戴洪伟，卢建雄.转录因子ChREBP在葡萄糖诱导生脂中的作用[J].中国生物化学与分子生物学报，2016， 32（3） ：245-252.

[5]  Isoe T，Makino Y，Mizumoto K，et al. High glucose activates HIF-1-mediated signal transduction in glomerular mesangial cells through a carbohydrate response element binding protein [J]. Kidney Int，2010，78（1）：48-59.

[6]  中华医学会糖尿病学分会.中国2型糖尿病防治指南（基层版）[M].北京：中华全科医师杂志，2013，12（8）：675-696.

[7]  王小清，李清珺，郝海荣，等.肥胖2型糖尿病患者缺氧指标与早期肾损伤相关性研究[J].中国全科医学，2019， 22（4）：422-426.

[8]  李嘉欣，马婷婷，南一，等.糖尿病肾病发病机制研究进展[J].临床肾脏病杂志，2019，19（11）：860-864.

[9]  危正南，李涛，张庆红，等.MIF、TLR4、TNF-α水平在糖尿病肾病患者中的变化及其临床意义[J].疑难病杂志，2016，15（2）：165-168.

[10]  钟一禾.补肾活血汤治疗糖尿病肾病对尿蛋白的影响[J].中外医学研究，2018，16（4）：123-124.

[11]  沈宁阳，郭红伟，赵萍，等.血清IGF-1、VEGF、MCP-1水平与老年糖尿病肾病患者肾微血管病变的相关性研究[J].临床和实验医学杂志，2019，18（6）：614-617.

[12]  任薇，包蓓艳，周小帅，等.四种指标联合檢测对糖尿病肾病早期诊断的临床价值[J].中国现代医生，2019，57（11）：129-132.

[13]  苏阳，张倩，崔荣岗，等.早期糖尿病肾病患者血栓风险分析[J].中国医药导报，2018，15（33）：47-50.

[14]  崔国利，周奎臣，刘丽秋，等.糖尿病肾病患者血清内脂素、脂蛋白-a和同型半胱氨酸的相关性研究[J].中国生化药物杂志，2016，36（6）：182-184.

[15]  张培培，王凤玲，隋小芳，等.2型糖尿病患者糖尿病肾病的危险因素分析[J].微量元素与健康研究，2018，35（6）：86-87.

[16]  沈丽莎，彭文芳，夏莉莉，等.2型糖尿病肾病患者血清Kim-1、尿NAG、AGT水平的表达及临床意义[J].实用预防医学，2018，25（10）：1252-1255.