急性ST段抬高型心肌梗死患者血清miR-1-3p、H-FABP水平变化及临床意义

张荣峰 李丹娜 董颖雪

[摘要] 目的 探討急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者血清miR-1-3p、心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的表达，并分析二者对STEMI的诊断价值。 方法 选取2016年12月～2019年6月在大连医科大学附属第一医院（以下简称“我院”）诊治的120例STEMI患者为STEMI组，另选取同期我院120例心功能正常者为非STEMI组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-1-3p表达，采用酶联免疫吸附法检测血清H-FABP、N端脑钠肽前体（NT-proBNP）水平，采用全自动生化分析仪检测总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）水平;采用彩色超声诊断仪测量左室射血分数（LVEF）、左室舒张末期内径（LVEDD）。采用Pearson相关性分析STEMI患者血清miR-1-3p、H-FABP与脂代谢指标、心功能指标的相关性;并采用受试者操作特征曲线（ROC）分析血清miR-1-3p、H-FABP及联合检测STEMI的诊断价值。 结果 STEMI组血清miR-1-3p表达及LVEF低于非STEMI组，血清H-FABP、TC、LDL-C、NT-proBNP水平及LVEDD高于非STEMI组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。两组血清TG比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。STEMI组血清miR-1-3p与TC、LDL-C、NT-proBNP、LVEDD、H-FABP均呈负相关（r < 0，P < 0.05），与LVEF呈正相关（r > 0，P < 0.05）;血清H-FABP与TC、LDL-C、NT-proBNP、LVEDD均呈正相关（r > 0，P < 0.05），与LVEF、miR-1-3p呈负相关（r < 0，P < 0.05）;二者与TG均无明显相关性（P > 0.05）。ROC分析显示，血清miR-1-3p、H-FABP对STEMI均有一定的诊断价值，二者联合检测的诊断价值高于单独检测[AUC=0.815，95%CI（0.728～0.846）]。 结论 STEMI患者血清miR-1-3p呈低表达，H-FABP呈高表达，二者均与患者的脂代谢指标、心功能指标存在一定的相关性，二者联合检测可进一步提高对STEMI的诊断价值。

[关键词] 急性ST段抬高型心肌梗死;miR-1-3p;心脏型脂肪酸结合蛋白;诊断价值

[中图分类号] R542.22          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）03（c）-0168-05

[Abstract] Objective To investigate the expression of serum miR-1-3p and Heart-type fatty acid binding protein （H-FABP） in patients with acute ST-segment elevation myocardial infarction （STEMI）， and to analyze the diagnostic value of both to STEMI. Methods A total of 120 STEMI patients treated in the First Affiliated Hospital of Dalian Medical University （hereinafter referred to as “our hospital”） from December 2016 to June 2019 were selected as the STEMI group， and another 120 patients with normal cardiac function in our hospital during the same period were selected as the non-STEMI group. The expression of serum miR-1-3p was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Serum levels of H-FABP and N-terminal pro B-type natriuretic peptide （NT-proBNP） were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. The levels of total cholesterol （TC）， low density lipoprotein cholesterol （LDL-C） and triacylglycerol （TG） were measured by automatic biochemical analyzer. Left ventricular ejection fraction （LVEF） and left ventricular end-diastolic diameter （LVEDD） were measured by color ultrasound diagnostic instrument. Pearson correlation was used to analyze the correlation of serum miR-1-3p and H-FABP with lipid metabolism index and cardiac function index in STEMI patients. The diagnostic value of serum miR-1-3p， H-FABP and combined detection of STEMI was analyzed by using the receiver operating characteristic curve （ROC）. Results Serum miR-1-3p expression and LVEF in the STEMI group were lower than those in the non-STEMI group， and the levels of serum H-FABP， TC， LDL-C， NT-proBNP and LVEDD in STEMI group were higher than those in the non-STEMI group， with statistically significant differences （all P < 0.05）. There was no significant difference in serum TG between the two groups （P > 0.05）. Serum miR-1-3p in STEMI group was negatively correlated with TC， LDL-C， NT-proBNP， LVEDD， and H-FABP （r < 0， P < 0.05）， and positively correlated with LVEF （r > 0， P < 0.05）. Serum H-FABP was positively correlated with TC， LDL-C， NT-proBNP and LVEDD （r > 0， P < 0.05）， and negatively correlated with LVEF and miR-1-3p （r < 0， P < 0.05）. There was no significant correlation between them and TG （P > 0.05）. ROC analysis showed that serum miR-1-3p and H-FABP had certain diagnostic value for STEMI， and the diagnostic value of the combined detection was higher than that of the single detection [AUC=0.815， 95%CI （0.728-0.846）]. Conclusion Serum miR-1-3p was low expressed and H-FABP was high expressed in STEMI patients， both of which were correlated with lipid metabolism index and cardiac function index of the patients to some extent. The combined detection of the two could further improve the diagnostic value of STEMI.

[Key words] Acute ST-segment elevation myocardial infarction; MiR-1-3p; Heart-type fatty acid binding protein; Diagnostic value

急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）主要由冠状动脉斑块破裂、裂隙或夹层引起冠状动脉血供障碍，进而导致心肌细胞出现缺血、缺氧的状态，且心电图表现为ST段抬高[1]。微小核糖核酸（miRNA）是内源性非编码RNA，参与基因转录后水平的调控，具有广泛的生物学功能，近年来有大量研究显示多种miRNA可能参与了STEMI的发生、发展，如miR-30d、miR-423-5p[2]等。miR-1-3p是一种与多种恶性肿瘤进展密切相关的miRNA[3-4]，近年来有研究显示其与心血管疾病的发生、发展密切相关，如Li等[5]的研究证实miR-1-3p可能通过靶向电压门控氯通道3来影响肥厚型心肌病的疾病进展。心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）是由132个氨基酸构成的可溶性蛋白质，近年来的研究显示[6]，H-FABP可作为心肌损伤的新型标志物，对急性冠脉综合征患者的预后有重要的评估价值。目前鲜有miR-1-3p、H-FABP与STEMI相关的研究。本研究旨在探讨STEMI患者血清miR-1-3p、H-FABP的表达情况，并进一步分析了二者与患者脂代谢指标、心功能指标的关系以及其对STEMI的诊断价值，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年12月～2019年6月在大连医科大学附属第一医院（以下简称“我院”）接受治疗的STEMI患者120例作为STEMI组，纳入标准：①诊断标准参考我国2015版《急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南》[7]，且均为自发性心肌梗死;②患者及其家属对本研究均知情同意，并签署了知情同意书。排除标准：①合并有恶性肿瘤、急慢性感染性疾病、血液系统等疾病者;②既往患有心脏瓣膜病、心肌炎、心肌病等心脏疾病者;③合并有肝、肾、肺、脑等重要脏器功能障碍者;④合并有精神疾病无法配合研究者。另选取同期在我院体检显示心功能正常的志愿者120例作为非STEMI组。两组研究对象的一般资料比较，差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。见表1。本研究已获得了我院医学伦理委员会批准。

1.2方法

①采用实时荧光定量PCR法检测血清中miR-1-3p的相对表达量，抽取所有研究对象的空腹静脉血5 mL，3000 r/min的速度离心15 min，离心半径10 cm，血清，采用Trizol试剂盒（上海碧云天生物技术有限公司，生产批号：20161003）提取血清中的总RNA，在A260/A280测定RNA浓度及纯度合格后，采用逆转录试剂盒（大连宝生物工程有限公司，生产批号：20160826）进行逆转录，提取cDNA，以cDNA为模板对miR-1-3p进行实时荧光定量PCR检测。引物序列均由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，内参U6的上游引物：5′-C-TCGCTTCGGCAGCACA-3′，下游引物：5′-AACGCTT-CACGAATTTGCGT-3′;miR-1-3p上游引物：5′-CA-GTGCGTGTCGTGGAGT-3′，下游引物：5′-GGCCTGG-AATGTAAAGAAGT-3′。反应条件：95℃，10 min;95℃，10 s;60℃，1 min，共40个循环。采用2-△△Ct法计算血清中miR-1-3p的相对表达量。②采用酶标仪（XMark，美国Bio-Rad公司）及其配套试剂以酶联免疫吸附法检测血清H-FABP、N端脑钠肽前体（NT-proBNP）的水平。③采用全自动生化分析仪（日立，7600）检测总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、三酰甘油（TG）的水平。④采用彩色超声诊断仪（飞利浦IE33）测量左室射血分数（LVEF）、左室舒張末期内径（LVEDD）。

1.3 观察指标

比较STEMI组和非STEMI组血清miR-1-3p、H-FABP、NT-proBNP、LVEF、LVEDD、TC、LDL-C、TG水平;分析STEMI患者血清miR-1-3p、H-FABP与脂代谢指标、心功能指标的相关性，及对STEMI的诊断价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0对所得数据进行统计学分析，计量资料均符合正态分布，采用均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料采用百分率表示，采用χ2检验。受试者操作特征曲线（ROC）分析血清miR-1-3p、H-FABP及联合检测STEMI的诊断价值。采用Pearson进行相关性分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清miR-1-3p、H-FABP水平比较

STEMI组的血清miR-1-3p相对表达量低于非STEMI组，血清H-FABP水平高于非STEMI组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表2。

2.2 两组心功能指标比较

STEMI组的LVEF低于非STEMI组，血清NT-proBNP水平及LVEDD高于非STEMI组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表3。

2.3两组血脂指标比较

两组血清TG比较，差异无统计学意义（P > 0.05），STEMI组血清TC、LDL-C水平高于非STEMI组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。见表4。

2.4 STEMI患者血清miR-1-3p、H-FABP与脂代谢指标、心功能指标的相关性分析

STEMI组血清miR-1-3p与TC、LDL-C、NT-proBNP、LVEDD、H-FABP均呈负相关，与LVEF呈正相关（P < 0.05），血清H-FABP与TC、LDL-C、NT-proBNP、LVEDD均呈正相关，与LVEF、miR-1-3p呈负相关（P < 0.05），二者与TG均无明显的相关性（P > 0.05）。见表5。

[4]  Shang A，Yang M，Shen F，et al. MiR-1-3p Suppresses the Proliferation，Invasion and Migration of Bladder Cancer Cells by Up-Regulating SFRP1 Expression [J]. Cell Physiol Biochem，2017，41（3）：1179-1188.

[5]  Li M，Chen X，Chen L，et al. MiR-1-3p that correlates with left ventricular function of HCM can serve as a potential target and differentiate HCM from DCM [J]. J Transl Med，2018，16（1）：161.

[6]  Das UN. Heart-type fatty acid-binding protein（H-FABP）and coronary heart disease [J]. Indian Heart J，2016，68（1）：16-18.

[7]  中華医学会心血管病学分会，中华心血管病杂志编辑委员会.急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南[J].中华心血管病杂志，2015，43（5）：380-393.

[8]  陈伟伟，高润霖，刘力生，等.《中国心血管病报告2017》概要[J].中国循环杂志，2018，33（1）：1-8.

[9]  Li J，Li X，Wang Q，et al. ST-segment elevation myocardial infarction in China from 2001 to 2011（the China PEACE-Retrospective Acute Myocardial Infarction Study）：a retrospective analysis of hospital data [J]. Lancet，2015， 385（9966）：441-451.

[10]  沈卫峰，张奇，张瑞岩.2015年急性ST段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南解析[J].国际心血管病杂志，2015，42（4）：217-219.

[11]  邓丽，刘宏宇.循环miRNA作为心肌损伤标志物的研究进展[J].中华胸心血管外科杂志，2015，31（8）：509-512.

[12]  Sygitowicz G，Tomaniak M，B？覥aszczyk O，et al. Circulating microribonucleic acids miR-1，miR-21 and miR-208a in patients with symptomatic heart failure： Preliminary results [J]. Arch Cardiovasc Dis，2015，108（12）：634-642.

[13]  罗水莲，陈宇航，石毓君，等.microRNA-1抑制心肌特异性Dicer基因缺失小鼠心脏病理性重构[J].第三军医大学学报，2017，39（14）：1469-1475.

[14]  Yuan W，Tang C，Zhu W，et al. CDK6 mediates the effect of attenuation of miR-1 on provoking cardiomyocyte hypertrophy [J]. Mol Cell Biochem，2016，412（1/2）：289-296.

[15]  Xiong D，Heyman NS，Airey J，et al. Cardiac-specific，inducible ClC-3 gene deletion eliminates native volume-sensitive chloride channels and produces myocardial hypertrophy in adult mice [J]. J Mol Cell Cardiol，2010，48（1）：211-219.

[16]  Ye XD，He Y，Wang S，et al. Heart-type fatty acid binding protein（H-FABP）as a biomarker for acute myocardial injury and long-term post-ischemic prognosis [J]. Acta Pharmacol Sin，2018，39（7）：1155-1163.

[17]  黄赞鸿，张惜铃，林英奎，等.心型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死早期诊断中的应用[J].现代医院，2017，17（10）：1545-1548.

[18]  韩娟萍，张卫泽，林丽霞，等.前列地尔对急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J].疑难病杂志，2019，18（7）：657-660.

[19]  Liou K，Ho S，Ooi SY. Heart-type fatty acid binding protein in early diagnosis of myocardial infarction in the era of high-sensitivity troponin：a systematic review and meta-analysis [J]. Ann Clin Biochem，2015，52（Pt 3）：370-381.

[20]  许佳昕，吕伟.急性ST段抬高型心肌梗死患者血清miR-1-3p、H-FABP检测水平及与冠状动脉病变程度的关系[J].临床急诊杂志，2018，19（12）：816-820.

[21]  李晓鹃，胡鹏，余强，等.PCI术联合依达拉奉治疗ST段抬高型急性心肌梗死的疗效及其机制研究[J].疑难病杂志，2018，17（8）：757-761.

[22]  杨莉，柴国祥.急性心肌梗死患者血清IMA、miR-1、H-FABP水平变化及其诊断价值分析[J].山东医药，2019， 59（8）：64-66.

（收稿日期：2019-12-13  本文编辑：顾家毓）