外周血T 淋巴细胞亚群水平检测对评价肿瘤患者免疫功能的价值分析

吕小婷 陈玲 孙蕾清 郑璐 陈复兴 周忠海(通讯作者)

（中国人民解放军陆军第七十一集团军医院实验科 江苏 徐州 221004）

前言

人体内的T 淋巴细胞分为辅助性T 淋巴细胞C D4+和抑制性T 淋巴细胞C D8+两群，淋巴细胞亚群的检测对肿瘤患者的免疫状态及预后判断上有很重要的作用。本次采用流式细胞分析仪检测晚期肿瘤患者及健康人的T 淋巴细胞亚群的百分率及绝对值计数，分析在评价肿瘤患者免疫功能方面的应用价值。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年10 月—2020 年8 月我院收治的32 例已确诊的晚期肿瘤患者作为肿瘤组。其中男19例，女13例，平均年龄64岁；选取健康体检的30 例健康人为健康组，平均年龄61 岁，健康组各项检查指标正常。两组均知情并同意。

1.2 试剂及器材

流式细胞仪、淋巴细胞亚群试剂盒（含CD3CD4CD8 抗体、红细胞裂解液）均自美国BD 公司；绝对计数微球试剂盒（含绝对计数微球管） 北京同生时代生物技术有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 流式细胞仪检测 静脉穿刺血样用EDTA-K2 抗凝后室温存放，避免震荡，24h 内使用。吸取50UL 抗凝血分别置于两只绝对计数微球管底。在管底加入淋巴细胞亚群抗体，盖上管帽，旋涡混匀3s，室温避光反应25min 后加入红细胞裂解液，混匀，避光10min 后，上机检测。

1.3.2 检验结果的计算及判定 淋巴细胞亚群百分率直接生成报告；淋巴细胞亚群绝对值计数采用方程式人工计数：淋巴细胞亚群绝对数（cells/μl）=区域内淋巴亚群细胞数/区域内绝对计数微球数×绝对计数微球浓度（个/μl）。

1.4 统计学分析

数据采用SPSS16.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示，行t 检验，P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 外周血淋巴细胞亚群百分率结果

肿瘤组的淋巴细胞亚群中，总CD3+百分率与健康组差异不显著（P ＞0.05）；CD3+CD4+的百分率与健康组相比低于健康组（P ＜0.01）；CD3+CD8+百分率高于健康组（P ＜0.01），见表1。

表1 两组外周血T 淋巴细胞亚群百分率比较（±s，%）

表1 两组外周血T 淋巴细胞亚群百分率比较（±s，%）

组别 例数 总CD3+ CD3+CD4+ CD3+CD8+健康组 30 69.36±3.38 34.16±2.16 29.56±2.73肿瘤组 32 68.15±3.32 22.38±3.17 42.39±2.08 t 1.421 17.191 20.714 P＞0.05 ＜0.01 ＜0.01

2.2 外周血淋巴细胞亚群绝对值计数结果

与健康组比较，肿瘤组T 淋巴细胞总CD3+的绝对值计数显著降低（P ＜0.01）；CD3+CD4+的绝对值计数显著降低（P ＜0.01）；CD3+CD8+的绝对值计数显著降低（P ＜0.01），见表2。

表2 两组外周血T 淋巴细胞亚群绝对值计数（±s，个/ul）

表2 两组外周血T 淋巴细胞亚群绝对值计数（±s，个/ul）

组别 例数 总CD3+ CD3+CD4+ CD3+CD8+健康组 30 2034±328 1205±69 687±123肿瘤组 32 945±170 379±34 346±140 t 16.253 59.178 10.204 P＜0.01 ＜0.01 ＜0.01

3.讨论

人体的免疫系统正常情况下处于平衡状态，一旦免疫系统失去平衡，机体就会出现各种病理变化[1]。T 淋巴细胞是衡量机体免疫状态的重要指标，CD3+CD4+主要功能是介导细胞免疫，CD3+CD8+主要功能是特异性杀伤靶细胞，两者比例正常时机体才能发挥抗肿瘤的功能[2]。近年来很多研究表明，多数肿瘤患者在晚期阶段常伴有T 淋巴细胞各亚群百分率的改变和功能的损害[3-5]。

本结果显示，与健康组比较，肿瘤组的T 淋巴细胞亚群总CD3+百分率降低不显著，但绝对值计数降低较显著（P ＜0.05）；CD3+CD4+的百分率及绝对值计数显著降低（P ＜0.01）；CD3+CD8+的百分率升高显著（P ＜0.01），但是绝对值计数显著降低。晚期肿瘤患者，当肿瘤发生转移时，CD3+CD4+的百分率降低，总CD3+百分率降低不显著，因此CD3+CD8+的百分率升高，但是CD3+CD8+绝对值数目减少，此结果提示患者的免疫功能更低，预后更差。

综上，T 淋巴细胞亚群绝对值计数更能反映晚期肿瘤患者的免疫状态。有文献报道[6-10]，T 淋巴细胞的绝对值计数在很多疾病中更能客观、灵敏地反映患者的免疫状态。因此我们应该重视淋巴细胞亚群绝对值计数的检测及应用，提倡检测外周血淋巴细胞亚群采用绝对值计数的方法，从而更加精准的分析患者的免疫功能，使其更有效的应用到肿瘤患者的病程监测、预后判断及临床治疗中。