改进的差值质控法在凝血四项室内质控中的应用

薄帅

（辽宁省人民医院检验科，辽宁 沈阳 110016）

凝血四项主要包括凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、凝血酶时间（TT），用来监测体内的内、外源凝血途径及纤溶系统，是血栓性疾病的早期诊断、治疗监测的必要指标，也是术前筛查的常规检测项目，具有非常重要的临床价值。因此，开展凝血试验质量控制尤为重要[1]，质控品是室内质控工作的重要基础，目前凝血质控品多是进口，价格昂贵，效期短，且非人源基质，在使用中存在一定的局限性，特别是在基层医院检验科，制约了质控工作主动、持续的开展。本研究在差值质控法的基础上，利用新鲜血浆样本，把各参数的CV值作为变量，以样本接力的方式进行室内质量控制，连续观察6个月，探讨该室内质控方法的可行性。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 希森美康公司的CS-5100全自动凝血分析仪，试剂、校准品购自西门子医学诊断产品（上海）有限，质控品购自上海昆淶生物科技有限公司。

1.2 方法 根据《实验室内部研制质量控制样品的指南》，选取日常工作中凝血功能正常和异常的样本各1例，2-8oC条件保存，将该标本的测定值进行校正，把校正后的值假定为靶值，第二天重新检测，根据假定靶值计算每个参数的CV值，同时再选取类似的新鲜标本作为新的质控品，2-8oC保存，把新质控品的检测值根据当天的CV值进行校正，把校正后的值作为新的靶值，第二天重新检测，根据校正后的靶值计算每个参数的CV值，依次类推，把CV值作为变量进行统计学分析，连续20天，计算每个参数CV值的平均值和标准差，删除超过3sd的数值，把这个平均数和标准差作为暂时的均值和标准差，利用EXCEL绘制L-J质控图，通过Westgard质控规则作为判断标准，每天同商用质控品一起检测，观察PT、APTT、Fib、TT质控的稳定性。选取的标本要求无溶血、黄疸、脂浊，乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒、梅毒均阴性。

1.3 统计方法 采用Excel软件进行统计分析。

2 结果

在6个月时间，自制和昆淶凝血质控品的室内不精密度结果见表1，均满足室内不精密度≤1/3Tea（以能力验证/室间质评评价界限作为允许总误差）的要求。

表1 自制质控的平均CV值和昆淶质控品的累积CV值

3 讨论

机体凝血功能是由血小板、凝血系统、纤溶系统等共同作用完成的，相关的筛检试验主要包括PT、APTT、Fib、TT。PT与外源凝血系统的运行密切相关，主要反映外源性凝血因子II、V、VII、X在血浆中的水平；APTT与内源凝血系统的运行密切相关，主要反应凝血因子II、V、VIII、X、XI在血浆中的水平；Fib与TT是内、外凝血系统共同凝血途径常用的试验，主要反映肝素、AT-III及Fib在血浆中的水平。PT、APTT、Fib、TT组合的凝血检查在临床诊断和治疗中起着极其重要的作用[2-4]，近年来，随着循证医学的发展，质量控制越来越受到各方面的重视，质控品是开展质控工作的重要环节，理想的质控品应是第三方的，具有人源基质-避免基质效应，瓶间差小，稳定性好等优点，浓度应处于医学决定水平附近。目前，国内实验室使用的质控品多为进口，价格高昂，订货周期长，特别是干粉制剂复溶后容易产生基质效应和较大的瓶间差，给实验室使用带来不便，特别是基层医院，近几年，基层医院的检测设备有了很大的提升，但实验室质量控制工作仍有待提高。近年来,已有学者研究利用样本血浆作为质控品来代替商用质控品，但由于凝血酶III的稳定性差，-20oC条件下稳定时间在22天左右，APTT、PT在1个月内表现稳定，之后有上升趋势，不利于室内质控工作的长期开展，也有学者研究通过合适的方法来开展血常规室内质控工作，例如浮动均值法、差值法，但这种方法这种极差图不能反映日间不精密度，不能判断误差类型，也不能对准确度进行评价，并且容易受样本量和结果差异的影响。

本研究是在差值质控法的基础上，收集检验科工作中凝血功能检测结果正常和异常的血浆样本各1例，来制备低值、高值室内质控品，首先将该标本的测定值进行校正，校正主要通过室间比对进行，校正的目的是为了进一步进行正确度评价，室内质控主要是监测仪器的不精密度，实验室也可以根据实际情况，选择后期校正。每天都要根据当天的CV值对靶值进行校正，是进行靶值的传递，为了观察日间不精密度，可以绘制L-J质控图，当失控时也能对误差类型有个初步的判断，进行失控分析。选取的标本应2-8oC保存，第二天重新检测，不要冻存，冻融后会有纤维蛋白沉淀，影响检测结果。把CV值作为变量，计算每个参数CV值的平均值和标准差，进行统计学分析，可以绘制L-J质控图和运用Westgard质控规则进行判断分析，同时每天的CV值都应小于1/3TEa。稳定性研究可以以不同的方式进行，但同步稳定性研究具有显著性和精确性的独特优势[5]，本研究每天与昆淶凝血质控品一起进行同步稳定性评价，根据质控图和Westgard质控规则进行判断，6个月时间内，PT、APTT、Fib、TT平均不精密度均小于1/3TEa，与昆淶质控品相关性良好，无偏离现象。与昆淶质控品同步出现2次失控现象，校准后重新检测即在控，均与试剂有关。

这种方法采用新鲜血浆样本作为质控品，无基质效应，真正的第三方质控品，大大降低了成本，可长期稳定，同时能反映日间精密度，可判断误差类型，也可以对准确度进行评价，可替代进口质控品用于凝血项目室内质量控制，更适于基层医院开展室内质控工作，值得推广。