PCR技术在儿科支原体肺炎诊断中的应用

杨侠

（河北省唐山市迁西县计划生育技术服务站，河北 唐山 064300）

肺炎支原体是小儿肺炎的主要原因，也是非典型肺炎的主要病原体。MP肺炎作为非典型肺炎的一种，可导致多种并发症，且无主要症状，给鉴别诊断带来极大困难。因此，MP肺炎的早期诊断和治疗，应重点引起医务工作者的重视。随着技术的发展更新，近年来多种多样的检验方法出现在我们的视野，如分离培养法等各种方法。目前PCR技术检测MP DNA已趋近成熟。我们对836例肺炎患儿采用咽拭子标本法进行MP DNA检测，同时用间接血凝实验（IHA）检测血清抗MP-IgM。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院836例门诊肺炎患儿，年龄分布如下：1-2岁233例，2-3岁212例，3-4岁225例，4岁以上166例。其中，400例为男性，436例为女性。正常对照组为300例。

1.2 方法

1.2.1 PCR 设置阴性组、阳性组两组对照组。操作严格依照说明书指示。实验中在紫外透射反射仪下观察扩增产物电泳后反应，以144 bp处出现橙黄色带或标本扩增带与阳性对照扩增带在同一水平位置判断为阳性。反之则为阴性。记录两组实验数据。

1.2.2 IHA法 滴度≥1:32判断为阳性。

2 结果

2.1 正常对照组 300例健康婴幼儿中5例血清抗MP-IgM结果为阳性，阳性率2.5%。50例血清抗MP-IgM阴性患者取咽拭子痰液样本测MP DNA，结果亦均为阴性。

2.2 检测结果 见表1。

2.3 阳性病例相关资料

2.3.1 一般资料 共选取43例，其中男性20例，女性23例。同时，22例来自城市，其他来自农村。在PCR法MPDNA阳性和抗MP-IgM阳性者均诊断为MP肺炎，占同期肺炎住院病例的5.1%。其中4岁以上15例，占1.8%；2-3岁的占比3.35%，为28例；1-2岁的占比1.4%，为12例。

2.3.2 起病时间与检测结果关系 研究发现：PCR法能测定1周内起病的病例，且效果显著。

2.3.3 病程与预后 本组病例预后良好，平均输液天数为10d，仅5例治疗周期时间超过2周以上。

表1 PCR法MP DNA与IHA血清抗MP-IgM结果对比

3 讨论

随着我国经济的迅速发展，二胎政策的全面开放，婴幼儿的增多为无数家庭带去了欢乐，但同时带来的庞大医疗压力也不可忽视。近年来，儿童疾病感染数量不断增加，在这之中，肺炎支原体是学龄儿童呼吸道感染的重要病原体之一，而且危害较大，严重威胁婴幼儿的健康。对于此类疾病，能够尽早进行诊断和治疗是医务工作者义不容辞的使命。但目前，限于技术的普及和局限，支原体肺炎未能得到早且有效的治疗。

MP的培养过程缺点极多，性价比低。IHA法检测抗体虽方法简便，但敏感性不够，在临床上应用领域终究有限。以上种种问题不能得到有效解决，以致其作为感染的早期诊断不够使人满意。在此之际，我们发现PCR技术具有强大的扩增能力，有灵敏度高，特异性强等优点。国内外大量资料表明，利用PCR技术对MP DNA进行检测是MP感染的早期实验诊断的重要手段。

通过本文的研究发现PCR技术确实是一种早期诊断的有效检测方法，同时阳性发现的时间差也向我们提示对于感染病程超过一周的患儿PCR并不是唯一选择，但是病程一周内的幼儿，PCR技术是最佳选择。同时，对于幼小婴儿和免疫力低下的患儿，由于抗体不足，PCR法应为首选最佳。本研究发现本市儿童支原体肺炎的感染状况，占小儿肺炎的31.7%，而发病年龄趋向于婴幼儿，3岁以下高达84%，需要得到重视和有效控制。

研究中通过对结果分析，我们认为两种方法同时使用检测精度更高，同时在健康幼儿的对照组中，MP的阳性率也高达2.5%，表明健康儿童中也不乏有隐性感染的患儿。以上问题，仍需我们继续进行研究、探索。