蕤仁的生药学研究
2020-04-10韦翡翡吕蓉何微微
韦翡翡 吕蓉 何微微
【摘 要】 目的:对药材蕤仁进行生药学研究。方法:通过性状鉴别、显微鉴别和薄层鉴别的方法。结果:果核质坚硬、呈不对称的扁心脏形或扁卵形,呈深棕色至暗棕色,有凹凸的浅纵沟壑。粉末中含有较多的石细胞,果皮细胞和油管;将提取溶液点于硅胶G薄层板,以氯仿-乙酸乙酯-乙醇(2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2)为展开剂展开,取出,晾干,以碘蒸气熏后,供试液色谱中,在与熊果酸对照品色谱相应的位置,显相同的黄色斑点。结论:本实验方法简便并且宜于操作,可以为药材蕤仁研究和质量控制提供参考依据。
【关键词】 蕤仁;性状鉴别;显微鉴别;薄层鉴别
【中图分类号】R284.2 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517(2020)2-0022-03
Abstract:Objective To study the pharmacology of Prinsepiae Nux. Methods Methods for trait identification, microscopic identification and thin layer identification. Result The nucleus was hard, asymmetrical flat-hearted or flat-ovate, dark brown to dark brown, with shallow longitudinal sulcus. The powder contains more stone cells, pericarp cells and tubing; the extraction solution is spotted on a thin layer of silica gel G, and developed with chloroform-ethyl acetate-ethanol (2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2) as a developing agent, taken out, and dried. After being smoked with iodine vapor, the chromatogram of the test solution showed the same yellow spots at the position corresponding to the chromatogram of the bear fruit garlic reference substance. Conclusion This method is simple and suitable for operation, and can provide reference for the research and quality control of medicinal materials.
Keywords:Prinsepiae Nux;Trait identification;Microscopic identification;Thin layer identification
蕤仁为蔷薇科植物蕤核Prinsepia uniflora Batal.或齿叶扁核木Prinsepia uniflora Batal.var.serrata Rehd.的干燥成熟果核。具有养肝明目、疏风散热的功效,用于目赤肿痛,睑弦赤烂,目暗羞明等治疗[1]。
蕤仁在中医眼科和成药组方中应用较广,除此之外具有较高的营养价值,药材的主要含有黄酮类、羧酸类和木质素等化学成分[2],果肉中含有丰富的维生素和氨基酸,种仁中含有脂肪、蛋白质和微量元素等,应用于食物和保健品中補充人体所需营养物质[3]。植物资源主要分布于河南、内蒙、甘肃和四川等地[4]。因药材现在以野生资源为主,所以在黄土高原地区也将其作为生态和经济树种,减小野生资源的过度利用,也增加当地的收入[5]。而生药学方面研究较少,本文将通过生药鉴定方法进行蕤仁的相关研究,为蕤仁药材的质量评价研究提供科学依据。
1 材料与仪器
1.1 材料 蕤仁药材收购于安国药市和亳州药市10批(见表1),均由甘肃中医药大学晋玲教授鉴定为蔷薇科植物蕤核Prinsepia uniflora Batal.的干燥成熟果核。
1.2 实验仪器 轮转式切片机(RM2235)、电脑生物组织摊烤片机(浙江省金华市科迪仪器设备有限公司)、显微成像分析系统(尼康80i)、隔水式电热恒温培养箱(上海越近医疗器械一厂)、水浴锅、超声清洗机(康士洁超声波科技有限公司)、层析缸、硅胶G薄层板(青岛海洋化工有限公司)等。
1.3 试剂 无水乙醇、三氯甲烷、二甲苯、甲醇、乙酸乙酯、碳酸钙、石油醚(天津市大茂化学试剂厂);石蜡(国药集团化学试剂有限公司)、藏红T(国药集团化学试剂有限公司)、固绿(国药集团化学试剂有限公司);中性树胶(中国上海标本模型厂)苦杏仁甙对照品(北京北纳创联生物技术研究院HPLC≥98%)等。
2 方法
通过石蜡切片制作了蕤仁的横切图,方法为浸泡软化→乙醇脱水→石蜡固定→切片→染色→封片,完成了蕤仁的石蜡切片制作;通过粉末制作观察显微特征;通过2015版中国药典薄层色谱法进行理化鉴定。
3 结果
3.1 性状鉴别 果核质坚硬、呈不对称的扁心脏形或扁卵形,呈深棕色至暗棕色,有凹凸的浅纵沟壑。去掉果壳,可见包裹着内种皮的种仁;呈棕色,呈类圆形或扁卵形,长5~8mm,宽约4~6mm,厚约2~3mm,尖端有种脐,圆端有合点,中间有深色种脊;内种皮上有浅褐色的纹理4~6条,内种皮质脆而薄;子叶2,类白色,富含油性,气微,味微苦。如图1所示。
3.2 显微鉴别 蕤仁横切:内果皮细胞为多层石细胞组成,种皮为深棕色,由4~6层细胞组成,有壁孔不常见,其下为数列颓废的薄壁细胞,种皮的内表皮为1列无色大型薄壁细胞,种子表皮是排列紧密的一层表皮细胞,向内为薄壁细胞多为方形、多边形,两片子叶中含20~30个子叶细胞,并且含内胚乳,含油滴和糊粉粒。如图2所示。
粉末鉴别:粉末呈灰色至灰褐色,多见石细胞,石细胞多为长圆形,长条形,少数类圆形,直径14~130μm,石细胞壁极厚,孔沟明显,中部常成环状断裂,偶有胞腔内含黄棕色物。果皮细胞呈黄色,多为长椭圆形至不规则形,多为数层细胞紧密排列的组织团块,含有少量油管。如图3所示。
3.3 薄层鉴别 从药材蕤仁中抽取3批不同产地的样品,每份样品取0.5g,加入相同量碳酸钙(CaCO3)进行研磨至完全碎,将混合品转移至具塞三角瓶内,加石油醚(60~90℃)4mL浸泡过夜后,将石油醚进行吸干,后再吹干,再加入乙醇4mL冷浸过夜,最后用乙醇的浸出液进行点样,并以熊果酸作为对照品,吸取上述二种溶液分别点样于硅胶G薄层板上,以氯仿-乙酸乙酯-乙醇(2∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2)为展开剂展开,取出,晾干,以碘蒸气熏后,供试液色谱中,在与对照品色谱相应的位置,显相同的黄色斑点。如图4所示。
4 讨论
据文献考证,蕤仁在历史上用药历史比较悠久,但是品种却比较单一,不存在混淆使用的情况[6];在制作切片过程中,蕤仁软化时间应该控制合理,时间太短,切片过程中易破裂;时间过长容易使药材解体。在浸蜡过程中温度高会导致蕤仁的种皮收缩变形。包埋时温度要也要设置合理,温度如果太高,会使药材组织变脆,并容易收缩变形。切片过程中应该注意腊块与刀片的角度问题,防止组织变形。染色中也应该注意染色时间,红色染色时间过长,可能会使导致固绿的着色程度。
薄层鉴别中应该保证G板的在点样前期过程中充分饱和,避免薄层展开过程中的拖尾问题,点样量也会导致条带色度的不均匀问题,所有过程中应尽量保持客观变量的一致性。
本次实验采集了10批不同批次的药材,通过了药材性状、显微切片观察、显微粉末观察和薄层鉴别的现代手段进行了药材蕤仁的生药学研究,结果具有代表性和客观性,可为蕤仁的质量控制提供依据。
参考文献
[1]国家药典委员会.中国药典2015年版(一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:371-372.
[2]李宏轩.蕤仁的化学成分研究[D]. 沈阳:沈阳药科大学, 2006.
[3]张晓玲.蕤仁的生态学特性及开发利用研究[J].山西林业科技,2011,40(3):38-39.
[4]中国科学院中国植物志委员会.中国植物志第38卷[M].北京:科学出版社, 1986:4-8.
[5]郭芳華,杨保庆.蕤仁造林,黄土高原阳坡治理的新尝试[J].中国林业, 2006(10).
[6]李百华,王俊平.中药蕤仁的品种调查和本草考证[J].西北药学杂志,1991(4):42-44.
(收稿日期:2019-06-14 编辑:陶希睿)