肥胖孕妇血清miR-146b-5p的表达及其对神经细胞生长的影响

李玉华　杨巍

【摘要】自闭症（autism spectrum disorder，ASD）是一种常见的儿童神经发育紊乱性疾病。miR-146b-5p是一种ASD相关miRNA。本项目旨在研究miR-146b-5p在肥胖孕妇血清中的表达及其对神经细胞生长的影响。

【关键词】自闭症;肥胖孕妇;血清miR-146b-5p;神经细胞生长

一研究对象

肥胖组标准：孕妇BMI≥25kg/m²，平均年龄31.2±4.8岁;对照组：相同年龄段，健康孕妇BMI≥18.5～24.9 kg/m²，每组各15例。

二研究方法

提取肥胖组和对照组血清总nuRNA，采用定量PCR法检测miR-146b-5p的相对表达量。退火温度为60℃，引物序列见表1。将miR-146b-5p模拟物和阴性模拟物分别转染到转染组和阴性组，对照组加入等体积无血清培养基。转染24h后，将各组细胞接种到96孔板中，分别在第1d、3d、5d、7d检测各孔吸光值。转染72h后，收集三组细胞，使用流式细胞仪检测三组细胞的凋亡百分率。采用SPSS16.1分析，计数资料采用（x±s）表示，并采用单因素方差分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

表1.引物序列

三结果

1.血清miR-146b-5p的表达肥胖组和对照组孕妇血清中miR-146b-5p的表达量分别是7.015±1.16和1.60±0.11，差异有显著性（P<0.01）。

2.m1R-146b-5p过表达对SH-SY5Y细胞增殖的影响miR-146b-5p转染后，细胞生长曲线呈下降趋势，而对照组和阴性组的细胞生长曲线呈现上升趋势（图1）。

图1 细脆生长曲线

3.miR-146b-5p过表达对细胞凋亡的影响转染72h后，转染组细胞百分率为8.21±0.52，对照组和阴性组的细胞凋亡百分率为11.74±1.27和10.28±1.16，三组之间差异无显著性（p>0.05）。

四讨论

本试验结果显示，肥胖孕妇血清中miR-146b-5p的表达明显高于对照组，与Mundalil等的发现相一致。而且miR-146b-5p过表达能够抑制神经细胞的生长，但不影响细胞的凋亡，提示miR-146b-5p的生长抑制作用与诱导凋亡无关。这一结果与多个研究相一致。

对于自闭症的早期诊断，目前尚缺乏统一的、确定的诊断指标。本研究的结果提示miR-146b-5p有可能成為预测自闭症发生风险的指标之一。关于miR-146b-5p如何影响神经细胞发育及其具体机制将是我们后续的研究重点。