淫羊藿雪菊速溶茶工艺优化及缓解体力疲劳评价研究

郝建宇，贺阳，王贲香，吴曼毓，初百吉，文连奎

（吉林农业大学食品科学学院，吉林长春130118）

淫羊藿（Epimedium brevicornu Maxim.）是小檗科淫羊藿属植物，为我国传统补益中药[1]。已从淫羊藿分离出十几种黄酮以及挥发油、多糖、生物碱、木脂素等有效成分，黄酮类是其主要的药效成分[2]。研究发现，淫羊藿提取物可缓解体力疲劳[3]，提高免疫功能[4]及提高骨密度[5]，具有抗心肌缺血等生物活性[6]。

实验温度达到35℃时，无改性活性炭去除率分别为49%，而30%HNO3改性活性炭去除率分别为38%。对比30和35℃条件下去除率可知DBP去除过程为吸热过程，温度越高，反应过程中活化能就越高，DBP分子更易于向活性炭表面孔隙扩散，去除率也越高。但当温度从35℃升到40℃后，活性炭吸附性能有所下降，主要原因为：当实验温度太高时，反应体系中多余的能量会造成脱附作用，使DBP脱离活性炭微孔结构，造成活性炭对水中DBP的去除率下降，因此，温度过高并不利于活性炭对DBP的吸附。

2013年，重庆市以党的十八大精神为指引，按照水利部的部署和年度目标任务，结合群众路线教育实践活动的开展，创新体制机制，突出民生重点，全年完成各类水利投资222亿元，同比增长7.8%，重庆水利实现新的发展。

雪菊（Coreopsis tinctoria）菊科金鸡菊属一年生草本植物，原产美国，在我国主要分布于新疆等地区[7]。研究表明雪菊中有300多种天然成分，包括30多种黄酮类物质、20多种氨基酸和30多种矿物元素[8]。此外，雪菊还含有丰富的多糖、维生素、有机酸和萜烯类等具有生物活性的天然成分，具有降压、降脂、健脑明目及护肝[9]作用。

对于淫羊藿、雪菊的研究多在其成分的分析与药用功效等方面，对其产品开发研究较少，淫羊藿雪菊速溶茶、饮料方面鲜有报道[10-11]，在市场未见其产品。

速溶茶是以成品茶为原料，经喷雾干燥等工艺制成的粉末或颗粒状产品[12-14]。本研究以淫羊藿、雪菊为原料制备速溶茶，分析其香气，进行抗疲劳功能评价，为淫羊藿保健食品开发提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

朝鲜淫羊藿：天猫墨源旗舰店；雪菊：秦知味特产商城；β-环糊精：河南华悦化工产品有限公司；尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、肝/肌糖元试剂盒：南京建成生物工程研究所提供。

1.2 仪器与设备

RE-5298A旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂；YPL300喷雾干燥机：上海宇砚机械设备有限公司；Agilent240-MS气谱质谱联用仪：美国安捷伦公司。

1.3 喷雾干燥单因素试验设计

淫羊藿雪菊速溶茶制粉工艺流程：淫羊藿粗提液、雪菊粗提液→澄清→过滤→浓缩→混合液调配→喷雾干燥成粉→干燥

将40只雄性ICR小鼠随机分成4组，以人体推荐量的5倍、10倍、20倍为低、中、高剂量组[20-23]，淫羊藿茶粉的人体推荐量为每人每天3 g，实验设溶剂对照组（蒸馏水）和0.001 5、0.003、0.006 g/20 g 3个剂量组。试验前7 d为适应期，喂基础生长饲料，每天下午4点到5点之间进行灌胃，连续喂养30 d。记录游泳运动时间实验及肝糖原、肌糖原、血清尿素氮的测定。

确定淫羊藿浓缩液和雪菊浓缩液按1∶3比例（体积比）混合，量取混合浓缩液400 mg加入8%β-环糊精，进料速度10 mL/min，选取进口温度140、145、150、155、160℃，以出粉率为评价指标，研究进口温度对喷雾干燥出粉率的影响。

1.3.2 β-环糊精添加量对出粉率的影响

2.1.2 β-环糊精添加量对喷雾干燥成粉率的影响

静态质押监管属于较为常见的质押模式，其要求货物质押后待到质押期才可移动，期间不允许变动。实际上，静态质押监管模式与当前供应链物流的发展需要是不符的。企业需要源源不断地进出货，才能维持正常的生产、经营活动，但是静态质押显然阻碍了企业正常的采购和出货，因而要对静态质押进行创新，使之成为一种动态的管理模式。动态质押要求物流金融监管根据企业生产的动态需要，在自由仓库基础上建立库外仓库，使质押监管、存放成为一个动态循环的过程。[2]

1.6.1 动物分组和剂量设计

1.4 响应面优化喷雾干燥最佳工艺

参考田宁等[15]的方法按照实际进行修改。确定淫羊藿浓缩液和雪菊浓缩液按1∶3比例（体积比）混合，利用Design-Expert 7.1.3软件，根据Box-Behnken，以进口温度（140、150、160℃）、β-环糊精添加量（6%、8%、10%）、进料速度（8、10、12 mL/min）为三因素，以出粉率为响应值进行优化设计，响应面试验的因素及水平见表1。

表1 响应面试验的因素及水平Table 1 Code and level of independent variables used for Box-Behnken design

1.5 产品香气成分的测定

参考文献[16-19]的方法，做适当的修改，色谱条件为，色谱柱：HP-5石英毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm），进样口温度为 270℃；温度程序：首先以50℃保持2 min，以5℃/min的速率升温至200℃，保持5 min，再以8℃/min的速率升温至270℃，保持5 min。载气为高纯氦气（纯度99.999%）：柱流量为1.0 mL/min；分流进样比 50 ∶1。

质谱条件：电子电离源（EI）；离子化电压为70 eV；离子源温度为230℃；四级杆温度为150℃；接口温度为280℃；质谱扫描范围35 amu～650 amu，溶剂延迟时间2.5 min。

1.6 缓解体力疲劳实验

确定淫羊藿浓缩液和雪菊浓缩液按1∶3比例（体积比）混合，量取混合浓缩液400 mg加入8%β-环糊精，进口温度 150 ℃，选取进料速度 6、8、10、12、14 mL/min，以出粉率为评价指标，进料速度对喷雾干燥出粉率的影响。

1.3.1 进口温度对出粉率的影响

1.6.2 实验方法

1.6.2.1 游泳时间

对小鼠进行灌胃处理30 d后，取8只体重相近小鼠让其在恒温水槽中进行负重游泳（游泳过程中小鼠尾部绑有体重10%的铅丝），水槽深度50 cm，水温（25±2）℃。记录从小鼠自游泳开始沉入水面下10 s后不能浮出水面的时间，此时间即为游泳力竭时间。

使用福林酚法绘制没食子酸标准曲线。取0.1 mL样液于 10 mL具塞比色管中，分别加入 1 mL Folim-ciocalfen于比色管中，充分震荡3～4 min，再分别加入1 mL 10%的NaCO3溶液，充分摇匀，用蒸馏水定容至5 mL，25 ℃恒温1 h，在765 nm波长下测吸光值。在相同条件下测定不同质量浓度的没食子酸吸光度，绘制标准曲线，得到回归方程为：y=184.28x+0.0277，R2=0.999。结果以没食子酸当量表示(mg没食子酸/g干重)[11]。

据科学家预测分析，到本世纪中期，也就是2050年左右，北极的夏季很可能不再有海冰。科学上讲的无冰，是指海冰面积小于100万平方公里。

1.6.2.2 血清尿素测定

末次给受试样品30 min，在温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60 min后把眼球采全血约0.5 mL（不加抗凝剂）。置3 000 r/min离心10 min，取血清备用，按照试剂盒操作步骤。尿素氮含量按下列公式进行计算：

末次给受试样品30 min后处死小鼠，取肝脏，经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，精确称量肝脏100 mg，按照试剂盒操作。糖元含量按下列公式进行计算：

1.6.2.3 肝/肌糖原测定

样品浓度（10 mmol/L）×样品测试前稀释倍数

1.3.3 进料速度对出粉率的影响

2 结果与分析

2.1 喷雾干燥单因素试验结果

2.1.1 进口温度对喷雾干燥成粉率的影响

进口温度对喷雾干燥成粉率的影响见图1。

Bootstrap[3]是Twitter网站推出的一种目前比较流行的开源工具包，基于HTML、JavaScript[4]和CSS开发，具有移动设备优先、支持主流浏览器、响应式设计、简单灵活和容易操作等优点[5-6]。基于Bootstrap框架开发的网站可解决多样化样式和平台无关性问题[5]。国内很多大型网站(如新浪时尚频道、知乎等)和很多主流电商网站(如淘宝、京东等)都采用Bootstrap框架，用户反映效果良好，开发技术成熟。

图1 进口温度对喷雾干燥成粉率的影响Fig.1 Effect of inlet temperature on spray drying rate

进口温度会影响喷雾干燥的成粉率，温度过高会使茶粉出现明显的焦糊味，温度过低会茶粉水分含量高，影响成粉效果。由图1可知，进口温度从140℃到160℃，成粉率先增加后降低，在150℃时成粉率达到最高，但是在140℃～145℃喷出的茶粉黏壁严重，原因可能是水分含量太高，155℃～160℃成粉率有所降低，茶粉干硬，色泽为棕褐色。

确定淫羊藿浓缩液和雪菊浓缩液按1∶3比例（体积比）混合，量取混合浓缩液400 mg分别添加4%、6%、8%、10%、12%的β-环糊精，进口温度150℃，进料速度10 mL/min，以出粉率为评价指标，研究β-环糊精添加量对喷雾干燥出粉率的影响。

β-环糊精添加量对喷雾干燥成粉率的影响见图2。

检测装置安装在大型机械设备吊臂的顶端,报警装置安装在操作室内,通过低功耗无线射频进行数据交互,检测装置和报警装置具有体积小、重量轻、功耗低和安装方便的特点。检测装置获取大型机械设备的机械臂顶端的电场数据,并通过算法计算出检测装置距离输电线的距离,通过低功耗无线射频将距离数据发送到报警装置,报警装置对距离数据进行处理分析,根据检测装置距离输电线路的距离范围进行不同等级的声光报警,提醒作业人员注意设备的操作。同时通过GPRS网络将报警信息发送到后台服务器。工作人员可以通过后台管理系统进行报警状态查看。监控APP能够接收报警信息的实时推送,便于电力工作人员进行报警定位和采取事故应急预案。

β-环糊精添加量的多少会影响进样前物料的浓度，浓度低的时候水分含量过高，降低成粉率，浓度高的时候会影响雾化效果，由图2可知，在4%～12%时，随着β-环糊精添加量的升高，成粉率先增加迅速后趋于平缓，在8%时成粉率达到最高。

图2 β-环糊精添加量对喷雾干燥成粉率的影响Fig.2 Effect of β-cyclodextrin addition on spray drying rate

2.1.3 进料速度对喷雾干燥成粉率的影响

从单因子污染指数法评价结果可以看出，28份荸荠土壤中锌、铜和铬的污染指数均小于1，表明研究区荸荠土壤目前未受到锌、铜和铬元素的污染。从潜在生态风险评价结果来看，锌、铜和铬3种重金属均处于轻微的潜在生态风险水平，其潜在生态危害指数平均值分别为 1.11、2.25 和 0.28，潜在生态危害由强至弱为Cu＞Zn＞Cr。总体上看锌、铜和铬还处于一个较低含量水平，污染风险程度较低，基本符合荸荠安全种植的要求。

进料速度对喷雾干燥成粉率的影响见图3。

她就这样与世长辞了。在一栋尘埃遍地、鬼影憧憧的屋子里得了病，侍候她的只有一个老态龙钟的黑人。我们甚至连她病了也不知道；也早已不想从黑人那里去打听什么消息。他跟谁也不说话，恐怕对她也是如此，他的嗓子似乎由于长久不用变得嘶哑了。

图3 进料速度对喷雾干燥成粉率的影响Fig.3 Effect of feed rate on spray drying rate

由图3可知，在6mL/min～10mL/min时，随着进料速度的提升，成粉率增加迅速，在10 mL/min时成粉率达到最高，6mL/min～8 mL/min出的茶粉干硬。12 mL/min～14 mL/min茶粉粘壁严重。原因是进料速度直接影响物料雾化效果，进料速度过快会使干燥效果不完全，水分含量太高，会出现粘壁严重现象。

2.2 响应面优化喷雾干燥工艺回归模型的建立及显著性检验

响应面试验方案及试验结果见表2。

表2 响应面试验方案及试验结果Table 2 Design and result of response surface

续表2 响应面试验方案及试验结果Continue table 2 Design and result of response surface

通过统计分析软件Design Expert进行数据分析，建立二次响应面回归模型如下：出粉率=72.98+0.3×A-0.91×B+0.045×C+0.35×A×B-0.59×A×C+1.04×B×C-2.72×A2-2.69×B2-3.49×C2。

对喷雾干燥工艺的回归模型进行方差分析，结果见表3。

安排专业技能训练教学，学生分小组强化训练临床基本技能。医院专业指导教师对学生开展真实病例教学，学生直接接触患者进行临床实践，突出人才培养的针对性和开放性，实现教学过程与临床实践过程对接。在医院在岗4O周的实习，在培养学生的操作技能的同时培养学生具有良好医德、医风和综合职业能力。

表3 回归方程的方差分析Table 3 Analysis of variance of regression equation

整体模型的P＜0.000 1，表示该模型极显著；失拟值P=0.316 6＞0.05，表示非试验因素对此试验影响不大；R2=99.96%，R2adj=99.92%，表明该模型与实际情况拟合较好。综上所述，该模型可以用来预测各试验条件对成粉率的影响，最佳的工艺参数：进口温度153.85℃，β-环糊精添加量7.73%，进料速度9.84 mL/min，出粉率71.660 5%，根据实际情况修正条件：进口温度153.00℃，β-环糊精添加量8.00%，进料速度10.00 mL/min，验证试验：成粉率（71.37±0.832）%，与预测结果接近，表明该工艺稳定可靠。

C.用SPSS绘制。利用SPSS绘图，需要将整理表中的数据恢复为原始数据，如图2所示。这里有两个变量，分别是“班级”和“成绩”。变量中数字代码的意义为：“班级”变量中的1—甲班，2—乙班；“成绩”变量中的1—优，2—良，3—中，4—差。代码的中文意义可在变量视图中，通过设置变量值标签来赋予。之后可依次点击菜单中的“图形”→“旧对话框”→“条形图”→“复式条形图”，在个案组摘要中，将“成绩”变量移入类别轴，将“班级”变量移入定义聚类，如图3所示，再点击确定就可得到如图4所示的成绩分布复式条形图。

2.3 淫羊藿雪菊速溶茶的气相色谱-质谱法分析

淫羊藿雪菊速溶茶挥发性成分表见表4、GC-MS分析图见图4。

表4 挥发性成分表Table 4 Table of volatile components

续表4 挥发性成分表Continue table 4 Table of volatile components

图4 淫羊藿雪菊速溶茶GC-MS分析图Fig.4 GC-MS analysis of Epimedium brevicornu Maxim.and Coreopsis tinctoria instant tea

检测出的挥发性香气成分占总封面积32.19%，其中包括8种酯类物质，7种酸类物质，6种醛类，2种烷类物质，3种苯类物质，7种酮类物质，3种烯类物质，4种醇类物质和4种其他类香气成分。分别占总挥发性香气物质的4.33%、11.93%、2.55%、1.14%、2.25%、5.19%、0.4%、1.47%、1.93%，说明淫羊藿雪菊速溶茶的呈味物质丰富。

公安院校思想政治工作事关党对公安工作的绝对领导，事关红色基因的传承发展，事关公安队伍的整体素质和战斗力。因此，在对学生的培养目标中，排在首位的就是锻造忠诚警魂，确保队伍的绝对忠诚、绝对纯洁、绝对可靠。高校思想政治工作的内容非常丰富，其中，思想政治理论课（简称“思政课”）是重中之重。习近平总书记强调，“要用好课堂教学这个主渠道，思想政治理论课要坚持在改进中加强”。那么，认清当前思政课所面临的形势，探讨在此形势下加强和改进思政课建设的若干途径，对于今后更好地发挥好思政课的主渠道作用有着重要意义。

2.4 淫羊藿雪菊速溶茶缓解体力疲劳功能评价结果与分析

淫羊藿雪菊速溶茶对游泳时间、血尿素（BUN）、肝糖原及肌糖原的影响见表5。

表5 淫羊藿雪菊速溶茶对游泳时间、血尿素（BUN）、肝糖原及肌糖原的影响Table 5 Effect of Epimedium brevicornu Maxim.and Coreopsis tinctoria instant tea on swimming time，BUN，Lg and MG

由表5可知，与对照组相比，中高剂量组的淫羊藿雪菊速溶茶液均能延长小鼠的负重游泳时间，中高剂量组与对照组的差异具有统计学意义（P＜0.01）；提示淫羊藿雪菊速溶茶对小鼠缓解体力疲劳有显著的效果。与空白对照组相比，3种剂量组的淫羊藿雪菊速溶茶均能降低小鼠血清中血清尿素（BUN）水平，中高剂量组小鼠血清中BUN水平有极显著差异（P＜0.01），说明小鼠抗体力疲劳能力提高，程倩等[20]研究表明，血尿素含量越低与体内含氮物质的分解正相关，其含量越少，应激疲劳恢复时间越短，这与本试验研究结果相一致；3种剂量组的淫羊藿雪菊速溶茶均显著提升小鼠运动后的肝糖原和肌糖原的含量，淫羊藿雪菊速溶茶高剂量组效果最佳，肝糖原和肌糖原极显著上升（P＜0.01），表明淫羊藿雪菊速溶茶对小鼠肝糖原和肌糖原有促进储备作用，这与张雅莉等[24]研究肝糖原含量显著高于对照组结果相一致。

3 结论

以淫羊藿、雪菊为原料，响应面优化喷雾干燥工艺，制得淫羊藿雪菊速溶茶，得最优工艺为：进口温度153.00℃，β-环糊精添加量8.00%，进料速度10.00 mL/min，成粉率（71.37±0.832）%。通过 GC-MS分析淫羊藿雪菊速溶茶，共检测出香气成分共44种占总面积32.19%。淫羊藿雪菊速溶茶具有缓解体力疲劳功能，可以显著增加小鼠的力竭时间、小鼠的肝糖原和肌糖原含量（P＜0.05），可显著降低血尿素含量（P＜0.05）。这说明淫羊藿雪菊速溶茶具有抗疲劳保健功效，为淫羊藿保健食品开发，丰富雪菊产品种类提供依据。