川乌配伍白芍减毒增效作用研究进展

董辉 李太平 孙晖

[摘要] 川烏与白芍是中医治疗风寒湿痹证的传统药对。近年来，研究人员对川乌配伍白芍的减毒增效作用开展了大量的研究工作，发现川乌配伍白芍可降低双酯型生物碱的含量，抑制双酯型生物碱的吸收，同时增强白芍苷的吸收。此外，二者配伍可有效降低川乌对肝脏药物代谢酶活性的影响，还可对体内小分子代谢物表达水平进行调控。本文从临床应用、化学成分、药效学和毒性评价四个方面对川乌白芍配伍的减毒增效作用进行综述，以期为川乌白芍配伍药对的临床用药安全提供依据，为相关药物的研发提供参考。

[关键词] 川乌;白芍;配伍;药对;减毒增效

[中图分类号] R28          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2020）02（a）-0032-04

[Abstract] Aconiti Radix and Paeoniae Radix Alba are traditional couplet medicines for the treatment of wind-cold-dampness arthralgia syndrome. In recent years， researchers have carried out a lot of research work on the the attenuation and synergism of compatibility of Aconiti Radix and Paeoniae Radix Alba. It is found that the compatibility of Aconiti Radix and Paeoniae Radix Alba can reduce the content of diester-alkaloids， inhibit the absorption of diester-alkaloids， and enhance the absorption of paeoniflorin. In addition， the compatibility of the two herbs can effectively reduce the effect of Aconiti Radix on liver drug metabolic enzyme activity， and also regulate the expression level of small molecule metabolites in vivo. This paper reviews the attenuation and synergism of compatibility of Aconiti Radix and Paeoniae Radix Alba from four aspects of clinical application， chemical composition， pharmacodynamics and toxicity evaluation， so as to provide evidence for the clinical safety of the compatibility of Aconiti Radix and Paeoniae Radix Alba and provide a reference for the development of related drugs.

[Key words] Aconiti Radix; Paeoniae Radix Alba; Compatibility; Couplet medicines; Attenuation and synergism

川乌为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaelii Debx.的干燥母根[1]，始载于《神农本草经》，列为下品，具有祛风除湿、温经止痛之功效。现代药理研究表明，川乌具有抗炎、镇痛、免疫调节及抗肿瘤等作用[2-6]。中医临床常用于治疗风湿及类风湿性关节炎，且疗效显著。但川乌有大毒，在临床使用不当时容易产生不同程度的心脏、神经及生殖系统等方面的毒性反应，严重者甚至危及生命[7-11]。因此，川乌的临床应用受到了极大的制约，也使一些含有川乌的成方制剂的安全性也遭受质疑。然而，中医自古就有采用方剂配伍的方法对有毒中药进行处理，以达到减毒增效的目的。川乌与白芍是中医治疗风湿寒痹证的传统药对，最早见于汉代张仲景的乌头汤。方中取川乌辛热迅猛、力宏速效之性，以搜剔筋骨风寒湿邪而温经，取芍药性寒味酸、阴柔和缓之性，以养血敛阴柔肝而缓急止痛，二者相辅相成，使“宣痹通经”之功效大大增强[12]。历代医家在此基础上对原方进行加减，使乌头汤及其加减方一直沿用至今，经久不衰[13]。近年来，对川乌白芍药对的相关研究日益增多，本文从川乌白芍配伍的临床应用、化学成分、药效及毒性研究方面进行综述。

1 川乌与白芍配伍的临床应用

川乌白芍配伍药对在中医临床常用于治疗风寒湿痹证，且疗效显著，如以乌头汤为代表的经典方剂仍被广泛应用于临床。黎友允等[14]对80例膝关节骨性关节炎患者分别使用乌头汤和附桂骨痛颗粒进行治疗，结果显示乌头汤组患者在疼痛感明显降低、关节功能改善，体内一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达水平也有明显回调，总体显效率达70%;田庆[15]通过观察分别服用加味乌头汤和甲氨蝶呤的50例类风湿性关节炎患者的临床疗效发现，服用加味乌头汤的患者痊愈率及显效率明显优于甲氨蝶呤组;徐晖[16]对60例寒痹型膝骨性关节炎患者进行临床观察，在口服乌头汤加减方的同时药渣外敷，结果显示，治愈18例，显效35例，总有效率达88.3%;邱铕滇等[17]对86例风湿痹症患者分别采用乌头汤和常规西药弗米特进行治疗，测定类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）、血小板计数（PLT）和红细胞沉降率（ESR）等指标，结果显示，乌头汤总体有效率为93.02%，弗米特总体有效率为74.42%;徐子卿[18]收集风寒湿型膝骨关节炎（KOA）患者72例，采用乌头汤加味方进行治疗，并对治疗前后的视觉模拟评分（VAS）、美国特种外科医院（HSS）膝关节评分和疗效进行评价，结果显示，乌头汤加味对患者各项指标均有明显调节作用，能够有效缓解风寒湿型KOA症状，改善膝关节功能，提高患者生活质量，且无不良反应。由此可见，以川乌白芍为核心药对的乌头汤及其加减方的临床应用广泛，且疗效显著，而且川乌白芍药对是中医临床治疗风湿骨病的有效组合。

2 川乌与白芍配伍的化学成分研究

由于乌头类生物碱是川乌中的主要毒性成分，因此，川乌与白芍配伍后的化学成分研究大多集中在乌头类生物碱，尤其是双酯型生物碱的含量变化。越皓等[19]利用电喷雾质谱（ESI-MS）法对乌头及乌头不同配伍药对中乌头类生物碱含量进行检测，结果显示，川乌与白芍配伍后，乌头碱、中乌头碱和次乌头碱等双酯型生物碱含量明显降低，而8-亚油酰-苯甲酰次乌头原碱、8-油酰-苯甲酰脱氧乌头原碱和8-亚油酰-苯甲酰中乌头原碱等脂类生物碱含量升高，说明白芍能使毒性较强的双酯型生物碱发生酯交换，生成毒性相对较弱的脂类生物碱，从而降低川乌的毒性。在体外成分分析的基础上，Fan等[20]对川乌白芍配伍前后的药代动力学变化进行了深入探讨，发现芍药苷可有效降低乌头碱的峰值浓度（Cmax）、延长其达峰时间（Tmax）、缩小AUC（0-t）值，结果表明，芍药苷对乌头碱的药动学行为有影响。黎晓丽等[21]采用皮肤微透析法对乌头配伍白芍后生物碱类成分的药代动力学进行研究，结果显示，二者配伍可缩短3种单酯型生物碱的达峰时间，苯甲酰乌头碱和苯甲酰次乌头碱峰值浓度和AUC都增加;同时，3种双酯型生物碱AUC均降低，次乌头碱的达峰时间延长、峰值浓度降低。此研究表明，白芍能够促进单酯型生物碱的吸收，抑制部分双酯型生物碱的吸收。杨华生等[22-23]通过测定乌头碱、次乌头碱、苯甲酰乌头原碱等6种生物碱的透皮速率和渗透系数发现，川乌配伍白芍后单酯型生物碱渗透系数明显增加，而双酯型生物碱未见明显改变;同时，对大鼠给药后的心脏、肝脏和脾脏等进行检测，发现二者配伍后双酯型生物碱在各脏器组织中含量均呈下降趋势。由此推测，川乌白芍配伍可影响川乌中主要毒性成分双酯型生物碱的吸收，从而起到降低川乌毒性的效果。在关注川乌中毒性成分的同时，研究人员也将白芍中的芍药苷作为研究的重点，如在小鼠皮肤微透析实验中，川乌配伍白芍后，芍药苷的药时曲线下面积[AUC（0-t）]和Cmax明显升高，Tmax显著降低，说明二者配伍能够促进芍药苷的吸收[24]。此外，吴璐等[25]也发现川乌白芍配伍后芍药苷的透皮系数和稳态渗透系数都增加了近3倍，而时滞显著降低，证实了川乌可促进芍药苷的吸收。已有研究表明芍药苷是治疗类风湿性关节炎的主要药效成分，因此，川乌配伍白芍促进芍药苷吸收可能是二者配伍增效的原因之一。

3 川乌与白芍配伍的药效学研究

川乌与白芍配伍大多用于治疗风寒湿痹、麻木疼痛等症。因此，川乌与白芍配伍的药效学研究也主要集中在抗炎、镇痛等方面。有研究人员采用佐剂关节炎、足跖肿胀及足部压痛等多种动物模型对川乌白芍药对配伍前后的足趾肿胀率、炎性因子、类风湿因子和单胺递质进行测定，发现川乌白芍配伍后镇痛、抗炎效果明显增强[26]。李晋奇等[27]研究发现川乌总碱配伍白芍总苷或白芍多糖后，能够有效降低血中P物质、免疫球蛋白和促炎性因子（IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-2、IL-10）含量，同时对下丘脑L-ENK和β-END含量有明显上调，而且配伍给药对滑膜细胞异常亢进分泌造成的线粒体肿胀、内质网扩张、细胞核不规则及核染色质凝集等现象均有不同程度缓解，此结果表明，川乌白芍配伍后药效明显增强。近年来，研究人员在明确川乌白芍配伍可增强药效的基础上，对二者配伍增效的作用机制进行了深入探讨。毕云枫等[28]采用液质联用技术，结合多探针底物方法，检测川乌白芍配伍前后对肝脏代谢酶CYP450活性的影响，研究发现，川乌配伍白芍对CYP3A、CYP2D、CYP2C和CYP1A2的活性有明显调节作用。杨华生等[29]也发现川乌、白芍单独使用对大鼠皮肤微粒体中的CYP3A4酶、肝微粒体中的CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2D6酶有明显抑制作用，而二者配伍后对这些酶的活性有显著提高。以上研究表明，川乌配伍白芍可改变皮肤和肝脏中的药酶活性，从而影响川乌、白芍中化学成分的代谢速度，发挥“增效减毒”的作用。此外，吴璐等[30]通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blot方法對川乌配伍白芍后Mdrla mRNA、P-糖蛋白的表达进行测定，结果发现，川乌白芍配伍对Mdrla mRNA、P-糖蛋白的表达有明显下调，推测二者配伍可抑制P-蛋白活性及外排作用，促进有效成分在脑组织中的分布，从而使药效增强。

4 川乌与白芍配伍的毒性研究

川乌的毒性以及其配伍减毒作用一直都是研究的热点问题。有研究人员通过急性毒性试验发现，与单独灌胃乌头碱（1.80 mg/kg）比较，同时给予乌头碱（1.80 mg/kg）与芍药苷（240 mg/kg）可将小鼠致死率由50%降至15%，半数致死量（LD50）也由1.80 mg/kg提升至2.30 mg/kg，说明芍药苷可有效降低乌头碱的毒性[31]。郑琴等[32]对不同比例配伍的乌头碱与芍药苷在Caco-2细胞上的转运进行考察，结果显示，乌头碱与芍药苷配伍比例达到1∶60时，乌头碱转运量显著降低，表观渗透系数Papp值明显减小，说明在此配伍比例下芍药苷能有效抑制乌头碱的吸收，从而降低乌头碱对机体的毒性作用。张舒涵[33]考察了乌头碱配伍芍药苷前后对心肌细胞系H9c2细胞的毒性作用，研究发现乌头碱配伍芍药苷后可有效抑制H9c2细胞增殖，对乌头碱造成的细胞膜损伤、细胞器破坏和细胞空腔等有明显的改善;同时，对细胞内超氧化物歧化酶（SOD）表达水平、心脏缝隙连接通道蛋白Cx43活性及心脏离子通道蛋白SCN5A和RyR2表达均有不同程度的回调。此研究表明，芍药苷能够有效降低乌头碱的心脏毒性。随着代谢组学技术的发展，许多研究人员也将其应用于有毒中药的毒性评价。如利用代谢组学方法对口服给予川乌后大鼠的毒性发生、发展全程进行了全程监测，最终确定了4，6-二羟基喹啉、5-L-谷酰基牛磺酸和3-吲哚-羧酸葡萄糖苷等17个与川乌毒性相关的生物标志物，并发现这些毒性生物标志物与戊糖和葡萄糖醛酸酯转化、淀粉和蔗糖代谢、氨基糖与核苷糖代谢等代谢通路相关，推测川乌的毒性与这些代谢通路的扰动有关[34];在此基础上，再以这17个毒性生物标志物为切入点，对川乌配伍白芍后的减毒作用进行了探讨，发现白芍对与川乌毒性相关的生物标志物均有明显的回调作用，从代谢组学层面诠释了川乌白芍药对的配伍减毒作用[35]。

综上所述，国内外学者对川乌白芍药对配伍前后的化学成分、药效、毒性等进行了系统研究，从多个层面对川乌白芍配伍后的减毒增效作用机制进行探讨，诠释了二者配伍后的减毒增效作用，也佐证了中医方剂配伍的科学性，为川乌等有毒中药的临床用药安全提供了依据。

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（收稿日期：2019-05-22  本文编辑：张瑜杰）