巴戟天及其炮制品的成分比较研究*

焦豪妍，薛 雪，刘 浩，麦锐楷，汤庆发

(1 广东食品药品职业学院，广东 广州 510520；2 南方医科大学，广东省中药制剂重点实验室，广东省中药制剂技术工程实验室，广东 广州 510515)

巴戟天(Morindaofficinalis)为茜草科(Rubiaceae)多年生攀援木质藤本植物巴戟天(MorindaofficinalisHow.)的干燥根，始载于《神农本草经》，为“四大南药”之一，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效，被誉为“补肾阳之要药”。临床上用于治疗阳痿遗精、宫冷不孕、月经不调、少腹冷痛、风湿痹痛和筋骨痿软等症，是历代医家常用药物之一[1-3]。

盐炙是巴戟天最传统的炮制方法之一，制后专入肾经，温而不燥，以补肾壮阳为主，且作用缓和，久服多服无伤阴之弊[4]。巴戟天炮制前后药性和药效发生了变化，必然是伴随成分的变化而产生的，故本文采用蒸馏水、95%乙醇和氯仿三种溶剂巴戟天和盐炙巴戟天，HPLC法考察盐炙前后化学成分的变化。

1 仪器与试药

1.1 仪 器

Agilent 1260高效液相色谱仪，美国安捷伦科技有限公司；PL602-S电子天平，瑞士Mettler Toledo公司；HH-S4数显恒温水浴锅，江苏金怡仪器科技有限公司；N-1100旋转蒸发仪，日本东京理化机械株式会社；CA-1111冷阱，日本东京理化机械株式会社。

1.2 试药与材料

巴戟天药材来源于广东德庆，经南方医科大学药用植物学教研室刘传明副教授鉴定为巴戟天MorindaeofficinalisHow.的干燥根。乙腈和磷酸为色谱纯，三氯甲烷为分析纯，均购自广州化学试剂厂；水为去离子水。

2 方法与结果

2.1 巴戟天盐炙品的制备

巴戟天盐炙品参照《中国药典》制备：称取约300 g巴戟肉与6 g食盐。向食盐中加入少量水使完全溶解。将食盐水与巴戟肉混合，搅拌5 min，闷润5 min至盐水被完全吸收。放入蒸制容器中，武火加热，待“圆气”(即蒸制容器周边往外冒蒸汽的状态)时改为文火，蒸制70 min后取出，60 ℃下干燥2 h。未炮制品与炮制品各取少许留样，其余分别粉碎。

2.2 供试品溶液的制备

2.2.1 水提巴戟肉与水提盐巴戟供试品溶液的制备

分别称取巴戟肉和盐巴戟10 g于200 mL圆底烧瓶中，加入100 mL蒸馏水浸泡30 min。在80 ℃下水浴回流1 h。分别抽滤，滤渣留样。滤液使用旋转蒸发仪在60 ℃下分别蒸干。加入少许蒸馏水，在50 ℃ 100 Hz，超声复溶50 min。转移到2 mL容量瓶中，加水定容至2 mL。使用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.2.2 醇提巴戟肉与醇提盐巴戟供试品溶液的制备

分别称取巴戟肉和盐巴戟10 g于200 mL圆底烧瓶中，加入100 mL 95%乙醇浸泡30 min。在80 ℃下水浴回流1 h。分别抽滤，滤渣留样。滤液使用旋转蒸发仪在60 ℃下分别蒸干。加入少许蒸馏水与95%乙醇，在40 ℃ 100 Hz，超声复溶30 min。转移到2 mL容量瓶中，加95%乙醇定容至2 mL。使用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 氯仿提巴戟肉与氯仿提盐巴戟供试品溶液的制备

分别称取巴戟肉和盐巴戟10 g于200 mL圆底烧瓶中，加入100 mL氯仿浸泡 30 min。在80 ℃下水浴回流1 h。分别抽滤，滤渣留样。滤液使用旋转蒸发仪在60 ℃下分别蒸干。加入少许95%乙醇，在40 ℃ 100 Hz，超声复溶30 min。转移到2 mL容量瓶中，加95%乙醇定容至2 mL。使用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.3 色谱条件

色谱柱5C18-AR-II(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)；梯度洗脱(0～10 min，5%A；10～14 min，5%～37%A；14～25 min，37%～41%A；25～35 min，41%～42%A；35～70 min，42%～50%A)。体积流量1.0 mL/min；进样量 5 μL；检测波长277 nm；柱温30 ℃。

2.4 样品测定

精密吸取5 μL供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定，记录70 min的色谱图，对各峰面积进行积分。

2.5 结 果

2.5.1 水提巴戟肉和水提盐巴戟在炮制前后的成分变化情况

经考察比较巴戟肉和盐巴戟的水提物色谱图后发现，巴戟肉经盐炙后，出现了新的色谱峰6.05 min(X1)与8.14 min(X2)，且X2峰面积是X1峰面积的149%；峰面积减少的峰是18.16 min(X3)，峰面积减少了73%。

图1 水提巴戟肉与水提盐巴戟HPLC图谱比较

2.5.2 醇提巴戟肉和醇提盐巴戟在炮制前后的成分变化情况

经考察比较巴戟肉和盐巴戟的醇提物色谱图后发现，巴戟肉经盐炙后，出现了新的色谱峰5.89 min(Y1)与7.87 min(Y2)，且Y2峰面积是Y1峰面积的772%；峰面积减少的峰分别是18.18 min(Y3)、26.61 min(Y4)、27.77 min(Y5)和31.75 min(Y6)，分别减少了88%、51%、47%和42%。

图2 醇提巴戟肉与醇提盐巴戟HPLC图谱比较

2.5.3 氯仿提巴戟肉和氯仿提盐巴戟在炮制前后的成分变化情况

经考察比较巴戟肉和盐巴戟的氯仿提取物色谱图后发现，巴戟肉经盐炙后，出现了新的色谱峰5.98 min(Z1)与8.04 min(Z2)，且Z2峰面积是Z1峰面积的524%；峰面积减少的峰分别是24.97 min(Z3)、25.55 min(Z4)和26.60 min(Z5)，分别减少了83%、82%和61%。

图3 氯仿提巴戟肉与氯仿提盐巴戟HPLC图谱比较

3 结 论

中药炮制是古人对中医长期临床用药经验的总结，是古代医家才能巧智慧的直接体现，有一定的实践性和科学性。盐，是日常生活中常见的调味品之一，最早收载于《神农本草经》，列为中品，性味咸、寒，入胃、肾、大小肠经。以盐为辅料的盐制法是中药炮制的常见方法之一[5-6]。

巴戟天经盐炙后，95%醇提取样品中Y1和Y2处的峰面积在盐炙后有明显增加，分别是62倍和33倍；而16 min后的共有峰峰面积都呈现不同程度的减少。水提取样品中X1和X2处的峰面积在盐炙后有明显增加，分别是4倍和150倍；而16 min后的共有峰峰面积都呈现不同程度的减少。氯仿提取样品中Z1和Z2处的峰面积在盐炙后有明显增加，分别是72倍和58倍；而16 min后的共有峰峰面积都呈现不同程度的减少或变化不大。

综上所述，巴戟天在盐炙前后成分发生了较大的变化，此成分变化需要采用对照品进行进一步的确认和研究，并结合药效变化，探寻成分和药效之间的联系。