不同保存时间和温度对血浆凝血Ⅷ、Ⅸ因子活性的影响

李毓龙，张正超，贺腊

（简阳市人民医院检验科,四川 简阳）

0 引言

凝血Ⅷ、Ⅸ因子缺乏是血友病最常见的原因，而新鲜冰冻血浆（Fresh frozen plasma，FFP）恰恰能补充这两项凝血因子，对于血友病患者出血的止血，Ⅷ、Ⅸ因子具有非常重要的作用。目前FFP常规运用于临床手术输血患者，适应证主要有3类：预防出血（预防性输注）、止血（治疗性输注）和血浆置换[1]。传统理论认为FFP在37℃融化后应立即给患者输注，然临床治疗过程中经常因各种原因导致已融化的FFP不能及时输给患者，且融化后的血浆不能重新冰冻，此时血浆液化状态下的保存就至关重要了。笔者对我市中心血站提供的FFP随机抽查40份，将融化后的FFP在（4±2）℃、（22±2）℃温度保存至72h，在不同的时间点进行不同保存温度凝血因子Ⅷ、Ⅸ活性水平检测，现报告如下。均希森美康医用电子（上海）有限公司提供。

1.2 取样方法

随机抽取40份FFP（50 mL人份）37℃水浴完全融化后分别置 0、6、12、24、48、72h，严格按无菌操作技术要求抽取血浆 2mL注入试管内，分别放置4℃和22℃冰箱，按照不同保存时间检测。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析。计数资料以均数±标准差（Mean±SD）表示，不同时点采取单因素方差分析，采用配对t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

1 材料与方法

1.1 样本来源

40份FFP均来成都市中心血站，CPD-A 抗凝新鲜血液分离制备而成。实验仪器：SYSMEX CS5100全自动凝血分析仪。试剂

2.1 FFP融化后在4℃和22℃保存6h，Ⅷ凝血因子活性与0h比较差异无显著意义(P＞0.05)，但超过12h，差异有统计学意义(P＜0.05)；FFP融化后在4℃和22℃保存24h，Ⅸ凝血因子活性与0h比较差异无显著意义(P＞0.05)，但超过48h，差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1、表2。

表1 4℃不同保存时间Ⅷ、Ⅸ凝血因子检测结果 Mean±SD

表2 22℃不同保存时间Ⅷ、Ⅸ凝血因子检测结果 Mean±SD

2.2 两个不同保存温度下在同一保存时间点Ⅷ因子活性几乎相同，完全线性先关，相关度r=0.999，线性方程为y=1.0005x-0.0274（见图1）；两个不同保存温度下在同一保存时间点Ⅸ因子活性几乎相同，完全线性先关，相关度r=0.999，线性方程为y=1.0003x-0.018（见图2）。

图1 Ⅷ因子活性相关性

图2 Ⅸ因子活性相关性

3 讨论

新鲜冰冻血浆（FFP）是临床输血治疗中最常用的成分血之一，是指采血后6-8h内在4℃左右下离心分离，速冻并保存于-18℃以下的血浆[2]。如今，成分输血在临床运用极其广泛，FFP大量运用于凝血因子缺乏[3]、弥散性血管内凝血[4]、血栓性血小板减少性紫癜[5]、华法林效应的逆转[6]、严重肝脏疾病[7]、外科出血[8]等患者。FFP是临床上凝血因子缺乏尤其是Ⅷ、Ⅸ因子缺乏的血友病等疾病的替代疗法。随着技术的发展和医疗的便、宜，同临床上大多数血液制品一样，FFP的使用日益增多，其不合理使用以及输注后导致的感染和非感染性危险越来越受到关注[9]。本研究通过对不同的时间点进行不同保存温度凝血因子Ⅷ、Ⅸ活性水平检测，旨在探讨FFP融化后的临床应用，以期达到临床疗效，减少无效输注率。

FⅧ是不稳定因子，本次实验结果表明：随着时间的延长其活性明显降低，在融化后12h活性下降明显，这与FⅧ因子在体外半衰期只有12-24h有关[10]；FⅨ是稳定因子，在融化后6、12、24h保存其活性下降不明显，48h后FⅨ活性下降明显。本研究结果同时表明凝血因子Ⅷ、Ⅸ在4和22℃保存时活性水平衰减无差异，与文献报道基本一致[2][11]。所以，临床手术输血治疗过程中，需要输注FFP时，应在其融化后尽快输注为好。在没有新鲜冰冻血浆或新鲜冰冻血浆紧缺的情况下，如果输注目的是为了补充凝血因子Ⅷ、Ⅸ，可以用冷沉淀来替代FFP进行治疗。在输血工作中时若出现FFP融化后不能及时输给患者，只有在融化后6h内输注以纠正Ⅷ因子缺乏是最有效的。因为新鲜冰冻血浆融化后凝血因子活性随放置时间的不同呈下降趋势，所以这要求我们临床医务工作者在新鲜冰冻血浆融化后尽快输注，这样才能有效地补充患者凝血因子，做到避免血液成分的浪费，达到止血的目的，以确保临床治疗的最佳效果。