保加利亚一例散养户发生非洲猪瘟案例报告

2020-03-27李艳青编译朱秀高

猪业科学 2020年1期

李艳青（编译），朱秀高（校）

（1.潍坊科技学院生物研发中心，山东寿光 262700；2.武汉回盛生物科技有限公司，湖北武汉 430042）

1 简介

非洲猪瘟是发生于野猪和家猪的一种致命疾病，对全球养猪业造成了严重经济损失，特别是在中国、蒙古和南亚地区。它不仅影响大型猪场，还会影响小猪场。1921年该病首次在非洲发现，并成为非洲的地方流行性疾病，目前在全球主要养猪地区都已出现。欧亚地区的流行开始于2007年，首先在格鲁吉亚，随后扩展到高加索地区、俄罗斯、乌克兰和白俄罗斯。2014年非洲猪瘟在波罗的海国家和波兰出现，并在当地野猪群呈地方流行性。接下来的几年里捷克、匈牙利、罗马尼亚和比利时相继暴发。2018年，罗马尼亚南部临近保加利亚地区有数百散养户暴发了非洲猪瘟。从此，保加利亚一直处于疾病传入的高风险状态。

散养户的低标准生物安全措施使他们非常容易成为疾病传入的门户。但散养户目前存在于世界上许多国家的农村地区，是此类地区农业的重要组成部分。这是由于猪不仅是当地人重要或唯一的肉食品来源，还给养殖户提供了可观收入。保加利亚96%猪场为散养户（不超过10头猪），他们饲养了全国34%的存栏生猪。2018年8月，保加利亚首例非洲猪瘟疫情出现在Varna地区一个存栏7头猪的散养户。

在报告中，我们详细报告了该散养户的整个发病过程和所采取的控制措施，并通过所有可用数据，评估疾病可能传入的时间点和发病过程中的高风险期。欧洲范围内目前仅有很少非洲猪瘟的案例报告，且多数都集中在大型规模化猪场，还缺少散养户的案例。因此这个报告可以让大家更好地理解非洲猪瘟在散养户的发病经过。

2 方法

发病过程的调查由当地兽医主管部门根据欧盟法律进行。为了解更多发病细节，我们对猪场设施进行了采样，利用半提纲化访谈从当地农民处收集到了一些信息，访谈主题包括猪场基本情况、发病过程、发病及死后症状、生物安全措施、猪只移动情况、近期进入猪场的人员情况和饲料购买情况。另外将样品的实验室检测结果作为参考。最后，根据可能性大小确定几个不同的病毒传入途径。利用Nurmoja公布的方法对实验室结果和临床数据进行评价，以预测高风险时期的死亡率数据。分析中潜伏期假定为5 d、ASFV 基因Ⅱ型感染后的病毒平均存活时间假定为10 d。

3 病例描述

3.1 猪场基本情况

感染猪场位于Varna农村地区一个有120户人家的小村子，村内几乎一半人家都散养了几头猪。村子周边主要是大片平原性农田，间或有一些森林位于小山坡上。村子里农户通过养猪或其他畜禽作为他们半自足式农业的一部分。发病猪场的7头猪（2头母猪、4头肥猪和1头公猪）与绵羊、驴、兔子和鸡在一块饲养（见图1）。每个猪圈大约6 m2，猪圈的一多半是半封闭式，这个区域内猪只间可以通过围栏的缝隙相互接触；另一部分是全封闭式。猪的饮水来自当地饮水管道，通过软管进入每个舍内，饲料是利用本地农业合作社提供的当地产农作物（主要是向日葵种子和小麦），自己混合后制成的配合饲料。根据农户提供的信息，没有给猪喂过剩菜剩饭。猪场主人和他家人的主要工作就是饲养这些动物，忙不过来的时候会找同事或邻居帮忙。除此之外，没有其他人进入过这家农户的院落和畜舍之间。所有猪都是2017年在该农户决定重新开始给猪配种时购入，公猪是为了配种从周边猪场买入，最后一次买卖猪是在2018年5月。

图1是根据发病的时间先后顺序和实验室检测结果重绘了可能的病毒传播过程，并根据死亡时间点对猪进行了编号。

3.2 发病过程

8 月16 日，发现1#怀孕母猪死亡，之前一天这头猪出现发热、沉郁和采食量下降等非特异性临床症状，请兽医进行了对症治疗，由于该农户没人在家，所以他的同事掩埋了死猪。8 月27 日，2#育肥猪在用抗生素和消炎药治疗后死亡，这头猪也出现了跟1#母猪类似的非特异性临床症状。8 月28 日，3#母猪也出现类似症状死亡，尸体与2#肥猪一起被农户掩埋。8 月29 日，4#公猪死亡后农户将这些信息告诉村长，由村长向官方兽医部门汇报。随后尸体解剖发现了很多指向ASF的症状，如淋巴结出血、脾脏肿大、肾脏皮质点状出血。采集的样品在位于索菲亚的保加利亚国家参考实验室和位于马德里的欧盟非洲猪瘟参考实验室，利用qPCR、IPA和病毒分离技术进行初检和复检。结果显示，4#公猪的脾脏、肾脏和淋巴结在IPA 和qPCR 检测中均呈阳性，从脾脏和淋巴结中分离到了ASFV。8 月31 日官方确认发病后，剩下的3头猪5-7#被扑杀并进行了采样检测，结果2 头位于同一猪圈内表现出相同非特异性症状的肥猪均为ASFV 阳性（病毒分离和基因检测），其中5#肥猪的ASFV 抗体也是阳性（滴度偏低，1 ∶20），6#肥猪为抗体阴性。饲养在饲养管理通道另一侧猪圈的7#肥猪既没有表现任何临床症状，实验室检测抗原和抗体也均为阴性。2 头之前死亡后掩埋的尸体挖出后进行了取样检测，结果2 头尸体的样本均为ASFV 基因阳性。

3.3 控制措施

确诊后当地根据欧盟法规采取了控制措施。村内所有猪共90 头大猪和1 头怀孕母猪全部进行了扑杀，直至9 月3 日才完成。由于村子里这些猪场都没有在官方注册，所以保加利亚政府没有给予扑杀后的补偿，扑杀后的猪只根据保加利亚环保部要求在村子附近进行了掩埋。所有可能受到污染的道路及扑杀过程中用的车辆和工具等都采取了清洁和消毒措施，发病场农户之前掩埋的3 头死猪尸体也挖出与石灰一起重新掩埋在了2 m 深的位置，掩埋后地面和工具都用卫可消毒剂进行了消毒。为确认该病是否已经传染到其他村子，对其附近10 km 区域内的猪只进行了取样，从9 月3 日到18 日该区域内的采样量已经占到总存栏数的90%（总计70 头猪），所有样品的qPCR 和ELISA 均呈ASFV 阴性。区域内传统散养模式猪场如East Balkan Swine 的农户被要求暂时待在猪场及附近区域内；所有养猪农户被要求必须进行官方注册并采取一些基本的生物安全措施；受威胁区的农户被要求发现死猪后须立即向政府部门汇报以进行ASF 检测；在受威胁区内猎户被要求进行所狩猎野猪的采样检测，并在发现死亡野猪后进行汇报和采样检测，在野猪样品检测呈ASF 阴性之前不能移动野猪尸体或销售任何肉品。

3.4 基因分析

从4#猪的脾脏采样检测ASFV的基因序列，检测结果显示ASFVBulgaria 2018/1 毒株的长度为190.587 bp，与东欧分离株、西欧分离株和亚洲分离株的同源性达到99.9%。

4 讨论

4.1 高风险期

高风险期（HRP）是指ASFV开始在猪场出现到疾病确诊的阶段，对这一时间点进行预估，可以有效评估疾病的传播路径。为确定本次流行的HRP，对实验室检测数据和猪场死亡率数据进行综合分析。第1头猪出现ASF 症状的时间为8 月16日，根据感染后10 d 的存活期计算，病毒进入该猪场的时间应为2018 年8 月初，这样从病毒进入猪场到出现疑似病例周期就是25 d，相比爱沙尼亚HRP 为11 d 的周期偏长，HRP越长、病毒的传播机会越多。出现这一情况的原因很可能是发病后没有及时向当地兽医主管部门报告，因此，应让农户更好地认识ASF 的症状，可以使他们可以及时报告。此外，兽医应当避免对ASFV 感染猪采取任何治疗措施。在这一案例中，第1 头猪和第2 头猪之间的发病日期相差11 d，从而导致农户没有将两个病例进行相互联系。

4.2 可能的传播过程

1#母猪是猪场死亡的第1 头猪，之后11ü 15 d 间其他感染猪陆续发病死亡。病毒进入猪场后1#母猪是唯一被感染的对象，2-6#猪很可能在刚开始没有被感染，之后通过与1#母猪直接或间接接触而被感染，7#猪直到所有猪都被扑杀后也没有被感染。7#与其他猪唯一的隔离措施就是一条大约1 m 宽的饲养管理通道，虽然7#猪与其他猪无法直接接触，但所有猪均共用饲喂和清洁工具。不过农户也无法清楚描述猪场的饲喂和清洁顺序，以解释为什么7#猪没有被感染。猪只间通过血液或含血分泌物直接接触传播很可能是走廊另一侧存栏猪相互传染的方式，没有直接接触可以解释为什么相互隔离的猪只间没有被感染，这也证明该病具有显著的缓慢传播特性。

4.3 生物安全和潜在传入途径

在多数感染国家，ASF 主要出现在散养户，这与此类猪场的低生物安全措施有关。同时，猪扑杀后多数没有任何补偿措施，导致农户考虑如何减少损失，从而出现很多售卖病猪肉的情况，这种带毒病猪肉会卖的比较便宜，使其更容易进入家庭的餐桌，进而容易作为剩菜剩饭用于饲喂其他猪。尽管在欧盟使用剩菜剩饭喂猪是被禁止的，但在一些小猪场这种情况依然存在。本案例中，人为因素将该病毒带入猪场的可能性最大。

4.4 控制措施

散养户采取的控制措施必须根据当地条件针对性制定。法规中的ASF 控制和净化方案更多是依据规模化猪场确定，而忽略了散养户这一群体的特点。本案例中保加利亚这个发病猪场所在村子有一半多都是散养户，每户的存栏量都是1 ～2头。尽管每户的猪都养在各自封闭的圈内，但其生物安全措施非常低。因此整个村子都被作为疫区，作为预防措施，村内所有猪都被扑杀。但从本案例可以发现，如果控制措施能够被严格执行，散养户出现ASF 后是能够被有效控制的。通常，散养户都没有在官方注册，发病时一方面他们很难准确诊断，另一方面也无法收到因控制疾病传播而采取扑杀措施后的补偿。所以，也就可以理解他们为了减少扑杀造成的损失，而选择不报告猪场发病情况。发病后如果农户想要复养，则应告诉他们应该到官方注册，注册时强制要求其对猪场采取基本的生物安全措施。ASF 在当地野猪群体流行的不确定性要求我们要重视疾病的监测。及时对发病野猪取样检测是早期疾病监测和有效控制疾病的重要措施。散养户使用的饲料原料多来自周边农田且未经任何处理，这些农作物可能被患病野猪污染。如果他们了解本地野猪群的疾病流行状态，就会对这些农作物采取进一步处理措施，如加热等，就可以有效预防该病传入猪场。