栎树桑黄提取物诱导胃癌细胞凋亡作用的研究

李俊燕

【摘要】目的：分析栎树桑黄提取物（OPL）在诱导胃癌细胞凋灵过程当中的作用。方法：采用实验研究方法，对于不同浓度OPL对人癌细胞增值率抑制作用进行分析，通过流式细胞检查术，对细胞双染色流式进行SGC-7901周期蛋白检测，并通过Cyclindl表达方式，对蛋白质的凋零进行表达，分析周期阻滞作用。结果：OPL可以明显抑制人癌细胞增生，并且对细胞凋零产生诱导作用，细胞在阻滞蛋白GO-G1周期内（P<0.05），蛋白表达PARP下降幅度（P<0.05）。结论：不同浓度OPL对人癌细胞SGC-7901具有差异化诱导作用，可以有效将细胞阻滞在GO-G1周期内。

【关键词】栎树桑黄提取物;胃癌细胞;GO-G1周期

【中图分类号】R735 【文献标识码】A 【文章编号】1002-8714（2020）01-0160-01

前言：胃癌发病常见、致死率高，在世界常见胃癌类型当中排名第4。目前临床当中，主要采用手术切除方法，来对胃癌进行治疗，但该种方法不仅会对患者生活造成严重影响，还有较高复发率。大部分患者及时进行手术切除，仍需要进行化学放疗，该种放疗不良反应较多，患者白细胞以及肝肾功能都受到不同程度影响。本院主要结合栎树桑黄这种高等真菌药物，对胃癌细胞凋灵作用进行诱导分析，现报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料

选择南京凯基生物生命工程有限公司生产的人癌细胞株，以及美国高思生物生命工程公司生产的高糖培养基。人癌细胞凋亡和周期实验盒选择上海贝博生命工程公司生产的蛋白浓度测试计、上海碧云生命工程公司生产的生物抗结剂。实验所用OPL为人工乙醇提取物，在95%浓度乙醇当中提炼制取，提取率在6.75%-6.85之间，OPL为人工培养制取，产量、规模、品质、具体含量均可控，在实验周期内可以基本保持稳定

1.2方法

将四种不同的肿瘤细胞在不同浓度的高糖培养基当中，进行系统培养，并按照编号，加入100U/ml链霉素和100U/ml青霉素，调整二氧化碳饱和浓度，在37℃的恒温细胞培养箱当中，对肿瘤细胞进行培养。

MTT细胞增殖检测。对不同类型的人癌细胞进行增殖检测，分析SGC-7901，HCT-113.DFD-231，hela细胞在四种浓度OPL当中的生长数量。设置96孔培养基底盒，按照药物浓度不同，进行清液提取，通过酶联免疫检测方法，对增殖数值进行检测。

ANNEXIN-V/PI细胞凋亡检测。通过96孔培养皿当中细胞的收集情况，进行避光孵育。48h之后，取出，通过PBS清洗，加入染色剂，进行观察。

1.3统计学方法

统计学软件为SPSS21.0。计量资料采用t检验，以均数±标准差（x±s）表示;计数资料以x²检验，以率（%）表示。P<0.05表示差异有统计学意义。

2结果

OPL对四种不同人癌细胞的增生具有明显抑制作用，但不同浓度的OPL抑制作用具有明显差别，100чg/ml 与200чg/mlOPL抑制率之间，具有显著差异（x²=13.121，P<0.05），200чg/ml与300чg/mlOPL抑制率之间，具有显著差异（x²=14.923，P<0.05），300чg/ml与400чg/mlOPL抑制率之间，具有显著差异（x²=11.231，P<0.05），100чg/ml与400чg/mlOPL抑制率之间，具有显著差异（x²=14.176，P<0.05）

表1 不同浓度人癌细胞抑制率对比

通过48h培养之后，不同浓度OPL对人癌细胞的抑制作用明显上升，细胞完整核膜被破坏，呈现出不规则收缩状态，大部分细胞核碎裂，呈现出破碎的蓝色荧光。

3讨论

目前在胃癌治疗当中，通过化疗大部分患者都会出现非常严重的不良反应，因而，寻找低细胞毒性的抗肿瘤药物，对于癌症患者来说，需求非常迫切。很多医院都向传统中医寻求答案，例如栎树桑黄就是一种低毒性真菌。桑黄提取物OPL可以对肿瘤细胞增殖起到不同浓度的抑制作用，从而对肿瘤细胞的发展周期起到一定阻滞。也就是说，应用这种真菌，肿瘤细胞的无节制增值可以得到限制。细胞加速到程序性死亡阶段，从变圆、片化，逐渐成为小体，凋亡细胞内膜部分的线粒体电位发生改变。从本文研究可以看出，300чg/mlOPL作用在胃癌SGC-7901细胞48h之后，细胞凋亡的速度可以上升70%，细胞不受控制的增值可以得到明显的抑制。

有研究指出，栎树桑黄可对细胞粒体途径发生改变作用，通过粒體接入等方式，促进正向调节作用发挥，提高凋亡蛋白产生效率。通过这种方式，胃癌SGC-7901细胞凋亡速度可提高60%-75%，这与本研究成果一致。

综上所述，栎树桑黄具有良好的胃癌细胞凋零诱导作用，可降低化疗不良反应，利于患者预后，可推广。