HPLC法测定三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量
2020-03-24何书平
何书平
【摘要】目的：为测定饮片厂采购三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量，以三七为研究对象，用高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1的含量。方法：色谱柱为C18（250 mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈-水（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为203nm。结果：结果表明，三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷Rl的含量符合2015年版《中国药典》标准。
【关键词】三七;人参皂苷Rb1;人参皂苷Rg1;三七皂苷R1;水分测定;含量测定;高效液相色谱法
【中图分类号】R286.0;0657.72 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714（2020）01-0141-02
三七为五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.） F.H.Chen的干燥根和根茎。性温，味甘、微苦。归肝、胃经。散瘀止血，消肿定痛。三七是文山的道地药材，俗称“金不换”，皂苷类成份是三七的主要活性成分。自上世纪40年代开始，国内外对三七进行的广泛研究，发现其可降血压、调血脂、改善心肌缺血等多方面的药理作用，目前被广泛应用于临床。
1实验材料
三七粉末（过四号筛）。
1.1实验仪器
Aglient高效液相色谱仪、101-1-S-Ⅱ型电热恒温鼓风干燥箱、称量瓶、BS/BT系列电子天平
1.2试剂
人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1、甲醇（色普纯）、乙腈（色谱纯）、纯化水
2实验方法
2.1水分测定
三七水分测定用2015年版《中国药典》0832水分测定法第二法（烘干法），取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，开启瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过Smg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）。
2.2色谱条件与系统适用性试验
色谱柱为C18（250mm×4.6 mm，5μm），流动相为乙腈-水（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为203nm。
对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rb10.4mg、人参皂苷Rg10.4mg、三七皂苷R19.1mg的混合溶液，即得。
供试品制备：取2份三七粉末（过四号筛）约0.6g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2小时，放冷，在称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定。
3实验结果
3.1水分测定结果
3.2人参皂苷Rh1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品色谱图、三七样品色谱图（图1、2）
圖1 人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品色谱图
图2 三七样品色谱图
3.3含量结果
测量对照品溶液和供试品溶液中待测物质的峰面积，按下式计算含量：含量（CX=CR×AX/AR，见表1、表2。
表1 人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1对照品峰面积
表2三七中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1含量测定结果
4结论
本次实验对中药饮片厂采购三七对照2015年版《中国药典》，用HPLC法对其进行含量测定，按干燥品计算，含人参皂苷Rg1（C42H72014）、人参皂苷Rb1（C54H92033）、三七皂苷R1（C47H80018）总量不得少于5.0%。收购三七符合药典规定的含量，保证饮片的安全发放。
