应用免疫荧光法 诊断猪流行性腹泻的探讨

文/ 招远市玲珑畜牧兽医站 杨金宝 王亮

猪流行性腹泻是猪养殖过程中十分常见的一种疾病，疾病发生后会导致病猪出现不同程度的感染、腹泻现象，甚至在病情较为严重的情况下可导致脱水现象，威胁到病猪的生命安全，在增加病猪死亡率的同时给养殖户带来严重的经济损失；因此如何对猪流行性腹泻病做出有效的诊断，就对于早期治疗和预防工作的开展具有重要意义。

一、资料和方法

一般资料。在2017 年1 月到2019 年2 月之间选择40 头疑似为流行性腹泻的病猪作为研究对象，病猪死前伴随严重的腹泻、精神不佳、喜卧等症状，病猪中公猪24 头，母猪16 头，其体重为14 ～52 千克，平均体重为（36.21±2.03）千克；本次研究开始前已经和相关部门、养殖单位取得了沟通，其均表示知情且支持本次研究的开展。

方法。对病猪进行解剖，选择其部分小肠作为冰冻切片，或者选择小肠黏膜实施抹片，将其标本置于自然环境中风干，风干后使用丙酮进行固定，而后加荧光抗体进行染色，对其进行充分水洗后封盖，此后实施镜检，并得出相关的检查结果。此外对病猪均实施电镜检查，以获得相关检查结果和本次研究的价值进行对比。

观察指标。观察本次研究检查结果，同时将兽医研究所所得病理检查结果作为金标准，统计本次所用方法的检测准确率。其中免疫荧光法和病理检查的符合例数，除以研究总数量后乘以百分之百记为检测准确率。

统计学分析。将SPSS25.0 作为本次数据处理软件，使用n 统计本次研究中计数资料，并采用χ2 实施检验；检验后P ＜0.05 均表示数据差异显著（P＜0.05）。

二、结果

病理检查对40 头病猪均作出确诊，诊断为猪流行性腹泻，免疫荧光法的诊断准确率则高于电镜检查的准确率，且组间对比存在显著差异，其数据详情见下表1。

表1 研究诊断详细情况【n(%)】

三、讨论

猪流行性腹泻属于一种常见疾病，病发后主要以病猪的腹泻为主要症状，同时病情的传播较慢，这使得临床诊断存在一定困难；加之猪养殖过程中常见的传染性胃肠炎等疾病，均和猪流行性腹泻的症状存在类似之处，因此临床更加难以通过流行病学和临床症状等对疑似病猪实施检查，此时借助相关的实验室诊断就具有重要意义。

目前临床可应用于猪流行性腹泻的相关诊断方法较多，包括微量血清中和实验、病毒的分离鉴定、免疫电镜检查和免疫荧光诊断等方法，其中免疫电镜检查和免疫荧光诊断方法是相对较为普及的两种方法，其对于实验操作的严格性一般，且对于操作者的专业性和娴熟程度要求尚可，故而能够在临床中普遍使用。其中电镜法的操作十分简单、能够直观的获得较为准确的定性结果，但是该方法需要较为昂贵的电镜设备才可较快获得结果，否则只能在3 ～7 天才能得到准确的报告，此时受到疾病流行性的影响，其容易发生蔓延现象。而免疫荧光法的检查则能够在短时间内快速获得相关的检查结果，同时不会和猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪细小病毒、大肠杆菌等出现交叉反应，故而诊断结果准确性更高，这一点在本次研究的结果中得到了证实，即免疫荧光法检查结果的准确率为92.5%，其中电镜法和病理检查结果准确率、免疫荧光法检查准确率存在显著差异，且差异具有统计学意义（P＜0.05）。而现有实验认知下，免疫荧光法的实施需要以病猪的小肠等部位作为标本，这使得实验无法在疾病初步诊断时广泛应用，但是基于猪流行性腹泻的传染性，一旦有病猪出现死亡现象后，及时对其解剖和检查，则能够对其死因做出及时反映，并为其他病猪的治疗和干预提供指导，这对于疾病广泛蔓延的控制工作开展具有重要意义，因此可使得养殖户经济效益损失得到减小，故而值得推广应用。

综上所述，应用免疫荧光法诊断猪流行性腹泻的价值显著，能够为相关防疫工作的开展提供指导，因此具有推广应用价值，以期通过诊断和防疫降低猪流行性腹泻发生带来的经济损失。