超高效合相色谱测定电子烟油和气溶胶中游离态和质子化尼古丁含量

2020-03-12李剑政万吉纯

科技与创新 2020年4期

李剑政，郭文，万吉纯

（深圳波顿香料有限公司，广东深圳518051）

尼古丁，俗名烟碱，是烟草的主要致瘾成分，也是烟叶中最丰富的生物碱。尼古丁盐性质稳定，穿透力强，能在短时间内满足人们对尼古丁的需求。烟油中游离态和质子化尼古丁的比例对电子烟的口感和劲头影响较大。

尼古丁的测定方法有多种，但是目前报道较多的是测定总尼古丁的含量，主要有分光光度法、电位分析法和色谱法[2-4]等。目前同时测定游离态和质子化尼古丁含量的方法主要是液相色谱法，但液相色谱法处理烦琐，耗时较长。本文首次使用超高效合相色谱作为分析手段，实现同时测定游离态和质子化尼古丁的含量，具有快速、高效、绿色环保等优势。

1 实验部分

1.1 试剂与材料

尼古丁对照品（99.5%，Sigma）；甲醇（色谱级，Merck）；乙醇（色谱级，Merc）；异丙醇（色谱级，J.T.Baker）；乙腈（色谱级，Merck）；二氧化碳（99.9%，深圳文川实业有限公司）；二氯甲烷（分析纯，北京国药）；实验用水均为超纯水（电阻率18.2 MΩ·cm）；氢氧化钠（分析纯，北京国药）；电子烟油（市购）。

1.2 仪器

超高效合相色谱仪，ACQULITY UPC2配二极管阵列检测器（waters）；色谱柱，ACQULITY UPC2Viridis BEH，3 mm i.d.*100 mm length,1.7 μm dia（waters）；超声仪（深圳现代超声实业有限公司）；电子天平（梅特勒-托利多）；超纯水系统（Milli-pore 公司）。

1.3 超高效合相色谱条件

流速：2.5 mL/min；检测波长：259 nm；进样量：2 μL；色谱柱温：50 ℃；系统背压2000 pis；等度洗脱2 min：CO2（90%），辅助溶剂甲醇（10%）。

1.4 标准溶液配制

称取尼古丁对照品146.0 mg 于50 mL 容量瓶中，色谱甲醇超声溶解并定容，得到标准母液，再用移液管分别准确移取0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、0.8 mL、1 mL 至10 mL 容量瓶中，二氯甲烷定容，得到一系列不同浓度标准液。

1.5 样品前处理

1．5．1 电子烟油

准确称取不同电子烟油样品和自制尼古丁盐样品0.5 g于10 mL 容量瓶中，超纯水定容，转移至50 mL 具塞离心管中，加入10 mL 二氯甲烷，上下摇晃，静置1 min，取下层于25 mL 容量瓶中，再次加入10 mL 二氯甲烷于50 mL具塞离心管中，重复上述操作，合并下层，二氯甲烷定容，经0.22µm 微孔滤膜过滤，滤液供超高效合相色谱仪检测，待测物为游离态尼古丁。向离心管的水相中加入50 μL 饱和氢氧化钠溶液，摇匀静置2 min，用二氯甲烷萃取两次（同上述操作），合并下层，二氯甲烷定容，经0.22µm 微孔滤膜过滤，滤液供超高效合相色谱仪检测，待测物为质子化尼古丁。

1．5．2 气溶胶

将所购的电子烟和自制的尼古丁盐样品用吸烟机抽吸，用剑桥滤片捕集电子烟气，取出剑桥滤片，用100 mL 超纯水洗脱，收集洗脱液。取10 mL 洗脱液，用二氯甲烷萃取两次。