正交实验法优化中药狼毒多糖的提取

郑美玲，郝晓亮，方志刚，代淑娟

（辽宁科技大学化学工程学院，辽宁 鞍山 114051）

多糖，广泛存在于动物、植物、微生物等有机体中，人们对多糖的研究越发地深入，并已成功将提取出来的多糖用于保健食品和医药品的开发。祁小妮，马梅等人利用双水相萃取法提取藏药瑞香狼毒中的多糖[1-2]。目前利用甲醇来提取中药多糖的研究文献并不多见，本研究希望通过对狼毒多糖进行提取并对抗氧化性能进行研究，为中药多糖的提取和利用提供借鉴。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

狼毒购于市售；无水甲醇、葡萄糖、苯酚、硫酸等均为分析纯，由辽宁科技大学生物实验室提供。

1.3 狼毒多糖提取试验

1.3.1 单因素试验

提取温度分别设为 30℃、40℃、50℃、60℃、70℃，超声提取时间分别设为 20、30、40、50、60 min，料液比分别设为 1∶20、1∶30、1∶40、1∶50、1∶60，考查对多糖提取率的影响。

1.3.2 多糖含量的测定

多糖含量测定采用苯酚——硫酸法[3]，多糖提取率计算公式：

式中：C——由葡萄糖标准曲线计算得到的多糖含量；V——提取液定容体积，mL；W——样品取样质量，g。

2 实验结果讨论与分析

2.1 单因素实验结果

2.1.1 提取温度对狼毒多糖提取率的影响

如图1所显示，发现随着温度的提高，狼毒多糖提取率呈现先增大后减小的趋势，由此可知在提取温度为60℃时，多糖提取率最大。

2.1.2 提取时间对狼毒多糖提取率的影响

如图2所显示，提取率随着时间的延长而逐渐增加，在提取时间为40 min时，提取率最大[4-5]。

2.1.3 料液比对狼毒多糖提取率的影响

如图3所显示，随着料液比的增大，狼毒提取率迅速增大，当料液比为1∶50时，达到最大，此后维持平衡。

2.1.4 甲醇浓度对狼毒多糖提取率的影响

如图4所显示，当甲醇浓度有50%上升到60%时，提取率迅速增大，分析原因可能是此条件下的溶剂极性有利于提取。此后，虽然甲醇浓度进一步增加，但提取率呈下降的趋势。

2.2 正交试验结果

通过正交试验列制见表1，发现第5组实验结果最好，验证性实验也证明结果可靠真实。

表1 正交设计实验直观分析表Tab.1 Visual analysis of orthogonal design experiment

3 结论

针对狼毒多糖提取的最优工艺进行了研究。由正交试验可见，在提取温度为60℃、提取时间为40 min、料液比为1∶60、甲醇浓度为50%时，狼毒多糖提取率最大，为1.62%。有关狼毒多糖的结构及其他功能研究，还会在以后的研究中继续进行。