囊胚质量对单囊胚移植妊娠结局及子代的影响

张建瑞，管一春，申春艳，章露文，刘晓阳，周鹏飞，许小燕，王兴玲

1)郑州大学第三附属医院生殖医学中心 郑州 450052 2)郑州人民医院营养科 郑州450003

近年来有研究[1]表明囊胚移植与第3天的胚胎移植相比，其临床妊娠率更高。囊胚培养可以筛选发育潜能更好的胚胎，同时囊胚移植时囊胚与子宫内膜同步性更好[2]，所以囊胚移植可以得到更高的临床妊娠率和着床率[3]。目前认为囊胚的发育速度和囊胚质量是影响临床妊娠率的重要因素，一般认为囊胚的发育速度越快，囊胚级别越高，临床妊娠率和种植率越高。但是目前大部分对于囊胚移植的研究[4]仅仅关注于临床妊娠率及种植率，而缺乏对新生儿出生结局的关注。已有学者[5]呼吁关注囊胚移植对新生儿健康的影响。本研究回顾性分析了不同质量单囊胚新鲜周期移植和冻融周期移植妊娠结局和子代情况，以期为临床应用提供参考。

1 对象与方法

1.1研究对象选取2015年1月至2018年3月在郑州大学第三附属医院生殖医学中心接受IVF-ET/FET治疗的患者作为研究对象。纳入标准：①年龄≤40岁。②新鲜周期第5天移植囊胚1枚。③FET周期移植囊胚1枚。排除标准：①胚胎植入前遗传学诊断/筛查周期。②子宫畸形和输卵管积水。③多胎妊娠。④妊娠信息不完整。新鲜周期移植和冻融周期移植均按照囊胚质量分为优质囊胚组和非优质囊胚组。

1.2控制性超排卵方案依据患者个体情况采用短方案、长方案或超长方案，垂体降调节采用促性腺激素释放激素激动剂；根据患者年龄、体质指数及基础性激素水平等决定FSH启动剂量。4个以上卵泡直径≥18 mm时，肌内注射250 μg艾泽(默克雪兰诺有限公司)。37 h后静脉全麻下行取卵术。

1.3囊胚培养及评级取卵后3～6 h根据患者适应证进行IVF 或 ICSI。所有胚胎培养均采用序贯培养。培养液盖油后置于37 ℃、体积分数6%CO2、5%O2和89%N2的CO2培养箱中。受精后第1天观察受精情况；第2～3天观察胚胎的细胞数及碎片，依据2011年伊斯坦布尔共识对胚胎进行分级，冷冻2枚Ⅲ级以上胚胎后剩余胚胎行囊胚培养；第5～6天根据Garnder囊胚分级法对形成的囊胚进行评级。可利用囊胚：3期及3期以上、内细胞团评分≥B。优质囊胚：3期及3期以上、内细胞团和滋养层评分均≥B。

1.4新鲜囊胚移植取卵术后第5天，根据患者情况，移植1枚囊胚，剩余优质及非优质囊胚均行玻璃化冷冻。所有移植囊胚未行激光辅助孵化。

1.5冻融囊胚移植囊胚玻璃化冷冻及解冻试剂、开放式冷冻载体均购自日本Kitazato公司，囊胚的冷冻及解冻按说明书进行操作，囊胚冷冻前均激光皱缩。冻融囊胚移植及内膜准备按文献[6]方法进行。

1.6妊娠及新生儿情况判定临床妊娠、流产及异位妊娠参考文献[7]定义，早产指妊娠≥28周且<37周间分娩。新生儿低体重指出生体重<2 500 g。

1.7统计学处理采用SPSS 17.0进行统计学分析。2组年龄、不孕时间、体质指数、内膜厚度、胎龄、出生身长、出生体重、Apgar评分的比较采用两独立样本的t检验, 2组临床妊娠率、异位妊娠率、流产率、早产率、剖宫产率、低体重率、男婴比例、出生缺陷率的比较采用χ2检验。检验水准α=0.05。

2 结果

2.1不同质量囊胚新鲜周期移植基本情况及妊娠结局比较新鲜囊胚移植948例，其中移植优质囊胚613例,移植非优质囊胚335例。优质囊胚组临床妊娠率高于非优质囊胚组，见表1。

表1 不同质量囊胚新鲜周期移植基本情况及妊娠结局比较

2.2不同质量囊胚新鲜周期移植后子代情况比较优质囊胚组和非优质囊胚组分别分娩新生儿354和143名。两组胎龄、早产率、剖宫产率、出生身长、出生体重、低体重率、Apgar评分、男婴比例及出生缺陷率比较，差异均无统计学意义，见表2。

表2 不同质量囊胚新鲜周期移植后子代情况比较

2.3不同质量囊胚冻融周期移植基本情况及妊娠结局比较冻融囊胚移植1 549例，其中移植优质单囊胚710例，移植非优质单囊胚839例。优质囊胚组临床妊娠率高于非优质囊胚组，流产率低于非优质囊胚组，见表3。

表3 不同质量囊胚冻融周期移植基本情况及妊娠结局比较

2.4不同质量囊胚冻融周期移植后子代情况比较优质囊胚组和非优质囊胚组分别分娩新生儿330和290名。两组胎龄、早产率、剖宫产率、出生身长、出生体重、低体重比率、Apgar评分、男婴比例及出生缺陷率比较，差异均无统计学意义，见表4。

表4 不同质量囊胚冻融周期移植后子代情况比较

3 讨论

囊胚是人类胚胎发育的一个重要阶段。囊胚移植可以提高辅助生殖技术的临床妊娠率，降低异位妊娠率。目前认为囊胚发育速度是评估囊胚发育潜能的重要指标。先前研究[8-9]报道新鲜周期移植第5天囊胚较第6天囊胚具有更高的种植率，这些研究认为囊胚发育速度慢、囊胚染色体异常及子宫内膜同步性差导致了种植率降低。为了排除囊胚发育速度与子宫内膜同步性的问题，本研究中新鲜囊胚移植均为第5天单囊胚。如果第5天没有囊胚形成，取消新鲜囊胚移植，冷冻第6天囊胚后行冻融周期移植。多胎妊娠可增加不良妊娠风险，为了更准确反映囊胚质量对子代的影响，本研究排除了双囊胚移植患者和单囊胚移植后单卵双胎患者。

本研究中新鲜周期移植优质囊胚组临床妊娠率(66.23%)高于非优质囊胚组(49.85%)；冻融周期移植优质囊胚组及非优质囊胚组临床妊娠率分别为56.62%和45.77%，两组比较差异有统计学意义，这与以往的研究[10-11]结果是一致的。研究[12-14]发现染色体整倍体率与囊胚质量有关，低质量囊胚的染色体非整倍体率高于优质囊胚。

新鲜周期移植优质囊胚组和非优质囊胚组分别分娩新生儿354和143名。冻融周期移植优质囊胚组和非优质囊胚组分别分娩新生儿330和290名。两组胎龄、早产率、剖宫产率、出生身长、出生体重、低体重率、Apgar评分、男婴比例及出生缺陷率比较，差异均无统计学意义，这与以往研究[15]结果一致。虽然非优质囊胚的临床妊娠率较低，但是妊娠后不良产科和围产期结局并没有增加。

综上所述，囊胚质量与临床妊娠率密切相关，优质囊胚的临床妊娠率明显高于非优质囊胚。但是不同质量囊胚的出生结局及新生儿状况无差异。对于囊胚评级为非优质的囊胚也能得到可观的临床妊娠率，其也不应该被放弃。