2011—2018年山东省规模化猪场伪狂犬病血清流行病学调查

宁慧波，王 鹏，刘 伟，李 聪

[1.中国农业大学动物医学院，北京 海淀 100193；2.海博莱生物科技咨询（北京）有限公司，海淀 100086]

猪伪狂犬病（Porcine pseudorabies,PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的一种影响现代养猪生产的重要的病毒性传染病，对全球养猪业的危害已经超过100年，造成巨大的经济损失[1]。我国早在20世纪50年代就有该病流行的报道[2]；到了80年代，该病在18个省市自治区被相继报道[3]，并造成严重的临床损失。由于Bartha-K61株疫苗的使用，以及gE-ELISA的广泛应用，PR在我国得到较好的防控。2011年，该病自北向南呈暴发状态，引发母猪流产及仔猪高死亡率，虽然近几年该病临床上趋于缓和，但PRV野毒感染猪场依然很多，这增加了猪病防控的复杂性，严重影响了我国养猪业的健康发展[4]。

为了掌握现有防控体系下山东省规模化猪场PRV感染状况，进而更有效地防控和净化PR，笔者对山东省430个规模化猪场不同猪群的35 505份血清样品进行PRV gE抗体检测，并对PRV野毒感染情况进行系统分析。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样品 样品采集时间为2011年1月至2018年12月，采集区域为山东省，采样猪场基础母猪存栏数＞200头，共430个猪场，35 505份血清（表1）。所有采样猪场均使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗。

表1 2011—2018年规模化猪场采样数量

1.1.2 试剂盒 选用西班牙HIPRA公司PRV gE抗体检测试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 血清采集 采用横断面采样方法，分别采集公猪、后备母猪、不同胎次经产母猪及不同生长阶段的仔猪（＞10周龄）的血液。

1.2.2 PRV gE抗体检测 采用阻断酶联免疫吸附试验（ELISA）法，操作方法及结果判定按照操作试剂盒说明书进行。检测的血清样品全部采自免疫gE基因缺失疫苗的猪场，故检测到gE抗体阳性样品可以初步判断该猪场被PRV野毒感染。在进行猪场及样品结果判定和统计时，只要猪场有1个样品为gE抗体阳性，则该场判定为PRV野毒阳性场。

2 结果与分析

2.1 2011—2018年山东省规模化猪场PRV gE抗体检测结果

从全省范围分析看，2011—2018年，猪场阳性率呈快速上升后缓慢下降趋势，2011年阳性率最低，为21.05%；2015年阳性率最高，为94.37%，且2013年后，阳性率一直维持在81.82%以上（图1）。样品阳性率整体呈快速上升后快速下降趋势，2011年阳性率最低，为1.48%；2015年阳性率最高，为59.21%。结果表明，PR在山东省依然较为严重，需进行长期系统性的防控。

2.2 2011—2018年山东省规模化猪场种猪PRV gE抗体检测结果

2011—2018年，种猪阳性率呈快速上升后快速下降趋势，2011年阳性率最低，仅为1.79%；2015年阳性率最高，为71.97%，且2012年后，阳性率一直维持在34.99%以上（图2）。阳性猪场种猪阳性率变化趋势与种猪阳性变化趋势基本一致，整体呈快速上升后快速下降趋势，2011年阳性率最低，仅为7.20%；2015年阳性率最高，为75.34%。结果表明，2011年以后，山东省种猪群大比例感染PR；感染PR的猪场，种猪阳性比例更高，2012年以后，约50%以上的种猪呈PR感染状态。

2.3 2011—2018年山东省规模化猪场仔猪PRV gE抗体检测结果

如同种猪阳性率变化趋势，2011—2018年，仔猪阳性率整体呈快速上升后下降趋势，2011年阳性率最低，仅为0.93%；2015年阳性率最高，为40.54%（图3）。阳性猪场仔猪阳性率变化趋势与仔猪阳性变化趋势基本一致，整体呈快速上升后下降趋势，2011年阳性率最低，仅为4.42%；2014年阳性率最高，为42.46%。结果表明，2011年后，山东省仔猪群大比例感染PR；感染PR的猪场，仔猪阳性比例更高，2012年以后，约40.47%以上的仔猪呈PR感染状态。2016与2018年仔猪阳性率偏低可能与仔猪采样数量少有一定关系。

3 讨论

3.1 猪伪狂犬病在山东省猪群中依然广泛流行

近年来，我国研究学者对不同地区的猪场PRV野毒感染情况进行了大量的血清学检测。李聪2009—2011年调查显示，PRV感染猪场比例分别为59.3%、48.2%、40.6%，样品阳性率分别为12.7%、10.4%、13.8%[5]。中国农业大学杨汉春教授调查显示，2014—2017年gE抗体阳性猪场分别80.08%、76.08%、75.28%、78.33%[6]。华中农业大学动物疫病中心对2011—2016年送检样品检测结果显示：gE抗体阳性率2011为7.70%，2016年上升至39.92%。总的来看，2011年之前，猪场及样品阳性率比较低；但是2011年之后，PRV阳性猪场高达80%以上，近50%的样品为阳性。这些数据表明，近几年我国伪狂犬病的防控压力逐步增大，需引起高度重视。

本研究对山东省的430个规模化猪场进行调查，共35 505份血清样品。调查结果显示：2011—2018年，猪场阳性率从21.05%上升到81.82%，2015年最高为94.37%；样品阳性率从1.48%上升到28.49%，2015年最高为59.21%。尽管2016—2018年，猪场及样品阳性率呈现下降趋势，但2018年的阳性率依然远高于2011年，整体变化趋势与国内PR的感染趋势基本一致。说明，猪伪狂犬病在山东省依然广泛流行，需引起高度重视。

3.2 种猪群是伪狂犬病防控的重点

检测结果显示，2011年种猪阳性率仅为1.79%，而后迅速上升，呈现高比例的感染。尽管2011年之后，猪场对于PR的防控越来越重视，加大了种猪的免疫频率，但由于PRV具有潜伏感染特性，种猪的阳性率依然呈现上升趋势。处于潜伏感染的种猪受到外界的不利因素刺激后，潜伏感染的PRV可以被活化，进而造成PRV通过轴突返回到宿主的外周组织，从而造成种猪发病及通过口腔、鼻腔、生殖道及精液等途径来排毒。这些不利因素包括应激、分娩、混合感染、免疫力下降、免疫抑制类药物（如地塞米松、乙酰胆碱）的使用[7-8]。所以潜伏感染PRV的种猪是潜在的传染源，这给PR的防控带来了很大的困难。因此对于生产性能不佳的母猪及公猪，应加快其淘汰速度。

3.3 肥育猪群的伪狂犬病防控不容忽视

母源抗体对初生仔猪被动获取保护以抵抗PRV的感染具有十分重要的作用，但是对于仔猪后期的主动免疫却存在抑制作用[9]。抗体水平越高，对仔猪免疫的干扰越大。野毒感染的母猪，抗体高于阴性母猪免疫能达到的水平，对仔猪免疫的干扰最大。推迟仔猪首次肌注的时间及加强免疫有利于抗体的上升。Oirschot报道，对于有母源抗体的仔猪在4周或10周龄肌注免疫1次活苗均不能快速提高抗体水平，而在间隔4或6周后加强免疫1次后，抗体水平会迅速提升[10]；同时研究对于有母源抗体的仔猪，在10周龄时肌注1次活苗5周后并不能提供有效保护，而肌注2次活苗8周后可以提供有效临床保护[11]。

调查结果显示，2011年仔猪阳性率仅为0.93%，而后迅速上升，呈现高比例的感染。尽管2011年之后，猪场对于PR的防控越来越重视，加大了种猪及仔猪的免疫频率，但仔猪的阳性率依然呈现上升趋势。由于PR的母源抗体可以持续到12～14周，所以仔猪的阳性率可能与未消退的母源抗有一定关系，但是阳性率的攀升说明仔猪后期感染压力逐渐增大。这可能与免疫程序不合理有一定的关系，仔猪除了进行喷鼻免疫外，应在9～10周龄及13～14周龄分别进行两次免疫，以降低中大猪感染PRV的几率。

3.4 猪伪狂犬病的防控任重道远

近年来，西班牙、德国、法国、意大利、奥地利、匈牙利、波兰、芬兰、荷兰、瑞典、瑞士、丹麦、英国等欧洲国家，以及美国、加拿大、新西兰等国家也已经在生猪群净化了PR，仅在野猪体内能检测到PRV的存在，并且已经禁止对家猪进行PRV疫苗免疫[12-17]。在亚洲，日本已经净化了PR，但PR在多数国家和地区呈地方性流行，一些国家实施伪狂犬病疫苗免疫（越南、韩国、泰国、菲律宾、柬埔寨）[18]，猪群中PR野毒的阳性率在10%～20%。

目前山东省规模化猪场普遍存在PRV的感染，种猪群及肥猪群感染较为严重，应引起重视。由于山东省猪场数量多、规模大、养殖水平参差不齐，导致影响山东省PR流行的风险因素众多，除了加强猪群的疫苗免疫，还应重视猪群的种猪引入、种猪管理与淘汰，车辆、设备与人员的清洗消毒，切实做好生物安全，从而对伪狂犬病进行系统性的防控与净化。