γ突触核蛋白表达与胃癌临床病理特征相关性的Meta分析

徐丹 李晶 肖驰 王儒涵 费晶 巩平

(石河子大学医学院第一附属医院肿瘤内科，新疆 石河子 832000)

胃癌(GC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一，在所有肿瘤中死亡率占第五位〔1〕，随着科学技术的发展，国内外有关GC的最新治疗方案逐渐增多，但复发和转移仍是影响患者预后的重要因素，也是导致GC患者高死亡率的主要原因〔2〕。因此，研究GC侵袭和转移的分子机制，将有助于寻求GC诊断和治疗的有效靶点。γ突触核蛋白(SNCG)，也称为乳腺癌特异性基因(BCSG)1，与α-突触核蛋白和β-突触核蛋白一样，它属于突触核蛋白基因家族〔3〕。SNCG蛋白含有127个氨基酸，是一种天然的未折叠蛋白。研究显示，SNCG在许多肿瘤组织中过表达，并与其临床病理特征密切相关〔4,5〕。但不同文献对于SNCG表达对胃肿瘤浸润深度、淋巴结转移等的影响研究结论尚不一致，每篇文献研究病例数相对较少，且SNCG表达与GC临床病理特征的Meta分析目前尚无相关报道。本研究Meta分析综合评价SNCG表达与GC临床病理特征的相关性。

1 资料与方法

1.1文献检索 以PubMed、EmBase、Web of science、Cochrane Library、CNKI、VIP、万方和CBM作为检索的主要来源，以γ突触核蛋白、胃肿瘤等为中文检索词，以gamma-Synuclein、Stomach Neoplasms等为英文检索词进行检索，检索时限为建库至2019年1月1日。以PubMed检索为例，详细的检索策略如下：#1 Search “Stomach Neoplasms”〔Mesh〕，#2 Search(((((((((((((((((Neoplasm,Stomach〔Title/Abstract〕)OR Stomach Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasms,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasms〔Title/Abstract〕) OR Gastric Neoplasm〔Title/Abstract〕)OR Neoplasm,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Neoplasms,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancer of Stomach〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancers〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Gastric〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancers〔Title/Abstract〕) OR Stomach Cancer〔Title/Abstract〕) OR Cancer,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancers,Stomach〔Title/Abstract〕) OR Cancer of the Stomach〔Title/Abstract〕) OR Gastric Cancer,Familial Diffuse〔Title/Abstract〕，#3 #1 OR #2，#4 Search “gamma-Synuclein”〔Mesh〕，#5 Search((gamma Synuclein〔Title/Abstract〕) OR Persyn〔Title/Abstract〕) OR Synoretin〔Title/Abstract〕，#6 #4 OR #5，#7 #3 AND #6。

1.2纳入与排除标准 纳入标准：1)国内外公开发表的论著和学位论文，提供包含SNCG与GC临床病理特征相关性的原始数据；2)所有的病例取材前均未经化疗、放疗及其他可能对SNCG表达有影响的治疗，实验组均为通过病理学或细胞学检查明确诊断为GC的患者，对照组均为癌旁正常组织或正常组织。3)各文献所用的实验方法均为免疫组化法；4)观察性研究(病例对照或队列研究)；5)统计方法应用恰当，数据质量可靠，有或可计算出OR值及95%CI。排除标准：1)综述，评论，会议摘要类文章；2)评价指标的界定系数不符合本文标准；3)重复报告或者资料雷同；4)采用免疫组化法以外的方法进行检测的文章；5)非人类实验。

1.3原始文献筛选和资料提取 筛选文献由2名研究者按照纳入排除标准独立完成资料提取并交叉核对，如遇意见不合时，则通过讨论或参考第3位研究者的意见。数据提取主要包括作者研究者姓名、发表时间、病例组和对照组的数量、表达阳性数量等。如果是同一作者或单位的报道，则仅保留病例数最大、最全的文献。

1.4文献质量评价 对纳入研究的方法学质量进行纽卡斯尔-渥太华量表(NOS)量表评分，评价内容主要包括3个方面：选择、可比性和暴露。每个研究的评价得分为0～9分，由2位评价员按照上述标准独立进行，遇意见不合者，则经过讨论解决或参考第三者意见。

1.5统计学方法 使用Review Manager 5.3进行Meta分析，对于SNCG的表达及与GC临床病理特征的相关性，计算OR值及95%CI作为分析统计量，采用χ2检验对资料进行异质性检验，如P≥0.05，I2≤50%，则各研究间统计学异质性较小，可采用固定效应模型；若P<0.05，I2>50%，则认为研究间存在异质性，则选用随机效应模型，并采用逐一排除研究的方法进行敏感性分析。此外，当Meta分析纳入文献≥10个时使用漏斗图来判断是否存在发表偏倚〔6〕。

2 结 果

2.1文献筛选过程 根据关键词初步检索出文献104篇，根据文献题目与摘要剔除重复文献35篇，进而剔除非人类实验、综述类、会议类及不相关的文题及摘要共计53篇，余下文献通过阅读全文后排除内容重复、检测方法为非免疫组化法的文献11篇，最终根据纳入和排除标准选取出符合要求的5篇文献〔7～11〕。根据《PRISMA声明》文献筛选流程图如图1。

图1 荟萃分析中选择研究的流程

2.2纳入研究的基本特征 标准与排除标准纳入5篇研究文献。纳入文献中4个研究〔8～11〕分析SNCG在GC和正常胃黏膜组中的表达相关关系，共395例肿瘤组织，185例正常胃黏膜组。见表1。

表1 荟萃分析中包含的研究特征

2.3Meta分析结果

2.3.1SNCG表达在GC和正常胃黏膜组中的表达水平分析 4个文献〔8～11〕纳入资料中GC组SNCG阳性表达256例，正常胃黏膜组SNCG阳性表达31例。对入选研究的结果进行异质性检验，差异有统计学意义(χ2=12.52，df=3，P=0.006)；I2=76%，研究间异质性较大。采用随机效应模型合并数据。结果显示，两组间差异有统计学意义(OR=18.47，95%CI：4.20～81.12，P=0.000 1)，表明SNCG在GC中高表达，见图2。

图2 SNCG表达在GC和正常胃黏膜组中的表达阳性率比较

2.3.2SNCG表达与GC年龄的相关性分析 按照60岁年龄分组标准纳入2个研究〔7，11〕。其中年龄组<60岁156例，≥60岁162例，研究间无统计学异质性(P=0.85，I2=0%)，故采用固定效应模型合并数据，结果显示，两组间SNCG表达比较差异无统计学意义(OR=0.77，95%CI：0.48～1.24，P=0.28)。见图3。

图3 SNCG表达与GC患者年龄的相关性

2.3.3SNCG表达与GC患者浸润深度的相关性 根据国际肿瘤TNM分期为标准：GC以肿瘤侵犯至固有肌层及以内即T1和T2作为浅浸润组；肿瘤穿透浆膜下结缔组织及以外即T3和T4作为深浸润组。共有4篇文献〔7～9，11〕纳入本项Meta分析，其中浅层浸润组(T1+T2)133例，深层浸润组(T3+T4)332例，研究间异质性检验，无统计学异质性(χ2=5.8，P=0.12，I2=48%)，故采用固定效应模型进行Meta分析，SNCG表达差异有统计学意义(OR=0.25，95%CI为0.16～0.40，P<0.000 01)。见图4。

2.3.4SNCG表达与GC患者分化程度的相关性 共有4篇文献〔7～9，11〕纳入本项Meta分析。其中高中分化有212例，低分化、印戒及黏液细胞癌有253例，异质性分析显示，无统计学异质性(χ2=5.94，P=0.11，I2=49)，故采用固定效应模型进行分析。结果显示，两组SNCG表达差异无统计学意义(OR=0.79，95%CI为0.53～1.18，P=0.25)，故SNCG表达与GC的分化程度无相关性。见图5。

2.3.5SNCG表达与GC患者有无淋巴结转移的相关性分析 共有5篇文献〔7～11〕纳入本项Meta分析。其中无淋巴结转移的有173例，有淋巴结转移的有312例，GC内部存在统计学异质性(χ2=11.94，P=0.008，I2=75%)，故采用随机效应模型进行Meta分析。结果显示，两组SNCG表达差异有统计学意义(OR=0.19，95%CI为0.07～0.51，P=0.000 9)，故SNCG表达与GC患者有无淋巴结转移相关。见图6。

2.3.6SNCG表达与GC患者临床分期的相关性研究 共有2篇文献〔7，9〕纳入本项Meta分析。其中临床Ⅰ～Ⅱ期有49例，临床Ⅲ～Ⅳ 期有101例，内部无统计学异质性(χ2=0.00，P=0.99，I2=0%)，故采用固定效应模型进行Meta分析，GC两组SNCG表达差异有统计学意义(OR=0.03，95%CI为0.01～0.08，P<0.000 01)。见图7。

图4 SNCG表达与GC患者浸润深度的相关性

图5 SNCG表达与GC患者分化程度的相关性

图6 SNCG表达与GC患者有无淋巴结转移的相关性

图7 SNCG表达与GC患者临床分期的相关性

2.4纳入研究的偏倚评估及敏感性分析 所有纳入文献采用逐一排除的方法进行敏感性分析，任一纳入的研究被排除后在相应的效应模型中数据统计分析结果与原来的相同，OR值相似，说明纳入文献稳定性较好。

3 讨 论

SNCG主要分布于神经系统。SNCG最早发现于人乳腺癌cDNA文库，已在乳腺癌中证实其具有促进乳腺癌浸润和转移的作用〔12〕。近来在胆管癌、卵巢癌和结直肠癌等恶性肿瘤中也发现SNCG的异常高表达，在晚期肿瘤中表达尤其升高，提示其在肿瘤的发生发展过程中丧失了原先的组织特异性，有望成为一个有效的肿瘤标志物。因此，高表达的SNCG是一种潜在的癌基因，是引发肿瘤的重要原因之一。目前国内外资料均显示，过表达的SNCG不仅参与肿瘤的发生发展，还与肿瘤的侵袭、转移和预后密切相关〔7～14〕。本研究提示SNCG过表达对GC淋巴结转移有促进作用。Hibi等〔15〕通过体内研究表明，SNCG与胰腺癌患者的神经周围侵袭及其他主要侵袭参数(包括肿瘤大小、血管侵犯、淋巴结转移和UICC分期)显著相关，此外，使用人胰腺癌细胞系进行神经侵袭和原位移植的小鼠模型中的SNCG基因沉默与神经侵袭及肝和淋巴结转移(胰腺癌细胞的主要归巢器官)的显著减少相关，与本研究结果一致。而2008年董勇〔16〕在乳腺癌的研究提示，雌激素受体(ER)及SNCG状况与新辅助化疗疗效相关，通过多因素Logistic回归进一步阐明SNCG与乳腺癌新辅助化疗敏感性之间有着显著联系。所以，以SNCG为靶点的靶向治疗可能在胃肿瘤综合治疗中取得一定突破。

除了Stata、SPSS等Meta分析常用软件外，Revman5.3软件作为Cochrane系统评价的标准化软件，特点包括操作简单，可对录入的计数资料、计量资料等不同类型数据进行Meta分析，并以森林图的形式展示〔17〕。关于SNCG表达与GC临床病理关系的这5篇文献采用Revman5.3软件，各文献代表性良好。本研究的局限性在于虽然纳入研究的方法为免疫组化法，但是该方法涉及的抗体来源、生产厂家、稀释浓度及评定标准并非完全一致，也有可能影响Meta分析的结果，因此需要高质量的证据来完善该结果。

综上，本研究结果显示，过表达的SNCG与GC的浸润深度，临床分期，淋巴结转移相关，此结果将可能为GC的早期诊断、预后评估及分子靶向治疗奠定基础。