鸡新城疫抗体检测技术在诊断中的应用

2020-02-14韦成威刘正超

今日畜牧兽医 2020年7期

韦成威，刘正超

（1.河池市农业农村局 547000；2.河池市金城江区农业农村局 547000）

鸡新城疫俗称鸡瘟，该疾病在一年四季均有可能发生，气候寒冷以及多变的季节更容易出现。由于该疾病传染性强，同时死亡率高，所以当前很多养殖人员也十分重视该疾病的防疫，同时当前也是十分重视动物疫病的检测工作，应用各项抗体检测技术，去做好疾病的诊断和治疗。

1 临床症状

鸡新城疫一旦发病，呈现群发的状态，各个年龄阶段的鸡，都有可能感染此疾病。且主要的临床症状有：呼吸困难、体温升高，腹泻且会排出黄白色、黄绿色以及绿色的粪便。还有一部分表现为神经性症状，双腿麻痹，站立困难等。嗉囔内常充满液体及气体，口中还有酸臭液体。黏膜和浆膜有出血症状，发病率和死亡率在90%以上。该疾病的潜伏期在2～15d，鸡在感染之后，会咳嗽气喘，头颈伸直，食欲锐减且日渐消瘦。

2 剖检变化

通过剖检能够发现患病鸡的喉部、气管出血，气管中也有少量的黏液，在小肠的前部分、小肠近盲肠的部分还有十二指肠的位置有点状和斑块状的出血，严重的病例还有溃疡存在。脾脏肿大且有白色的坏死点，肝脏、肺脏、肾脏基本上正常，没有明显的变化。同时也能够见到其身体的各处黏膜和浆膜出血，盲肠、扁桃体出血、肿胀，心冠脂肪、外心膜点状出血[1]。

3 鸡新城疫的实验室诊断

3.1 细菌涂片和分离培养

对鸡新城疫做好确诊，除了结合具体的临床特征之外，还需要结合实验室诊断进行确诊。我们可以取病死鸡的脾脏、肝脏或是脑部组织制作接触片，之后用美兰染色以及革兰氏染色法进行镜检，观察有无细菌。或是取上述组织分别接种普通琼脂平板、SS 琼脂平板、血清琼脂平板，置于37℃的环境中进行培养，24h 之后观察是否有细菌生长。

3.2 病毒分离

首先，进行病毒分离工作，在无菌的状态下，取刚刚死亡的鸡脾脏、脑部等组织，将其剪碎、研磨之后冻融两次，之后用无菌生理盐水进行稀释，4000r/min 离心15min，取上清液，放置4℃冰箱作用4～12h，以作备用。

其次，进行鸡胚接种，将双抗处理的病料上清液通过尿囊腔接种30 枚11 日龄的SPF 鸡胚，剂量为0.2mL，之后用石蜡封孔，继续孵化，去除24h 之内死亡的鸡胚，之后每3h 照蛋一次，同时将死亡鸡胚放置在冰箱中冷藏备用。

再次，做病毒鉴定。首先先做病毒血凝实验，取鸡胚接种分离的尿囊液作血凝实验，用微量法在血凝版上做倍比稀释，之后设置生理盐水对照孔，之后向孔内加1%的鸡红细胞，摇均，之后进行观察。若是生理盐水对照孔中的红细胞成为明显的纽扣状沉到孔底的时候判断结果，若病毒存在凝集性，那么说明病死鸡的病原体也具有血凝性。

3.3 抗体检测

抗体检测需要对鸡进行ND 抗体检测，检测是否存在抗体异常升高的情况，之后结合临床表现以及剖检变化等，检测是否感染病毒。

4 急救措施

一旦在养殖区域中发现鸡新城疫患病病例，需要及时隔离和淘汰患病鸡，同时对养殖环境进行消毒和清洁。对于病死鸡，要做好无害化处理，避免造成二次感染。对于没有出现感染的病例，需要做好紧急接种，依据实际情况，选择免疫方式。避免应激反应对鸡生长的影响。患病鸡不能急性接种，但是可以进行抗血清治疗，避免继发感染。或是在饲料和水中加入适量的抗菌类药物[2]。

5 应用

要在养殖区域中开展ND 抗体检测，不断提高免疫接种的质量，避免漏针情况的出现。具体的免疫程度有：在鸡7～10 日龄中，可以进行首次免疫，用NDII 系或IV 系滴鼻点眼。在20～25日龄之后，用II 系或IV 系疫苗进行第二次滴鼻点眼，配合0.3mL ND 油乳剂灭活苗，可以进行皮下注射或是肌肉注射。在60 日龄的时候，需要进行1 次弱毒或是联苗注射，120 日龄注射油苗或联苗注射。

要依据雏鸡实际的生长状况来确定首次免疫的日龄，在做好首次免疫的时候，需要做定期抽检，选择合适的时机，适时进行强化免疫。在做好首次免疫、二次免疫之后，需要对免疫的有效期进行评定，鸡的HI 抗体均值在2log2 以上，比同日龄鸡高，则可以认定为免疫成功。