浅析食品卫生微生物检验中培养基的质量控制

2020-01-15李冬玲靖边县食品检验检测中心陕西榆林718500

中国食品工业 2020年21期

李冬玲靖边县食品检验检测中心陕西榆林 718500

1 培养基概述

培养基指的是将给予微生物、植物或动物生长繁殖的不同营养物质组合配制而成的营养基质。培养基有多种形式和形态，一般含有无机盐、维生素、水、含碳水化合物、含氮物质等几类。因为配制培养基的原料不同，所使用要求和贮存保管方面也有所差异。通常情况下，如果培养基受热受潮，容易发生分解变质或细菌污染，所以在贮存培养基时必须要做好防潮、防热工作。另外，一些培养基需要进行严格的灭菌操作，如组织培养基，其贮存时间较长，所以需要控制其贮存温度在3-6℃之间。由于液体培养基长期保管难度较大，建议改制成粉末进行贮存[1]。

2 培养基质量控制的要点

培养基的形态多样，但是无论哪种类型的培养基，在使用时都需要保证其质量和性能，并且要保证配制准确和使用方法正确，如果不能合理进行培养基的贮存，会对检验结果造成影响。为此，在食品卫生检验过程中，对于培养基的质量控制，具体应从以下几个环节着手。

2.1 采购环节

虽然在微生物检验过程中需要进行培养基的配制，但是实际上培养基多为商业化合成培养，因为购买商业化合成培养基要比手工配制效率高，在质量方面也有一定的保证，另外商业化合成培养基不容易被污染，实验误差比较小。但是仍然需要考虑商业化合成培养基在生产过程中存在的偏差，所以实验室应购买经过质量管理体系认证的培养基，建议选择国内外知名的产品且市场评价效果较好的培养基。

2.2 配制环节

虽然在实验室实际使用过程中，多采用购买的商业化合成培养基，但也不可忽视培养基配制环节的质量控制，因为确保微生物检验成功的一个重要前提便是培养基能够正确配制。在这一环节工作中，需要考虑这几个方面的问题：

首先，在培养基的配制过程中，必须要严格按照其说明书或处方进行，同时也要详细记录整个配制过程，主要包括配制的时间、配制人基本信息、培养基的名称、培养基的批号、配制量、PH、灭菌条件以及各成分的生产厂商等，目的是一旦发现培养基存在问题能够追溯根源。

其次，配制时要重点关注培养基的溶解、称重及分装，对于培养基的溶解，应确保在溶解前与适量的水混合，避免粘底的情况发生，然后进行加热溶解，在整个溶解过程需要连续搅拌以便培养基更好地分散。如果培养基中含有琼脂，在加热溶解之前需要浸泡一会。对于培养基的称重，应选择干燥的环境下进行，避免培养基受潮，称量时应选用专门的药匙进行，避免发生交叉污染。称量的天平也要选择对应感量的，并根据配方进行操作，确保准确的称取量。配制好的培养基应装在比培养基体积大5倍的容器内，且容器建议为玻璃材质。

最后，水作为培养基配制过程中必不可少的原料，应保证其PH在5.5-7.5之间，呈偏酸性，在温度25℃时电导率要小于25us.cm-1，除了特殊要求以外。同时还需要定期进行水的菌落总数测定，不能大于103CFU·mL-1。通常实验用水为蒸馏水或三级水，经过冷凝操作或蒸馏的水便是蒸馏水，由于蒸馏水是通过热馏分离获取，所以一般不会引入其他杂质[2]。

2.3 验收环节

验收环节主要是在培养基采购后必要进行的质量验收，采购人员首先需要对培养基进行初步验收，验收的内容为培养基的名称、生产批号、有效期、产品包装等，然后做好培养基数量和接收日期的记录工作。在完成初步验收后，根据《食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》，在使用培养基前应进行指标检测，主要是培养基微生物性能指标和理化指标，需要向生产厂商索要培养基的质检报告，因为在质检报告中含有微生物性能测试指标及理化指标。

微生物性能指标指的是选择性、特异性和生长率，生长率是检测目标菌生长能力的重要指标，要确保培养基的目标菌生长率低于标准规定的最低阈值；培养基的特异性是测定其指示能力的依据；而培养基的非目标菌抑制能力则需要其选择性来指示，此数值也要符合标准规定的限值要求。培养基的理化指标只要包括PH值、颜色、凝胶稳定性，所以需要生产厂商在培养基的原材料、生产工艺及流程环节进行严格质量把控。实验人员则是在使用前对这些理化指标进行详细的检查，确保与生产厂商提供的质检报告一致，从而满足实验要求。

2.4 灭菌操作环节

培养基的灭菌操作也是保证培养基质量的关键环节，这一环节主要采用干热灭菌和湿热灭菌两种方式进行。干热灭菌是将培养基包装好置于温度160-170℃的电烘箱中加热，加热时间在1-2小时，以此实现微生物灭杀；湿热灭菌则是通过沸水、饱和水蒸气等方式进行灭菌，其介质为高温高压水蒸气，温度在121℃左右，时间是15-20分钟。对比两种灭菌方法，湿热灭菌的穿透力相对较大，所以常用湿热灭菌。需要注意的是，在灭菌过程中，既要保证灭菌效果，又要保证培养基的有效成分不被破坏。

2.5 贮存环节

培养基应在保存期内使用。如果是干粉培养基，在贮存时要置于阴凉干燥处，避免出现污染、氧化或受潮的情况。如果培养基出现凝结的情况，不可继续使用。在贮存培养基时，也要确保其营养成分和选择性，灭菌操作后也要及时冷却至所需的温度，不能长时间贮存在灭菌锅中。对于24小时内未使用完的琼脂平板，应在冰箱中避光密封贮存，温度是2-8℃，并做好详细记录，包括配制时间、配制人等，最长贮存时间是2-4周，以此确保培养基成分不发生改变。