Foxa2与老年胃息肉恶性进展的相关性

陈微微 代敏涛 吴旭 聂军

(遵义医科大学第三附属医院(遵义市第一人民医院)消化内科，贵州 遵义 563000)

胃息肉常好发于胃窦部及胃体，是生长在胃黏膜表面并向胃腔凸起的组织，常表现为局部胃黏膜结节样、颗粒样凸起，表面光滑、界限清楚，直径常<2 cm，胃息肉的临床表现缺乏特异性，单纯的胃部息肉常无明显的临床表现，当机体合并其他消化道疾病，表现为腹部饱胀感、慢性反流、腹部疼痛及消化不良等症状，常在胃镜检查时发现。根据胃息肉的组织病理学特征将其分为增生性息肉、腺瘤性息肉、炎性息肉、胃底性息肉，胃息肉被认为是癌前病变的征象，特别是直径>2 cm的胃腺瘤性息肉〔1，2〕。胃癌是临床严重的恶性肿瘤之一，治疗预后较差，严重威胁生命安全，我国是胃癌高发国家，发病率与死亡率约占世界总发病与总死亡率的50%，疾病负担相对较重，是癌症防治重点〔3〕。研究表明，胃息肉和肿瘤抑制基因与癌基因的突变有关，基因突变导致肿瘤进展加快，临床针对直径>0.5 cm的胃息肉为防止癌变的可能，应行胃镜下切除、活检，并行幽门螺杆菌(HP)根除治疗，对胃息肉恶性进展的早期进行预防、治疗具有重要意义〔4，5〕。叉头框蛋白(Fox)a2为鼠疫DNA结合蛋白，其在个体胚胎发育的多个环节发挥重要作用，相关研究表明，Foxa2在诸多肿瘤中，如乳腺癌、肝细胞癌中均呈现低表达〔6，7〕。本研究旨在探讨Foxa2在老年胃息肉患者机体中的表达，并分析其与老年胃息肉恶性进展的相关性。

1 资料与方法

1.1纳入对象 本研究严格遵循本院医学伦理委员会相关标准，选取遵义市第一人民医院2015年10月至2018年9月内镜中心胃镜检查患者，根据计算机随机抽取65例胃部息肉患者，随机抽取同时期我院胃肠外科胃癌手术标本35例，根据镜检病灶组织的病理类型进行分组，将炎性或增生性胃息肉患者65例纳入观察1组，将进展期胃癌患者35例纳入观察2组。观察1组男43例，女22例；年龄60～80岁，平均(70.85±5.32)岁。观察2组男23例，女性12例；年龄60～80岁，平均(70.76±5.27)岁。选择该时期内体检健康者45例为对照组，其中男28例，女17例；年龄60～80岁，平均(71.52±6.89)岁。纳入标准：①胃镜检查明确胃部息肉存在；②临床资料完整；③入组受试者均签订知情同意书。排除标准：①伴心、脑、肾等重要脏器功能受损者；②凝血功能异常者；③伴其他部位恶性肿瘤者。3组一般资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2Foxa2检测方法 采用免疫组织化学染色检测胃息肉组织中Foxa2表达情况，方法选用标准生物素-链霉卵白素-过氧化氢酶法进行组织染色，取石蜡4 μm进行切片、脱蜡、水化，采用pH为6.0的0.01 mol/L柠檬酸盐缓冲液对其进行热修复抗原，在室温下冷却15～20 min，3 ml/L Triton-X 100处理30 min，30 ml/L过氧化氢-甲醇封闭内源性过氧化物酶活性，切片经兔抗人Foxa2抗体与小鼠抗人E-钙黏蛋白(cadherin)抗体在4℃条件下孵育12 h，冲洗之后，加入生物素标记的山羊抗小鼠二抗工作液，再次在室温下孵育0.5 h；加入链霉卵白素工作液，在室温下孵育0.5 h；加入二氨基联苯胺(DBA)显色，然后使用苏木精轻度复染、脱水、封片。

1.3阳性表达判定 磷酸盐缓冲液(PBS)代表一抗视为阴性对照，利用染色强度与阳性细胞的占比率联合判定：染色强度主要采用0～3分4个等级：0分为阴性；1分为弱阳性；2分为中度阳性；3分为强阳性；阳性细胞百分比分级标准：0分为阳性细胞≤5%；1分为6%～25%；2分为26%～50%；3分为51%～75%；4分为>75%。Foxa2阳性表达：染色强度×阳性细胞占比≥2分。

1.4统计学方法 应用SPSS20.0统计学软件进行单因素方差分析、χ2检验、双变量Spearman相关性检验。

2 结 果

2.13组Foxa2表达 对照组、观察1组、观察2组Foxa2表达分别为(3.58±1.28)、(33.11±8.01)、(96.32±0.91)，3组差异有统计学意义(F=2 931.831，P<0.001)。

2.23组Foxa2阳性率比较 观察2组Foxa2阳性率〔35例(100%)〕>观察1组〔30例(46.15%)〕>对照组〔2例(4.44%)〕，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.3老年胃息肉恶性进展与Foxa2的相关性 Foxa2表达与老年胃息肉患者恶性进展呈正相关(r=0.538，P<0.001)。

3 讨 论

近年来，全球胃癌发病率呈逐年下降趋势，但尽管如此，我国胃癌的发病率仍处于较高水平，因此未来相当一段时间内，胃癌仍是我国肿瘤防控的重要公共卫生问题之一〔8〕。因胃癌属于慢性疾病，起病隐匿，疾病进展漫长复杂，患者偶可伴有消化道类似症状外，诸多胃癌患者无明显症状，发现时已处于疾病晚期，错过治疗的最佳时期〔9，10〕。因此，早发现、早诊断、早治疗对确定患者治疗方案及改善预后具有重要意义。

胃息肉是胃黏膜的良性凸起，主要是由间质细胞、上皮细胞及其他胶原成分组成，诸多患者常伴随非特异性临床症状，如腹胀、腹痛等，常包括胃底腺息肉、增生性息肉、炎性息肉等病理类型〔11〕。针对临床检查发现的胃镜下息肉是否需要切除应根据胃息肉是否发生癌变决定，了解胃息肉的发生机制及与癌变的关系，探寻临床可用于筛选胃息肉癌变风险的预测指标，对降低临床胃息肉癌变的概率具有重要意义〔12，13〕。本研究结果显示，Foxa2表达与老年胃息肉患者恶性进展呈正相关。分析其原因为，临床常见的用于评估胃癌的发生风险与预后的指标主要有血管内皮生长因子、胃干细胞与胃癌干细胞等，其主要为非特异性的广谱分子标志，与细胞的增殖密切相关，其中血管内生长因子主要反映肿瘤中小血管生成情况，据相关研究证实，Hedgehog及Wnt信号通路在胃肠道息肉发生过程中发挥重要作用，Foxa2又称为肝细胞核因子3β，作为一种DNA结合蛋白，在个体胚胎发育过程的诸多环节中发挥重要作用〔14～16〕。赵金磊等〔17〕研究指出，Foxa2在肝癌、肺腺癌、乳腺癌等诸多恶性肿瘤的组织中表达缺失，可发挥抑癌基因的功能，其研究结果显示，胰腺癌组织中Foxa2蛋白阳性呈现低表达，其阳性表达率较癌旁组织低，可发挥抑癌基因的功能，与胰腺癌细胞增殖、迁移与侵袭发生密切相关。王立斌等〔18〕研究指出，在肝细胞癌组织和细胞中Foxa2呈现低表达，可使HepG2细胞体外增殖与裸鼠体内瘤体生长受到显著抑制。Foxa2亚族蛋白对胃肠道内内分泌细胞与杯状细胞的发育具有重要意义。Foxa2表达与胃息肉恶性进展的关系：正常胃黏膜中Foxa2仅少量存在腺体细胞中。

本研究仍具有不足之处：纳入的样本数量较少，且属于单中心研究，上述因素均会导致本研究结果具有一定偏倚，因此希望在未来能够就此展开多样本、多中心的研究，对本研究结果加以证实，提高数据的真实性。

综上，Foxa2表达与老年胃息肉恶性进展呈正相关，临床可将Foxa2作为老年胃部息肉恶性进展的预测诊断指标。