模拟PLM法测细胞周期的模型制作
2020-01-06安徽省铜陵市实验高级中学汪正强谷菊贵
安徽省铜陵市实验高级中学 汪正强 谷菊贵
一、制作背景
测定细胞周期的方法有很多种,标记有丝分裂百分率法(简称PLM)是一种常用的测定方法,其原理是对测定的组织细胞进行放射性标记、定时取材,再利用放射自显影技术显示标记细胞,通过统计标记的有丝分裂分裂期百分数的方法来测定细胞周期。
由于这部分内容比较抽象,学生对此缺乏理解力,所以我们设计并制作了相关实物模型,以便动态地模拟相关原理及过程。
二、材料准备
直径400mm、厚度18mm大圆形亚克力板一块,直径300mm、厚度10mm小圆形亚克力板一块(内部带有距边缘20mm、宽度为30mm、95°镂空圆环),长100mm、直径10mm的圆柱棒一根,粘贴在大、小圆盘上的图案两张。如图1。
图1
三、制作过程
1.利用Photoshop软件设计大圆盘上的图案
将细胞周期按顺序分成G1期→S期→G2期→M期。在距离大圆边缘宽度为5cm的圆环上按照一定的角度分配各时期,颜色搭配依次为绿色、粉红色、紫色和黄色。在M期下方划分四个区域依次表示前、中、后、末期,并在分裂期各阶段放置相应细胞分裂期的图片,大圆中央显示转动小圆盘时红色区域面积随时间变化的曲线图。
2.利用Photoshop软件设计小圆盘上的图案
用浅红色纸在镂空区域上方圆环粘贴标记,表示所有处于S期的细胞被放射性标记。距小圆环边缘5cm的其他区域用黄色标记。小圆盘其他区域保持透明状态,这样在转动时就能看到其下方的图案和红色区域面积的变化。如图2。
图2
四、使用方法及原理分析
1.使用方法
顺时针转动小圆盘,记录镂空区域下方红色面积的变化,将结果绘制成曲线。如图3所示。
图3
2.原理分析
(1)待测细胞经分裂指数观察测定法H3-TDR培养,所有S期细胞均被标记,在小圆盘所有S期细胞区域标记为浅红色。
图4
(2)顺时针转动小圆盘,开始一段时间内镂空区域底部未见红色,继续转动,出现红色。从转动开始到出现红色这一段时间间隔即代表TG2的长短,因为这代表最先进入S期的第一个细胞已度过G2期进入M期。
图5
(3)继续转动小圆盘,镂空区域底部红色区域面积变大,在某一个时间点时,底部红色区域面积最大,那么从开始出现红色到红色面积达到最大的时间间隔就代表TM阶段时长,因为这表示最先进入S期的第一个细胞刚度过M期。
图6
(4)继续转动,当镂空区域底部红色面积开始变小时,表明最后一个进入S期的细胞也已进入M期,那么从红色面积变大到红色面积变小的时间间隔等于TS。
图7
(5)从第一次出现红色到下一次出现红色的时间间隔为一个细胞周期TC。
图8
(6)用整个细胞周期TC减去其他时间长短即代表TG1阶段长短,即TG1=TC-TG2-TS-TM。