壮族PCOS患者及其亚组的临床特征分析和血清LHCGR的表达研究

庞晓霞　石凤　覃莉　凌燕兰　陈兴鸿　韦敬锡　李秀霞　罗小琼　王俊利

【摘要】 目的 分析廣西壮族多囊卵巢综合征（PCOS）患者及亚组的临床特征和黄体生成素——人绒毛膜促性腺激素受体（LHCGR）的表达情况。

方法 选择2018年5月～10月在右江民族医学院附属医院生殖医学中心就诊的壮族PCOS患者166例为病例组，并按不同标准分为亚组，选择年龄相匹配的同期就诊的172例壮族不孕患者作为对照组，免疫发光法测定所有研究对象的内分泌指标，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中LHCGR的含量。

结果 PCOS组的BMI、LH、LH/FSH、E2、T、AMH、INS和HOMA-IR均高于对照组（P<0.05）。在PCOS患者中，肥胖组的BMI、INS和HOMA-IR高于非肥胖组，而LH和LH/FSH低于非肥胖组（P<0.05）;高雄激素组的LH、LH/FSH、E2、T较雄激素正常组的高（P<0.05）;胰岛素抵抗组的Glu、INS和HOMA-IR均比非胰岛素抵抗组的高（P<0.05）;相对于LH/FSH<2组，LH/FSH≥2组的LH、LH/FSH、E2、T和AMH升高，而BMI和FSH降低（P<0.05）。PCOS组和对照组以及PCOS患者不同分组间血清LHCGR的差异均无统计学意义（P>0.05）。

结论 壮族PCOS的临床表现多样，不同亚组的临床特征、生化特点差异较大;血清LHCGR的表达在PCOS及其亚组中未发现明显的作用。

【关键词】 壮族;多囊卵巢综合征;亚组;临床特征;LHCGR

中图分类号：R711.75 文献标志码：A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.11.004

Analysis of clinical characteristics and expression of serum LHCGR in PCOS patients and its subgroups in Guangxi Zhuang nationality

PANG Xiaoxia，SHI Feng，QIN Li，LING Yanlan，CHEN Xinghong，WEI Jingxi，LI Xiuxia，LUO Xiaoqiong，WANG Junli

（Reproductive Medicine Center of Affiliated Hospital，Youjiang Medical University for Nationalities，Baise 533000，China ）

【Abstract】 Objective To analyze the clinical characteristics and serum expression of LHCGR in patients with polycystic ovary syndrome and its subgroups in Guangxi Zhuang nationality.

Methods From May 2018 to October 2018，166 Zhuang PCOS patients who were treated in the Reproductive Medicine Center of Youjiang Medical College for Nationalities were selected as the case group and divided into subgroups according to different criteria，and the 172 infertile patients of Zhuang nationality who were treated at the same time were selected as the control group.The endocrine indexes of all subjects were determined by immunoluminescence method，and the concentration of LHCGR in serum was detected by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）.

Results BMI，LH，LH/FSH，E2，T，AMH，INS and HOMA-IR in PCOS group were significantly higher than those in control group（P<0.05）.In PCOS patients，BMI，INS and HOMA-IR in obese group were significantly higher than those in non-obese group，while LH and LH/FSH in obese group were significantly lower than those in non-obese group（P<0.05）.The LH，LH/FSH，E2，T of high androgen group was higher than that of normal androgen group（P<0.05）.Glu，INS and HOMA-IR in insulin resistance group were significantly higher than those in non insulin resistance group（P<0.05）.Compared with LH/FSH<2 group，LH，LH/FSH，E2，T and AMH increased，while BMI and FSH decreased in LH/FSH ≥ 2 group（P<0.05）.There was no significant difference of serum LHCGR between PCOS group and control group，even between subgroup（P>0.05）.

Conclusion The clinical manifestations of PCOS are various，and the clinical and biochemical characteristics of different subgroups are quite different.The significant role for LHCGR in PCOS and its subgroups have not found in our study.

【Key words】 Zhuang nationality;polycystic ovary syndrome;subgroup;clinical characteristics;LHCGR

多囊卵巢综合征（PCOS）是常见于青春期及育龄妇女的一种生殖内分泌疾病，在育龄期妇女中，具有5%～10%的群体发病率[1]，并且在无排卵妇女中就有70%为PCOS 患者，可见其对育龄妇女身心健康的危害。PCOS临床表现多样，以稀发排卵或不排卵、卵巢多囊样变和高雄激素血症为主要特征。其病因复杂，大部分研究认为遗传因素是除环境、饮食、生活习惯外的主要因素。研究表明PCOS与多种基因相关联，黄体生成素——人绒毛膜促性腺激素受体（LHCGR）是其中关联性较强的基因[2]，而LHCGR由LHCGR基因编码，它在卵泡发育和激素合成中起关键作用。研究发现PCOS患者颗粒细胞的LHCGR表达升高[3]并与PCOS的病理生理过程有关，而LHCGR在PCOS患者血清中的表达情况未见有相关研究，因此，本文除了分析PCOS患者及亚组的临床特征外，同时也检测LHCGR在PCOS患者血清中的表达并比较亚组间的表达差异，探讨其在PCOS及其亚组中可能的作用。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择2018年5月～10月在右江民族医学院附属医院生殖医学中心就诊的壮族PCOS患者166例，入选依据2003年鹿特丹标准[4]，患者抽血前未使用过影响激素、血糖、胰岛素的药物，亦未实施减肥，排除其他高雄激素疾病（先天性肾上腺皮质增生、柯兴氏综合征、分泌雄激素的肿瘤等）、高催乳素血症、甲状腺相关疾病等。选择同一时期就诊的年龄相匹配、月经规律、血清睾酮正常且无高雄激素体征、卵巢大小和形态正常的壮族不孕患者（不孕年限1年以上）172例作为对照组。

1.2 研究方法

1.2.1 血清LHCGR的检测

用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中LHCGR的含量，试剂由海联生物生产，检测仪器为RT-6000酶标仪。

1.2.2 临床生化指标检测

卵泡刺激素（FSH）、抗苗勒管激素（AMH）、空腹胰岛素（INS）等激素用发光免疫分析仪（973100：UniCleTM Dxl 800 Access，贝克曼）检测，FSH、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、催乳素（PRL）、睾酮（T）等性激素于月经2～4天测定，空腹血糖（氧化酶法）用全自动生化分析仪（Cobas 8000 C702）检测。

1.3 统计学方法

用SPSS 17.0对所有数据进行统计分析，用“One-Sample Kolmogorov-Smirnoy Test”方法对每组变量作正态性检验，符合正态分布的两组计量资料间的比较用t检验，以均数±标准差（±s）表示，不符合正态分布的用秩和检验，用中位数表示。检验水准：α=0.05，双侧检验。

2 结果

2.1 PCOS组与对照组各临床指标和血清LHCGR含量的比较

PCOS患者与对照组比较，BMI、LH、LH/FSH、E2、T、AMH、INS、HOMA-IR的差异均有统计学意义（P<0.05），而FSH、PRL、Glu和LHCGR的差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2.2 PCOS患者不同亚组各临床指标和血清LHCGR含量的比较

分别根据BMI、T、HOMA-IR和LH/FSH把PCOS患者进行分组：BMI≥25 kg/m2为肥胖组，BMI<25 kg/m2为非肥胖组;T≥0.7 μg/L为高雄组，T<0.7 μg/L为雄激素正常组;HOMA-IR≥2.14为胰岛素抵抗组（IR组），HOMA-IR<2.14为非胰岛素抵抗組（NIR组）;以LH/FSH比值=2为界值，把PCOS分为LH/FSH≥2组和LH/FSH<2组，比较各组间的临床指标和LHCGR的血清含量。结果显示，LH、LH/FSH、INS和HOMA-IR在肥胖组和非肥胖组间差异均有统计学意义（P<0.05），见表2;高雄组的LH、LH/FSH、E2、T水平高于雄激素正常组（P<0.05），见表3;与非胰岛素抵抗组相比，胰岛素抵抗组Glu、INS和HOMA-IR升高（P<0.05），见表4;LH/FSH≥2组和LH/FSH<2组两组间的年龄、BMI、FSH、LH、LH/FSH、E2、T和AMH差异均有统计学意义（P<0.05），见表5。

3 讨论

多囊卵巢综合征临床表现多样，胰岛素抵抗和雄激素升高是PCOS患者的两大特征， 其血清睾酮、胰岛素和胰岛素抵抗指数均明显高于健康对照女性。研究已经证实，增高的胰岛素是导致PCOS患者排卵障碍和月经失调的关键影响因素，胰岛素抵抗促进了PCOS的发生发展[5]，而胰岛素抵抗与BMI相关，肥胖的PCOS患者胰岛素抵抗更严重[6]。本研究肥胖组的HOMA-IR明显高于非肥胖组这一结果充分诠释了以上结论，进一步表明了肥胖是PCOS患病危险因素之一[7]。有研究[8]认为高雄激素与肥胖有一定的关系，我们比较PCOS患者肥胖组和非肥胖组的睾酮，发现两组间的差异并无统计学意义，由此说明PCOS患者的雄激素升高，但患者雄激素水平的高低不再因是否肥胖而有所差别。此外，我们的结果显示，LH/FSH≥2组的T高于LH/FSH<2组，与宁夏回族人的睾酮水平相似[9]，提示了LH/FSH≥2患者表现为HPOA轴功能紊乱，相反，高雄组的LH和LH/FSH高于雄激素正常组，这与LH参与T合成有关。除胰岛素抵抗和雄激素升高以外，高黄体生成素也是PCOS的一大重要体现，进一步的研究还发现，非肥胖组的LH比肥胖组的高，高雄组的LH高于雄激素正常组，LH/FSH≥2组LH表达高于LH/FSH<2组，与哈灵侠[9]对汉族和（或）回族PCOS患者LH表达水平的研究结果一致。AMH作为卵泡发育的调控因子，参与卵泡周期和卵泡募集。PCOS患者AMH水平明显高于对照组，说明AMH在PCOS疾病的发生发展中发挥了重要作用，这可能与升高的AMH能够使卵泡对雌激素的敏感性受到抑制，导致性激素对卵泡的调控作用受限而使卵泡成熟障碍，最终导致排卵障碍[10]有关。亚组分析发现，LH/FSH≥2组的AMH水平明显高于LH/FSH<2组，由于AMH主要由卵巢的窦前卵泡和小窦状卵泡的颗粒细胞分泌，且直径越小的窦前卵泡或小窦状卵泡分泌AMH越多[11]，是否LH/FSH≥2组患者的窦卵泡数目比LH/FSH<2组的高，目前我们还欠缺患者窦卵泡具体数目的数据而无法进一步验证，这也将为我们下一步的研究提供了方向。值得注意的是AMH分泌过剩导致血清中高T，因此LH/FSH≥2组高AMH亦高T。至于患者的E2水平，在现有研究中有升高[12]，亦有变化不明显[13]，目前尚未有统一的结论，亚组分析还发现高雄患者的E2比雄激素正常的患者高，LH/FSH≥2组的E2高于LH/FSH<2组，目前文献暂未见有关报道。由于LH作用于卵泡膜细胞，参与雄激素（睾酮）的合成，合成的雄激素一部分释放入血，一部分进入颗粒细胞用于合成雌激素（雌二醇），因此，高LH导致高雄激素，雄激素升高继而E2升高。

血液中可溶性LHCGR（sLHCGR）可增强和抑制LH/HCG的功能，有关LHCGR与PCOS的研究认为LHCGR低甲基化是PCOS的潜在致病机制[14]，另有研究认为miRNA-592可能是以LHCGR作为靶点在PCOS中发挥作用[12]，可见LHCGR在PCOS发生发展中具有举足轻重的地位。由此，本文试图通过检测血清中LHCGR的含量以探索其在PCOS中的可能作用。LHCGR属于G蛋白偶联受体超家族，其与LH和（或）人绒毛膜促性腺激素（HCG）两种配体结合发挥生物学效应，它主要在性腺上表达，如女性的卵泡膜细胞、颗粒细胞、间质细胞、黄体以及男性的睾丸间质细胞等。人类生殖功能的正常进行依赖于LHCGR，在女性方面，参与卵泡成熟、促进排卵和黄体形成，另外，LHCGR在孕早期调节孕激素的水平。Kanamarlapudi等[3]报道，PCOS患者颗粒细胞的LHCGR表达升高与PCOS的病理生理过程有关，但他们对调节LHCGR表达的因素尚未有进一步的研究，而先前的一项动物实验证明胰岛素的增加能够上调小鼠颗粒细胞中LHCGR的表达[15]。在本研究中，PCOS患者的LHCGR血清水平并没有升高，这可能跟我们选择的标本类型和检测方法有关，Kanamarlapudi等人采用的是免疫印迹法检测性腺上颗粒细胞的LHCGR，而颗粒细胞正是表达LHCGR的主要细胞。另一方面，人体内激素的调节本身就是一个复杂的过程，有文献报道颗粒细胞LHCGR的表达受FSH和E2的影响[16]，我们猜测可能PCOS患者血清的LHCGR水平本质上是表达升高的，但由于其他激素的正、负反馈调节而使本来升高的LHCGR又下降了。我们用不同标准对PCOS患者进行分组，结果亦未发现LHCGR的表达在不同亚组间具有差异。

综上所述，PCOS的临床表现多样，不同亚组的临床特征、生化特点差异较大，此外，本研究暂未发现LHCGR血清水平与PCOS有直接的关系，亚组间也没有明显的表达差异，LHCGR可能在PCOS中未起到关键作用，亦不能作为鉴别亚组的重要指标。

参 考 文 献

[1]韩曦，王宝玲，罗莉，等.多囊卵巢综合征患者代谢综合征的发病情况[J].陕西医学杂志，2015，44（2）：170-172.

[2]Almawi WY，Hubail B，Arekat DZ，et al.Leutinizing hormone/choriogonadotropin receptor and follicle stimulating hormone receptor gene variants in polycystic ovary syndrome[J].J Assist Reprod Genet，2015，32（4）：607-614.

[3]Kanamarlapudi V，Gordon UD，Lopez Bernal A.Luteinizing hormone/chorionic gonadotrophin receptor overexpressed in granulosa cells from polycystic ovary syndrome ovaries is functionally active[J].Reprod Biomed Online，2016，32（6）： 635-641.

[4]Bachanek M，Abdalla N，Cendrowski K，et al.Value of ultrasonography in the diagnosis of polycystic ovary syndrome-literature review[J].J Ultrason，2015，15（63）：410-422.

[5]邵揮戈，黄干.多囊卵巢综合征患者血清IL-1Ra、IL-1β和IL-18水平的变化[J].实用预防医学，2010，17（3）：463-465.

[6]林佳，蒋琪，石玉华.多囊卵巢综合征诊断分型及临床意义[J].中国实用妇科与产科杂志，2019，35（3）：267-271.

[7]邓燕锋，林韶华.多囊卵巢综合征患病危险因素的病例对照研究[J].右江医学，2016，44（3）：318-321.

[8]The Rotterdam ESHRE/ASRM-sposored PCOS consensus workshop group.Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome（PCOS）[J].Hum Reprod，2004，19（1）： 41-47.

[9]哈灵侠.宁夏地区回族多囊卵巢综合征糖脂代谢分析及相关基因的研究[D].济南：山东大学，2015.

[10]汤艳，王映霞，靳晓丹，等.多囊卵巢综合征患者经阴道超声检查参数、抗苗勒氏管激素水平及临床意义[J].中国医药导报，2018，15（35）：90-93.

[11]Weenen C，Laven JS，Von Bergh AR，et al.Anti-Mullerian hormone expression pattern in the human ovary：potential implications for initial and cyclic follicle recruitment[J].Mol Hum Reprod，2004，10（2）：77-83.

[12]Song J，Luo S，Li SW.miRNA-592 is downregulated and may target LHCGR in polycystic ovary syndrome patients[J].Reprod Biol，2015，15（4）：229-237.

[13]邵文，王克芳.抗苗勒管激素与多囊卵巢综合征的相关性研究[J].中国医药，2018，13（5）：747-750.

[14]王鹏.DNA甲基化异常与多囊卵巢综合征的关系及机制研究[D].济南：山东大学，2014.

[15]Eppig JJ，OBrien MJ，Pendola FL，et al.Factors affecting the developmental competence of mouse oocytes grown in vitro：follicle-stimulating hormone and insulin[J].Biol Reprod，1998，59（6）：1445-1453.

[16]Lindeberg M，Carlstrom K，Ritvos O，et al.Gonadotrophin stimulation of non-luteinized granulosa cells increases steroid production and the expression of enzymes involved in estrogen and progesterone synthesis[J].Hum Reprod，2007，22（2）：401-406.

（收稿日期：2019-07-19 修回日期：2019-09-27）

（编辑：梁明佩）

基金项目：百色市科学研究与技术开发计划项目（百科20182508）

作者简介：庞晓霞，女，检验技师，医学学士，在读硕士研究生，研究方向：不孕不育的分子遗传学。E-mail：564628657@qq.com

通信作者：罗小琼。E-mail：nongbb@126.com

王俊利。E-mail：baisewangjunli@163.com

[本文引用格式]庞晓霞，石凤，覃莉，等.广西壮族PCOS患者及其亚组的临床特征分析和血清LHCGR的表达研究[J].右江医学，2019，47（11）：815-820.