ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ联用分析中成药保济丸挥发性成分

2019-12-23骆宇燊杨红兵陈成刘毅卢金清江汉美李锦周

湖北农业科学 2019年22期

骆宇燊　杨红兵　陈成　刘毅　卢金清　江汉美　李锦周

摘要：采用顶空固相微萃取（HS-SPME）及气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）分析保济丸中的挥发性成分。结果表明，利用HS-SPME-GC-MS法从中成药保济丸中分析出29种挥发性成分，验证了其中15种成分，相对含量占保济丸总挥发性成分的46.47%，其中含量最高的为十二碳烷（12.63%），其次为茅苍术醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、石竹烯（3.66%）等。

關键词：保济丸;挥发性成分;顶空固相微萃取;气质联用

中图分类号：O657 文献标识码：A

文章编号：0439-8114（2019）22-0182-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.22.042 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Analysis of volatile components of the Chinese medicine

Baoji pills by HS-SPME-GC-MS

LUO Yu-shen1，YANG Hong-bing1，CHEN Cheng1，LIU Yi1，2，LU Jin-qing1，2，JIANG Han-mei1，2，LI Jin-zhou1

（1.Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China;

2.Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Wuhan 430065，China）

Abstract： Volatile components in Baoji pills were analyzed by using headspace solid-phase microextraction（HS-SPME） and gas chromatography-mass spectrometry（GC-MS）. Results showed that a total of 29 volatile components were analyzed by HS-SPME-GC-MS method from Chinese patent medicine Baoji pills， 15 of which were identified by experiments. The relative content accounts for 46.47% of the total volatile components of Baoji pills. The highest content was dodecane（12.63%）， followed by atractylodes ethanol （6.79%）， phenolic alcohol （4.80%） and caryophyllene （3.66%）.

Key words： Baoji pill; volatile components; HS-SPME; GC-MS

保济丸由十六味中药组成，包括厚朴、苍术、广藿香、薄荷等富含挥发油的药味。其功能为解表、和中、减轻湿热，可被用来治疗胃肠不适和由食伤引起的腹泻，亦用于晕车晕船[1]。研究发现，保济丸可以用来抗菌[2]、解热[3]、止泻镇痛及解痉[4]，还可用来治疗梅核气[5]、胃肠型感冒[6]。目前，保济丸成分的研究方法包括水蒸气蒸馏法[7]、超声波提取技术[8]及有机溶剂提取[8]，而应用固相微萃取法（SPME）分析保济丸成分未见文献报道。

中国药典中的保济丸鉴别方法为显微鉴别或薄层色谱法，部分采用高效液相色谱法测定其挥发油含量。保济丸组方中有很多含挥发性成分，所以对保济丸挥发性成分进行分析，引导人们对其产品质量的认可，对临床合理用药及充分利用保济丸具有一定的指导意义。顶空固相微萃取法（HS-SPME）是一种新型的富集技术与样品制备技术，具有萃取速度快、操作简单等优点，特别适用于低挥发性组分的研究[9]。本研究运用顶空固相微萃取技术对保济丸挥发性成分进行了分析，并用气相色谱质谱联用仪分析和鉴定其成分。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 药材保济丸：广州王老吉药业股份有限公司（批号为1708031）。

1.1.2 仪器气质联用仪，美国Hewlett-Packard公司;手动固相微萃取装置，德国IKA公司;65 μm聚二甲基硅氧烷-双乙烯基苯（PDMS/DVB）萃取纤维头，美国Supelco公司;15 mL顶空瓶;电子分析天平。

1.2 试验方法

1.2.1 试验准备利用研钵捣药罐将药品捣碎后，装入顶空瓶，每瓶药品重量1 g。

1.2.2 顶空固相微萃取法经过对萃取头、取样量、萃取温度、平衡时间等因素的考察，获得最佳固相微萃取条件[10]。取保济丸粗粉1.0 g，置于15 mL顶空瓶中，插入一个手动喷射器与6 μm PDMS/DVB萃取纤维头。120 ℃下预平衡10 min，将顶部空气抽提15 min延长后立即插入色谱仪进样口（温度在230 ℃）中，解吸时间为3 min。

1.2.3 GC-MS分析条件采用气相色谱-质谱（GC-MS）分析方法对预处理过的样品进行分析。

1）色谱条件。色谱柱：HP-5MS（50 m×0.2 mm×0.33 μm）。载气：氦气（99.999%）。流速：1.0 mL/min。进样口温度：230 ℃。采取程序升温，初始温度为110 ℃，以15 ℃/min升温到160 ℃，以20 ℃/min升温到200 ℃，再以15 ℃/min升溫到230 ℃。

2）质谱条件。离子源：EI源。离子源温度：230 ℃。四级杆温度：150 ℃。电子能量：70 eV。倍增管电压：1.2 kV。接口温度：280 ℃。质量范围：35～550 m/z。

2 结果与分析

经化学工作站数据处理和面积归一化方法从各总离子流图中计算各组分中的相对比例，具体结果见图1和表1所示。

HS-SPME-GC-MS分离得到29个峰，按各峰的质谱图经计算机质谱数据库检索，与每个峰值的质量分析图和文献数据进行对照，验证了其中15种成分，占挥发性成分总量的46.47%。保济丸15种挥发性成分中，含量最高的为十二碳烷，占挥发性成分的12.63%，其次主要为茅苍术醇（6.79%）、百秋李醇（4.80%）、1，7，7-三甲基-2环[2.2.1]-2-酰酯（3.66%）、双戊烯（3.55%）、正癸烷（3.02%）、3，8-二甲基癸烷（2.41%），其他成分有石竹烯（1.59%）、正十四烷（1.46%）等。

3 讨论

采用顶空固相微萃取法提取保济丸中的挥发性成分[11]。该方法是一种无溶剂的样品处理技术，实现了样品的吸附、浓缩、解析、进样一体，使样品预处理过程大为简化，提高了分析速度及灵敏度，同时，二次污染较少。该方法适用于快速分离和鉴定保济丸的挥发性成分，也可应用于其他中药材及中成药的挥发性成分的研究。

另外，保济丸中挥发性成分主要为烯烃类、烷烃类、脂类、醇类等。主要的烯烃类有双戊烯，主要的烷烃类有十二碳烷，主要的醇类有茅苍术醇、百秋李醇，其中茅苍术醇对肠道平滑肌有作用[12]，百秋李醇具有抗菌作用[13]。

参考文献：

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[M].北京：中国医药科技出版社，2015.1261.

[2] 郭卫真，刘妮，卢东荣，等.保济丸抗菌作用的实验研究[J].内蒙古医药，2010，24（67）：48.

[3] 茹丽，郭起岳，许常辉.保济丸粉辐照前后解热及止吐作用的研究[J].中国实验方剂学杂志，2012，18（5）：191-193.

[4] 巫燕莉，李燕舞，杜群，等.保济丸的止泻镇痛及解痉作用[J].现代医药卫生，2010，26（3）：322-324.

[5] 谭庆佳.保济丸治疗梅核气19例[J].湖北中医杂志，1991，13（4）：11.

[6] 黄晓丹，薛素琴，黄彬，等.保济浓缩丸治疗胃肠型感冒的临床研究[J].中国民族民间医药，2009（16）：44-45.

[7] 曾和平，曾志，杨定桥，等.中成药保济丸挥发性化学成分（1）[J].药物生物技术，2002，9（6）：359-363.

[8] 杨定桥，曾和平，曾志，等.中成药保济丸挥发性化学成分研究[J].中草药，2001，32（12）：1065-1067.