福清市福清山羊绵羊肺炎支原体血清学调查

郭慧瑜 林裕胜 毛坤明 胡奇林

（1.龙岩学院生命科学学院 福建龙岩 360012；2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013；3.福清市畜牧兽医技术服务中心 福建福清 350300）

绵羊肺炎支原体 （Mycoplasma ovipneumoniae，Mo）是引起羊支原体性肺炎（Mycoplasma pneumonia of sheep and goats，MPGS）的病原体，该病在全世界养羊国家广泛流行。1963年，Mackay最早在绵羊中分离得到Mo，Carmicheal等证明了Mo的致病性，山羊亦可感染，其中羔羊最易感[1]。1982年，胡景韶等[2]首次在国内绵羊体内分离到了Mo，随后宁夏和新疆等地也分离到了该病原。该病发病率达10%～80%，病死率在 15%～30%[3]。MPGS的临床症状主要表现为体温升高、咳嗽、流鼻液，精神沉郁、食欲减退、逐渐消瘦等，胸和胸膜发生浆液性和纤维素性炎症。该病一年四季均可发生，主要集中在冬春季节，在寒冷潮湿、通风不良、饲养密度过大以及个体营养缺乏导致机体抵抗力下降等因素易引起病原的快速传播，且容易引起继发感染[4]。Mo在福建省各县市均有发生[5]，已成为制约福建省养羊业健康发展的主要疫病之一，给我省造成的经济损失较大。

福清市主要饲养福清山羊，养殖模式主要以散养为主，规模化养殖场较少，为了解Mo在福清市福清山羊中的流行情况，对2019年6月从福清市4个规模化羊场和10家散养户随机采集的350份血清样品进行Mo抗体检测。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样品 2019年6月采集福清市羊场的山羊血样350份，加入抗凝剂混合10～12 min，离心20 min 左右（2 000～3 000 r/min），仔细收集血清，-20℃保存备用。

1.1.2 诊断试剂 Mo抗体酶联免疫分析试剂盒购自上海赫果生物科技有限公司。

1.2 检测方法 按照使用说明书操作，对待检血清进行酶联免疫吸附试验检测。该试剂盒采用间接法测定标本中Mo抗体水平，用纯化的Mo抗体捕获抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被的微孔板中依次加入Mo抗体，再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗原-抗体-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶催化下转化成蓝色，并在酸的作用下最终转化成黄色。颜色的深浅与样品中Mo抗体呈正相关。用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中Mo抗体含量。

表1 福清市不同羊场山羊感染Mo血清学检测结果

2 结 果

由表1可知，Mo阳性总份数为350，总抗体阳性率为88.3%。不同羊场Mo阳性率为76.7%～97.1%，平均阳性率为88.4%。

3 讨 论

在样品采集过程与养殖户的沟通交流中发现，福清市无论是规模化养殖场还是散养户饲养的福清山羊，在免疫程序上均有注射山羊传染性胸膜肺炎（Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae，Mccp）灭活疫苗。然而本次血清学调查结果显示，350份山羊血清样品中Mo有309份阳性样品，阳性率高达88.3%，其主要原因可能是现有的Mccp灭活苗与Mo缺乏交叉免疫保护性[6]；其次，是由于饲养管理水平不当以及对该病的认识不足，没有引起足够的重视。

Mo在国内其它省份发病率也较高，如倪文浩等[7]对新疆伊犁、巴州地区不同品种的绵羊感染Mo情况的血清学调查结果显示，总抗体阳性率达到15.54%（253/1 628）；黄秀君等[8]对攀枝花不同地区山羊的Mo感染血清学调查结果显示阳性率为46.0% （55/337）；张琳[9]对青海地区贵南县贵德黑裘皮羊进行的Mo血清学调查结果显示，阳性率为26.5%；韩林梅等[10]在广西牛羊主要呼吸道疫病的血清学调查中，2016年和2017年广西6市羊血清的 Mo个体阳性率分别为 32.2%（386/1 200）和49.2%（590/1 200）；吴锦艳等[11]对国内部分地区羊支原体肺炎的血清学调查结果显示，Mo抗体阳性率为31.92%（1 086/3 402），其中阳性率最高的省 （自治区）为内蒙古76.8%（636/828），其次是河北50%（60/120）、吉林 21.99%（93/423）。

通过与其它省份对比发现，福清市福清山羊Mo的抗体阳性率相对偏高，说明Mo在福清山羊中广泛流行。当地疫控中心需要加强对该病的监测，同时做好疫苗免疫，现在市面上已有Mo灭活疫苗，只有做好疫苗免疫才能使羊场健康有序发展。此外，要注意消除各种诱导因素，加强检疫、淘汰患羊、净化羊场，并在引种时加强防范，做好生物安全防护 措施。