玉溪市红塔区1 568例儿童过敏原检测分析

653100玉溪市中医院院检验科，云南玉溪

过敏反应(过敏症)是一种对异物的超敏反应，又称变态反应，已经成为一种常见病和流行病。全球过敏发生率高达20%～30%，WHO认为仅过敏症中哮喘造成的社会负担已超过肺结核和艾滋病的费用总和。以美国为例，2007年仅用于哮喘防治的直接费用就达到147亿美元。过敏症已经是全球面临的重要卫生问题[1-3]。目前，最有效的过敏症防治办法仍然是减少和避免与过敏原的接触，因此明确过敏原对变态反应的诊断和治疗至关重要。

资料与方法

收集玉溪市红塔区体检的7岁以下婴幼儿童1 568例，男813例，女755例；年龄3～7岁。

主要仪器和试剂：采用德国欧蒙医学实验诊断股份公司EUROBlotMaster印迹法自动操作仪以及特应性变应原(中国组合)检测试剂盒和判读软件，佳能canoscanline 100扫描判读系统。ELAS法测总过敏原(IgE)，采用包被有抗人IgE多克隆抗体的微孔，第一次温育时，稀释后的样本在微孔中反应。如果样本阳性，特异性IgE与抗体结合。为了检测结合的IgE，加入能发生颜色反应的过氧化物酶标抗人IgE抗体(酶结合物)进行第二次温育。然后加入酶底物，发生颜色反应，再与标准品浓度颜色比较即可得到待测样本的浓度值。使用设备为美国宝特EX800酶标仪、宝特EX50洗板机。

方法：对同一血清标本分别采用ELAS法测总IgE和斑点免疫印迹法进行检测，所有操作依据厂家说明书进行。⑴ELISA法测总IgE：①试剂盒内提供4个浓度的标准血清(0 IU/mL、10 IU/mL、100 IU/mL、500 IU/mL)和阴性对照、阳性对照。②每一板(即每个试剂盒做一组)以4份标准血清(0 IU/mL、10 IU/mL、100 IU/mL、500 IU/mL)的浓度和吸光度为横、纵坐标点对点作标准曲线(线性/线性)，根据所得的标准曲线计算机自动计算得出待测标本的浓度值。③当检测血清浓度＜100 IU/mL时报告为阴性，检测血清浓度＞100 IU/mL时报告为阳性，如果待测标本的吸光度超出了标准品1(500 IU/mL)，可报告为＞500 IU/mL。我们将样本1∶40稀释后重新测定，从标准曲线计算出的数据再乘以4即可为标本中抗体的浓度。④每一组实验标准品OD值和阴、阳性对照国际单位必须处在相应批号试剂的参考范围内，试剂盒内附靶值资料，如果对照血清的实验结果超出靶值范围必须重做。⑤每一组标准曲线相关系数须在0.99以上，否则须重做。⑵吸入性及食物性过敏原特异性IgE抗体检测：采用德国欧蒙医学实验诊断股份公司的印迹法测定，根据条带颜色的深浅用EAST类别0～6表示，IgE浓度＜0.35 KU/L为阴性，＞0.35 KU/L为阳性。

统计学方法：数据应用SPSS 11.0软件处理；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验；显著性采用t检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

两种检测方法的相关性：采用ELISA法测总IgE和免疫印迹法测20种特异性吸入性及食物性过敏原，1 568例儿童各项变应原sIgE的检测结果为总IgE阳性(血清浓度＞100 IU/mL)345例，阳性率为23.37%；斑点免疫印迹法检测变应原阳性346例，阳性率为23.44%，相关系数为P=0.01，一致性检验结果显示总IgE和免疫印迹法测20种特异性吸入性及食物性过敏原结果具有较高的符合率。检测结果不一致29例(1.96%)，其中血清总IgE浓度＞100 IU/mL的345例中未检出吸入性及食物性过敏原17例，血清总IgE浓度＜100 IU/mL为阴性时，检出低浓度吸入性及食物性过敏原12例，浓度范围多在0.35～0.7 KU/L，处于免疫印迹法检测结果的低浓度范围。

不同性别各特异性IgE检出情况：1 568例共检出特异性吸入性及食物性过敏原346例(23.44%)，其中男209例，阳性率为27.6%；女137例，阳性率为19.05%。男女性别比较差异有统计学意义(χ2=14.703，P＜0.001)。

不同年龄各特异性IgE检出情况：3～4岁显著性检验，差异有统计学意义(t=2.123，P＜0.05)，故认为本地区3岁和4岁儿童总IgE有显著性差异；4～5岁显著性检验，差异无统计学意义(t=0.267，P＞0.05)；5～6岁显著性检验，差异无统计学意义(t=0.857，P＞0.05)；6～7岁显著性检验，差异无统计学意义(t=0.821，P＞0.05)。

过敏原检测情况：1 568例检出特异性吸入性及食物性过敏原346例(23.44%)，其中对一种过敏原显示阳性68例(19.65%)，对两种和两种以上过敏原显示阳性278例(80.35%)，食物组中最常见过敏原为蛋清186例(53.7%)，其次为牛奶145例(41.9%)和螃蟹136例(39.3%)；吸入组最常见过敏原为螨虫185例(53.5%)，其次为蟑螂118例(34.1%)。检测出特异性食物性过敏原和吸入性过敏原阳性分布，见表1。

讨 论

IgE是指能够使人发生过敏的抗原。欧蒙过敏原检测试剂盒，过敏原采集于中国，是特别针对中国人饮食生活和接触环境设计的组合，因此提高了特异性检出率。与传统的过敏原检测相比具有操作简便，灵敏快速、结果判定准确、安全方便以及减少患者痛苦等优点。配备的自动化操作仪器和判读软件，可对阳性血清中的抗体浓度进行EASA分级，对过敏原检测结果的解释分析提供了极大帮助。由于筛查确诊一步到位，用血量少，故特别适合体检及儿童标本的检测，有助于确认诱发临床症状的过敏原。

本研究结果显示，玉溪市1 568例3～7岁儿童总IgE和免疫印迹法测20种特异性吸入性及食物性过敏原，总IgE阳性(血清浓度＞100 IU/ml)345例，阳性率为23.37%；斑点免疫印迹法检测变应原阳性为346例，阳性率为23.44%，相关系数为P=0.010，具有很好的相关性和测定结果一致性。在总IgE阳性(血清浓度＞100 IU/ml)345例中，血清总IgE阳性而特异性过敏原IgE阴性占19例(5.5%)，主要原因是总IgE是指血清中所有IgE的总和，包括在检的所有sIgE和非在检的IgE，除变态反应疾病外，性别、年龄、感染、自身免疫疾病等因素均可对血清总IgE检测结果有影响，所以血清总IgE的检测只能作为过筛实验。本研究结果还显示，男童阳性率明显高于女童，这可能与男童比女童好动，活动范围大，接触环境中过敏原种类增多，吸入环境中过敏原概率增加有关。从各年龄组特异性IgE检出情况分析，本地区3岁与4岁儿童总IgE有显著性差异，这与3岁儿童入托后运动量增加，频繁接触环境中过敏原有密切关系；4～5岁、6～7岁年龄段之间均无显著性差异。

表1 346例儿童食物性和吸入性过敏原特异性斑点免疫印迹阳性率情况

综上所述，结合本研究检测数据分析，过敏性疾病大部分由多种过敏原综合致敏引起，过敏原一旦明确，首先应避免与之接触，对于螨虫和蟑螂过敏患者要保持室内通风干燥，经常清洁除尘，勤洗勤晒衣被、床单。同时不养猫、狗等宠物，减少与各种花粉接触等均是有效的预防措施。对于食物过敏患者，应尽量避免吃可疑致敏的食物，对预防过敏的发生具有更前瞻性作用[4-6]。