大亚湾地区水产品中四种药物残留调查结果分析

林佩玲 方金通 吴锦辉 黄培卫 解欣斐

摘 要 为了解大亚湾地区水产品中违禁渔药残留情况，以7种较常见水产品作为研究对象，采用酶联免疫分析法检测试剂盒对其进行药物残留检测。结果显示，7个品类的4种药物残留分析中，只有网箱养殖的虎龙斑和黑鲷存在氯霉素残留（高于检测限浓度0.025 μg·L-1），呋喃唑酮、孔雀石绿和磺胺类（检测限浓度分别为0.04 μg·L-1、0.375 μg·L-1、2 μg·L-1）在所有样品中均未检出。

关键词 水产品;药物残留，酶联免疫分析法;大亚湾

中图分类号：X714 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.23.058

近年来，随着我国水产养殖业的快速发展，水产品种和数量不断增加，我国已经成为了世界水产品的消费大国和出口大国。但是养殖品种与养殖数量的增加势必会造成各种养殖病害发生频率的上升。对养殖水产品使用鱼类药物可以在一定程度上抑制水产动物的病害发生，但近些年来，部分养殖户为了追求高收入，滥用鱼类药物，对我国经济造成了很大的损失，并对食品安全和环境造成了潜在威胁。在这种严峻的形势下，采用一种简便、快速的分析方法对水产品中药物残留进行检测变得尤为重要。免疫分析法是利用抗原-抗体特异性反应来检测各种目标分析物的分析方法。这类方法具有操作简便、经济、灵敏度高、适合现场对大量样品进行快速筛检等优点，常见的主要有酶联免疫分析法、放射免疫分析法、荧光免疫分析、免疫亲和色谱等。其中ELISA由于特异性强、操作简便等特点成最常使用的方法之一[1]。Pimpitak等[2]介绍了免疫法间接测定呋喃它酮代谢物，但这种方法操作复杂、耗时较长，衍生化不完全易造成回收率偏低。2012年，Yan等[3]首次建立了免疫法直接测定呋喃它酮代谢物残留量。谭慧等[4]建立了水产品中氯霉素残留量的间接酶联免疫测定方法，该方法的检测限可达0.01 μg·kg-1。王玮[5]将免疫胶体金标记技术运用到氯霉素药物残留检测中，制定了相关的检测方法，试验表明在对水产品样品的实际检测中有较好的可靠性和推广性。多种磺胺药物的ELISA检测方法已经建立，并已初步应用于动物样品药物残留的检测工作中，对磺胺类药物的检测表现了较高的灵敏度[6]。黄志勇等[7]发明了一种水产品中孔雀石绿分子印迹膜仿生ELISA的快速检测法，该方法将MG-MIPs作为仿生抗体，建立直接竞争的ELISA快速检测法。总之，ELISA方法已广泛应用于食品安全检测中。

大亚湾地区作为广东省惠州市的重要海湾，水产资源极其丰富，具有大规模的贝类养殖场和发展成熟的鱼类网箱养殖区，并设有大亚湾水产资源保护区。鉴于大亚湾水产养殖的发展现状和水产资源特征，了解该地区水产品的安全性和药物残留现状具有重要意义。为了调查大亚湾水产品违禁渔药残留情况，对该地区7个水产品品类中磺胺类、呋喃唑酮、氯霉素和孔雀石绿4种药物的残留情况进行了酶联免疫分析法（ELISA）快速检测，了解这4种药物的残留现状，为大亚湾区水产品安全规范检测提供基础数据，为水产养殖管理、水产渔药使用规范提供科学的参考依据，让居民可以筛选出健康的水产食品。

1 材料与方法

1.1 试验材料

从大亚湾地区自渔民手中购买7种常见的海水经济种类作为检测对象，分别为刀额新对虾（海捕）、黑鲷（海捕）、红斑（工厂化养殖）、青红斑（工厂化养殖）、云龙斑（网箱养殖）、虎龙斑（网箱养殖）和黑鲷（网箱养殖）。取这些水产品的肌肉组织，用绞肉机将其绞成肉糜，取定量进行样本提取和复溶，所得溶液备用检测。呋喃唑酮、氯霉素、孔雀石绿和磺胺类药残检测试剂盒采购自深圳市易瑞生物技术股份有限公司，样品处理及检测按照各试剂盒说明书进行。

1.2 数据处理与分析

以lgC为横坐标、ln为纵坐标，构建线性回归方程。其中，C为标准品浓度;B为标准溶液或样本溶液的平均吸光度值;B0为0 μg·L-1标准溶液的平均吸光度值。

将样品的平均吸光度值代入上述回归方程，求得的值乘以样本稀释倍数（呋喃唑酮倍数为2，氯霉素倍数为1，孔雀石绿倍数为10，磺胺类倍数为2），即为样本中药物残留含量。

2 结果与分析

2.1 4种药物的标准曲线

呋喃唑酮标准曲线由5个标准样品测得数据绘制而成，回归方程为Y=-2.393 1X-2.023 0，R2=0.971 7（图1）。氯霉素标准曲线由4个标准品測得数据绘制而成，回归方程为Y=-2.946 6X+6.2381，R2=0.994 4（图2）。孔雀石绿标准曲线5个标准品测得数据绘制而成，回归方程为Y=-2.889 7X+6.421 8，R2=0.976 1（图3）。磺胺类标准曲线由5个标准品测得数据绘制而成，回归方程为Y=-2.025 6X+1.043 4，R2=0.997 1（图4）。

2.2 样品检测结果

如表1所示，7个品类的4种药物残留项目中，只有网箱养殖的虎龙斑和黑鲷存在氯霉素残留（高于检测限浓度0.025 μg·L-1），呋喃唑酮、孔雀石绿、磺胺类均低于检测限含量（检测限浓度分别为0.04 μg·L-1、0.375 μg·L-1、2 μg·L-1）。

3 讨论

尽管大亚湾养殖业已经发展多年，但对于该地区水产品中药物残留的相关调查鲜有报道。目前少数的调查结果表明该地区有部分水产品出现了药物残留超标情况。例如何秀婷等[8-9]人在对大亚湾或阳江地区的养殖区进行调查时，发现几个养殖区域均出现养殖水体中磺胺类药物和喹诺酮类药物含量过高的情况。这一情况说明大亚湾地区的鱼类养殖中存在使用禁用抗生素类药物的情况。本次调查结果显示网箱养殖的虎龙斑和黑鲷中氯霉素残留量过高，更说明了部分抗生素类药物的使用已经影响了水产品的安全性。同时海捕品种及工厂化养殖品种中均未检测到4种药物残留，说明工厂化养殖由于管理到位所生产的产品安全性要高于网箱养殖。

参考文献：

[1] 胡昌勤.酶联免疫吸附法新进展[J].生物化学与生物物理进展，1993，20（2）：85-88.

[2] Pimpitak U， Putong S， Komolpis K， et al. Development of a monoclonal antibody-based enzyme-linked immunosorbent assay for detection of the furaltadone metabolite， AMOZ， in fortified shrimp samples[J].Food Chemistry，2009，116（3）：785-791.

[3] Yan XD， Hu XZ， Zhang HC， et al. Direct determination of furaltadone metabolite，3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone，in meats by a simple immunoassay[J].Food and Agricultural Immunology，2011，23（3）：1-13.

[4] 谭慧，麦琦.酶联免疫分析法测定水产品中氯霉素残留量[J].中国卫生检验杂志，2010，20（7）：1649-1650.

[5] 王玮.氯霉素残留快速检测胶体金试纸条的研究[D].天津：天津科技大学，2008.

[6] 郑志高，江红星，吕芳，等.磺胺类药物的多残留酶联免疫法检测[J].检验检疫学刊，2006，16（1）：19-22.

[7] 黄志勇，林郑忠，李璐，等.一种水产品孔雀石绿分子印迹膜仿生ELISA的快速检测方法：中国，CN105242

038A[P].2016-01-13.

[8] 何秀婷，王奇，聂湘平，等.广东典型海水养殖区沉积物及鱼体中磺胺类药物的残留及其对人体的健康风险评价[J].环境科学，2014，35（7）：2728-2735.

[9] 何秀婷.廣东沿海典型养殖区喹诺酮类药物的监测分析及其生物标记物研究[D].广州：暨南大学，2009.

（责任编辑：刘昀）

收稿日期：2019-07-17

基金项目：2018年广东省促进经济发展专项资金“现代渔业发展用途”（SDYY-2018-04）;广东省海洋和渔业发展专项资金（2017A0002）;2017年海洋和渔业发展专项资金。

作者简介：林佩玲（1972—），女，广东惠州人，大专，研究方向为海洋生物健康养殖。E-mail： 991493893@qq.com。