血细胞分析仪形态学分析技术与镜检筛选分析

袁甜，张海燕

泗阳县人民医院检验科，江苏宿迁 223700

血细胞主要包括白细胞、红细胞和血小板三大类型。血细胞的形态学表现、分类计数情况在血液疾病（如贫血）的临床诊断中具有重要参考价值[1]。但传统手工镜检的工作量大、耗时长、视野有限，容易出现漏检情况，可行性受到限制。血细胞形态分析技术是应用血细胞分析仪，在全自动机械操作状态下完成对血细胞分类、计数、形态学信息采集等工作，具有分层扫描、视野分辨率高、方便快捷等优势，在临床血细胞检验中具有重要应用价值[2-3]。为了比较分析血细胞分析仪形态分析法、传统镜检筛选法在血液系统病变筛查中的应用效果，该研究回顾性分析了该院检验科2017年10月—2018年10月间接收的76例受试者的血液样本的血细胞检验结果，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集该院检验科接收的76例受试者所提供血液样本。纳入标准为：①所选患者由健康体检者、外科手术患者、普通病房住院患者提供；②受试者均在空腹状态下按照肘静脉采血法收集血样，分为两份，分别进行血细胞仪形态学分析和显微镜检验；③患者及家属对该研究的目的、方法和相关信息详细了解，自愿参与，签订研究同意协议；④研究经医院伦理委员会批准。排除标准：①排除合并严重躯体疾病如恶性肿瘤、脏器功能衰竭、呼吸衰竭、急性心肌梗死和急性脑梗死的患者；②排除合并精神疾病的患者；③排除合并血液功能障碍如血友病的情况；④排除合并传染疾病如艾滋病患者的血样。该组76例中有男性50例、女性 26 例，年龄 20～58 岁，平均（39.2±4.4）岁，健康体检者40名、外科手术患者21例、普通病房住院患者15例。

1.2 方法

所选受试对象均空腹8 h以上，于次日清晨7:00-9:00上午采用肘静脉采血法采集静脉血约2 mL，分装于两个试管中，在两份血样中加入EDTA-K2抗凝剂1.5 mg充分混匀后静置，在室温条件下保存，一份样本制成血涂片、应用瑞特-姬母萨染色法混合染色后在50倍镜油镜下对有核细胞进行计数，同时观察中性粒细胞、红细胞、白细胞、淋巴细胞形态结构；另一份制成血涂片样后应用迈瑞CAL8 000全自动血细胞流水线检测系统及配套试剂进行检验，将外周血涂片安装在系统，启动程序后血涂片被自动推放至载物台，开始对血涂片进行扫描，首先利用10倍物镜扫描单层细胞，然后进行多层次扫描，记录不同层次白细胞、红细胞和血小板的形态学特点、所处空间位置。最后自动滴油在100倍油镜下对血细胞高清摄像，利用DM全自动数字化细胞形态分析系统采集血细胞的颜色、几何、纹理、分形、小波、血细胞分类、占比等信息，从而对白细胞、血细胞和血小板细胞3种血细胞进行细胞识别、分类、计数和形态学分析，两份血液样本的形态学分析和检验均由细胞形态学工作人员完成。

1.3 血细胞异常样本的阳性筛选标准

（1）显微镜检，出现下述情况之一为阳性：①晚幼粒（晚幼红）：胞体直径 10～16 μm，细胞核变粗、胞质增多呈红色、充满中性颗粒：②中性粒细胞中性毒变：中性粒细胞大小不均、核固缩、空泡变性、颗粒增粗；③异型淋巴细胞（异淋）；④红细胞形态异常：红细胞大小不一、呈现球形、椭圆形、靶形等不规则形状，中央苍白区扩大。

（2）血细胞分析仪，对血细胞图像进行形态学分析，并对红细胞、白细胞、血小板、免疫细胞进行计数，若符合下述情况之一为阳性：①HGB＜100 g/L，出现贫血或溶血情况；②单核细胞＞10%；③淋巴细胞＞40%；④中性粒细胞中毒颗粒＞50%或空泡性细胞＞10%；⑤出现晚幼粒、中性粒细胞中性毒变或核左移、异淋或红细胞形态异常征。

1.4 统计方法

利用SPSS 22.0统计学软件对研究资料进行比较分析，计数资料用率（%）形式表示，两组配对比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 迈瑞CAL8 000全自动血细胞流水线检测系统形态学分析技术和显微镜检验技术对76例体检者血液样本中血细胞异常样本的筛选结果比较[n(%)]

2 结果

应用两种检验方法对76例血样进行检验分析，结果显示，血细胞分析仪形态血分析技术检出血细胞异常样本共计27例，检出率为35.5%；传统显微镜检出血细胞异常样本共计32例，检出率为42.1%，两组对于异常血细胞的检验结果比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表 1。

3 讨论

血细胞的形态学特征、分类计数情况对各类血液疾病的临床诊断具有重要参考价值，显微镜形态学检查可对血细胞的分类、比例、结构变化做出符合事实的准确判断，可作为血细胞异常的血液疾病临床筛查的金标准[4]。但人工镜检的操作复杂、耗时较长、仪器分辨率有限[5]。

近年来，血细胞形态学分析技术逐步完善，该技术是借助全自动血细胞分析仪和数字基于SVM和ANN的BCM细胞识别技术，对血细胞进行多层次、高分辨率的扫描，并将血细胞的分类、计数、形态学特征以直方图、曲线等形式反映出来，具有较高的科学性、可靠性，且检验迅速[6]。然而，血细胞分析仪是一种复杂性仪器，不同仪器间的检验结果会具有较大的差异性，增加了镜检筛选结果的不确定性[7]；此外，血细胞分析仪仅能依靠血细胞测定的相关参数进行数据分析，缺少真实的人工形态学分析，不仅容易漏检，还容易出现假阳性情况，特别难以发现红细胞形态、中性粒毒性变性、空泡变性等形态学特征。这些都使得血细胞形态学分析技术在异常血细胞的临床检验中的应用受到限制[8]。近年来，大量研究为血细胞形态分析技术提供了较为完备的规定条件，统一并规范了仪器操作步骤、操作参数，使血细胞形态学分析技术的准确率提高10%～20%，使其成为了一种高效、准确、可行性较高的血细胞分析方法[9]。

最后，该研究的结果显示，76份血液样本的血细胞分析结果显示，血细胞分析仪形态血分析技术对于血细胞异常血样的检出率为35.5%，传统镜检的检出率为42.1%，两组对于异常血细胞的检验结果比较，差异无统计学意义（P＞0.05），这也与戴泽宁等[10]关于用规定的条件进行血细胞形态分析既能确保不漏检阳性结果,又能纠正仪器的假阳性指示,使镜检率提高到35.6%的研究较为一致。

综上所述，利用血细胞分析仪形态学分析技术，能够较为准确地发现血细胞的异常情况和病因，方便快捷、分辨率高，值得在血液疾病的筛查检验中加以推广应用。