斑蝥酸钠维生素B6注射液对乳腺癌辅助化疗患者血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF表达水平的影响

郭晓莺，申国宏，赵 滨

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，具有高发病率和高死亡率的特点，目前在我国的发病年龄有年轻化趋势[1]。手术为该病的根治方法，但很多患者在就诊时已处于中晚期，失去了最佳的手术时机[2,3]。化疗为中晚期乳腺癌患者的主要方法，可延长无病生存时间并提高生活质量，也可降低局部复发率和远处转移率[4]。但是随着化疗的进行，很多患者产生耐药性，造成效果不佳，也容易复发[5,6]。斑蝥酸钠维生素B6注射液又名艾易舒注射液，可影响线粒体膜的通透性，增强氧化磷酸化的藕联过程[7]；也能减少癌细胞DNA、RNA前体物质的摄入，影响癌细胞的能量代谢平衡，抑制核酸的代谢，减少癌细胞对氨基酸的摄取，控制和缓解癌变发展[8]。该药已经在晚期非小细胞肺癌、食管癌、肝癌等治疗中取得了很好的效果[9,10]，但在乳腺癌的应用中还无相关报道。免疫系统是机体抵御疾病的第一道防线，其中T细胞参与的细胞免疫应答发挥着重要作用[11]。白介素(interleukin，IL-6)、IL-17、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor，TNF-α)对T细胞、造血细胞、肥大细胞、单核细胞都有免疫调节作用，其过表达能导致肿瘤的恶性增殖[12]。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor，MIF)在恶性肿瘤发生发展中发挥重要作用，可抑制巨噬细胞游走，可促进机体炎性反应与调节免疫反应[13,14]。本研究旨在探讨斑蝥酸钠维生素B6注射液对乳腺癌辅助化疗患者血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF表达水平的影响，以明确斑蝥酸钠维生素B6注射液的作用效果与机制。

1 对象与方法

1.1 对象 选择2014-05至2018-06在我院诊治的中晚期乳腺癌患者122例作为研究对象。纳入标准：(1)女性；(2)年龄30～70岁；(3)临床、病理与随访资料完整；卡氏评分(KPS，Karnofsky) ≥60分，预计生存期≥3个月；(4)存在可测量的病灶，临床分期Ⅲ～Ⅳ期，具有化疗指征；(5)肝肾功能、心电图及血象正常或接近正常。排除标准：(1)存在化疗禁忌证；(2)伴有严重的神经系统疾病。根据治疗方法的不同分为研究组(62例)与对照组(60例)，两组患者的组织类型、病程、临床分期等对比，差异无统计学意义(P>0.05，表1)，具有可比性。本研究通过医院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

指标研究组(n=62)对照组(n=60)χ2/tP年龄(岁)56.77±2.1956.10±3.870.5440.489月经状态(绝经/未月经)32/3030/300.0320.858临床分期(Ⅲ期/Ⅳ期)42/2038/220.2630.608体重指数(kg/m2)22.84±2.1122.19±3.890.4110.561病程(年)2.33±1.482.67±1.240.3090.671淋巴结转移(n)32310.0001.000组织类型(高/中/低分化)31/19/1231/21/80.8670.648

1.2 治疗方法 (1)对照组：给予常规化疗，环磷酰胺(CTX)500 mg/m2、吡柔比星(THP)40 mg/m2、氟尿嘧啶500 mg/m2，第1天静脉滴注，21 d为1个周期，化疗观察4个周期。(2)研究组：在对照组治疗的基础上给予斑蝥酸钠维生素B6注射液治疗，斑蝥酸钠维生素B6注射液(贵州柏强制药有限公司)40 ml+0.9%氯化钠注射液250 ml，静脉滴注，1次/d，每个化疗周期的第1～8天静脉滴注，持续观察4个周期。

1.3 观察指标 (1)疗效标准：依据病灶的直径大小进行判定。完全缓解(CR)，全部病灶都消失，持续时间≥4周；部分缓解(PR)，患者病灶最长直径≥30%[4]或者所有病灶的直径总和≥30%；疾病进展(PD)，病灶的最长直径≥20%，或者出现一个或多个新的病灶；疾病稳定(SD)，病灶的变化既没有达到PR的标准，也没有达到PD的程度。总有效率(%)=(完全缓解+部分缓解)/组内例数×100.0%。(2)按WHO抗癌药物毒性反应分级评价两组在治疗期间出现的毒副反应。(3)所有患者在化疗前后抽取空腹肘静脉血3～5 ml，平分为两管，其中一管不进行抗凝，2 h内分离血清(500～3500 r/min离心5～10 min，取上层血清)，采用双抗夹心酶联免疫吸附剂测定法检测血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF含量。另外一管进行抗凝，取全血细胞，利用Epics Elite Esp流式细胞仪计数CD3+、CD4+细胞值。(4)随访至今，记录两组的生存期(OS，Overall survival)及无进展生存期(PFS，Progress free survival)，生存期为指患者从入院开始至因任何原因引起死亡的时间，进展生存期为患者首次完成根治性抗肿瘤化疗后到再次出现肿瘤进展的时间。

2 结 果

2.1 总有效率 化疗后研究组的总有效率为67.7%，高于对照组的33.3%，两组对比差异有统计学意义(P<0.05，表2)。

表2 两组乳腺癌辅助化疗患者疗效对比 (n；%)

2.2 毒副反应 两组化疗期间的骨髓抑制、消化道反应、脱发、血小板下降等毒副反应发生情况对比，差异均无统计学意义(表3)。

表3 两组乳腺癌辅助化疗患者治疗期间毒副反应情况对比 (n；%)

2.3 血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF水平变化 两组化疗后的血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF水平均低于化疗前(P<0.05)，且研究组低于对照组(P<0.05，表4)。

指标研究组(n=62)化疗前化疗后对照组(n=60)化疗前化疗后L-6(pg/ml)56.29±14.1412.49±7.49①②54.20±11.4422.10±8.14①IL-17(pg/ml)34.14±9.045.45±2.28①②33.13±9.0612.10±3.44①TNF-α(pg/ml)56.22±6.4412.76±2.55①②56.00±7.1921.64±5.66①MIF(μg/L)9.08±2.191.98±0.92①②9.21±1.383.22±0.52①

注：与治疗前比较，①P<0.05；与对照组比较，②P<0.05

2.4 细胞免疫功能变化 研究组化疗后的CD3+、CD4+水平均高于化疗前，也高于对照组(P<0.05，表5)，对照组化疗前后对比差异无统计学意义。

指标例数CD3+(%)CD4+(%)研究组62 化疗前58.33±7.9224.28±7.29 化疗后65.27±8.13①②38.29±5.49①②对照组60 化疗前58.10±8.4424.12±8.11 化疗后58.01±7.4925.09±5.11

注：与化疗前比较，①P<0.05；与对照组比较，②P<0.05

2.5 生存情况 随访至2019-02[5]KM分析显示研究组的总生存期[(26.09±4.11)月]及无进展生存期[(20.87±4.14)月]都长于对照组[(30.22±5.69)月，(26.39±4.44)月]，差异有统计学意义(P<0.05)。

3 讨 论

乳腺癌具有复发转移风险高、生存率低、侵袭性强、易局部复发、疾病进展快等生物学特性。特别是中晚期乳腺癌患者很难获得长期生存，但病情转归存在较大的异质性[13,14]。化疗为中晚期乳腺癌患者的主要治疗方法，联合化疗能取得比较好的效果，能对微管网正常重组以及细胞的有丝分裂进行抑制，导致细胞分化受阻，使得细胞死亡[15]。但是长期化疗存在较多的毒副反应，且化疗成本高，停药后容易复发。

斑蝥酸钠维生素B6注射液是由斑蝥酸钠和维生素B6配制而成的抗肿瘤注射剂，可减少肿瘤细胞DNA和RNA前体物质的摄入，抑制重要蛋白质的合成[16]。其也可诱导肿瘤细胞的凋亡，抑制核酸代谢，减少肿瘤细胞对氨基酸的摄取[17]。该药也可缓解癌痛，增强吞噬细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，可改变T细胞亚群促进机体产生有效的抗肿瘤免疫应答，也可刺激巨噬细胞、淋巴细胞和多形核白细胞产生白介素，从而缓解患者的临床症状[18]。本研究发现化疗后研究组的总有效率为67.7%，高于对照组的33.3%，差异有统计学意义，两组化疗期间的骨髓抑制、消化道反应、脱发、血小板下降等毒副反应发生情况对比差异无统计学意义，表明斑蝥酸钠维生素B6注射液的应用并不会增加毒副反应的发生，且可提高化疗效果。

已有研究发现，肿瘤的生长和转移与肿瘤微环境存在紧密联系，而肿瘤微环境与患者的免疫功能显著相关，患者免疫功能下降可促进肿瘤进展，不利于患者预后改善[19,20]。Th1和Th2细胞的相互平衡直接影响机体的免疫功能，与疾病的发生密切相关，一些感染性疾病的发生和发展与Th1细胞和Th2细胞的失衡有关[21,22]。IL-17 是通过各种刺激因子包括细菌和各种炎性因子刺激产生的，促进T淋巴细胞的激活和刺激成纤维细胞、上皮细胞、内皮细胞产生IL-6、IL-17、TNF-α等，从而导致炎性反应[23,24]。MIF最早发现于激活的T淋巴细胞，在肿瘤侵袭转移、细胞增殖分化、血管生成等过程中扮演着重要角色[25],也是一种能抑制巨噬细胞随机移动的细胞因子，具有促炎作用等多种生物学功能，并参与机体免疫及炎性反应。相关研究显示，肺癌组织中MIF蛋白的表达与淋巴结转移呈正相关，MIF具有促进肺癌细胞分泌IL-6、促进肿瘤侵袭转移的作用[6]。在雄激素依赖的前列腺癌细胞中阻断MIF的表达，导致了细胞增殖下降及侵袭能力下降[7]。本研究发现，两组化疗后的血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF水平均低于化疗前，且研究组显著低于对照组，表明斑蝥酸钠维生素B6注射液的应用能抑制IL-6、IL-17、TNF-α及MIF的表达。从机制上分析，斑蝥酸钠维生素B6注射液可通过多种途径发挥抗肿瘤作用，可减少癌细胞对氨基酸的摄取，也可减少癌细胞DNA、RNA前体物质的摄入，抑制核酸的代谢[8]；其能改善癌细胞的能量代谢，提高过氧化氢酶的活力，从而发挥抑制IL-6、IL-17、TNF-α及MIF表达的作用[9]。

一般认为，乳腺癌是由机体免疫应答引起的病理损伤所致，化疗虽然有一定的效果，但是影响患者的免疫功能。本研究显示研究组化疗后的CD3+、CD4+水平显著高于化疗前，也高于对照组，对照组化疗前后对比差异无统计学意义。从机制上分析，乳腺癌患者多伴随有免疫抑制状态，斑蝥酸钠维生素B6注射液对正常组织没有或仅有很小的毒副反应，可调节细胞周期停滞、启动修复蛋白分子等对损伤进行修复，从而促进机体免疫功能的恢复[11]。并且该药还具有刺激骨髓造血、调节免疫功能等功能，与化疗药物联用可达到协同抗肿瘤及减轻毒副反应的目的[6]。

中晚期乳腺癌具有侵袭性强、转移能力强、腋窝淋巴结转移率高等特征，化疗为治疗乳腺癌的一种重要手段，但化疗药物在杀灭或抑制肿瘤细胞的同时也损伤机体正常组织细胞，使一部分患者被迫中止化疗，从而不利于延长患者的生存时间[12]。斑蝥酸钠维生素B6注射液是一种新型的抗肿瘤药物，可阻滞肿瘤细胞从S期进入G期及M期，抑制肿瘤细胞的增殖，促进肿瘤细胞的凋亡[14]。本研究结果显示研究组的总生存期及无进展生存期都显著长于对照组。相关研究也表明中药注射液的应用能够解决化疗阻抗现象，增强化疗效果，使得患者的5年无复发生存率和总生存率都显著增高[18]。

综上所述，斑蝥酸钠维生素B6注射液在乳腺癌辅助化疗患者中的应用能抑制血清IL-6、IL-17、TNF-α及MIF的表达，改善患者的免疫功能，提高化疗效果，且不会增加毒副反应的发生，从而延长患者的生存时间。