紫白膏对大鼠创伤模型创面修复的影响

蔡而玮，赵 诚，吴燕燕，许圳鹏，林 峰

（福建中医药大学附属人民医院，福建 福州 350004）

伴随着临床疾病的多样性，创面的修复问题逐渐增多，同时也增加家庭和社会的经济负担［1］。紫白膏是福建中医药大学附属人民医院院内制剂，能有效减轻肛肠疾病术后渗出、水肿等症状，促进创面愈合。前期临床研究也证实紫白膏可减少渗液、出血，缓解术后水肿，促进创面愈合［2-3］。本研究将通过大鼠创伤模型实验来进一步探讨紫白膏对创面修复的作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性SD大鼠120只，8～10周龄，体质量270～310 g，购自福建医科大学实验动物中心，动物生产许可证号：SCXK（闽）2012-0001。动物自由饮食，饲养于标准动物房内。适应性喂养2周后进行试验。

1.2 实验药物 紫白膏（福建中医药大学附属人民医院制剂科提供）；红霉素软膏（马应龙药业集团股份有限公司）；凡士林（振德医疗用品股份有限公司）。

1.3 实验试剂 金黄色葡萄球菌（上海鲁微科技有限公司，批号：ATCC6538）；苏木素伊红（HE）染色试剂盒（碧云天生物技术有限公司，编号：C0105）

1.4 实验仪器 CX31生物倒置显微镜（日本OLYMPUS公司）；石蜡超薄切片机（德国Leica公司）；石蜡包埋机（上海精宏实验设备有限公司）；EP管、枪头（美国Axygen公司）。

2 实验方法

2.1 创面模型的制作 通过常规手术在大鼠背部脊柱两侧对称部位做皮肤全层切口，深达筋膜，制成直径约2.5～3.0 cm大小的创面。创面内点状种植金黄色葡萄球菌，总共约0.6 mL，连续种植2 d，至伤口出现脓性分泌物为止，并在局部取材做病理组织学检验证实感染形成。

2.2 分组处理 创面模型制作成功后将120只SD大鼠称重后按照随机区组法随机分为凡士林对照组、红霉素软膏组、紫白膏组各40只。根据干预第3、7、14、21天 4个时间点，每组再分为 4个亚组，每亚组各10只。造模成功后第3天用药前3组均正常取材，取材后3组以消毒棉签将紫白膏、红霉素、凡士林药物均匀涂抹于对应大鼠的创面上，厚约1 mm，每日1次。清洁包扎创面，分笼饲养，每日换药至创面完全愈合为止。

2.3 观察指标及方法 肉眼观察3组大鼠创面色泽和结痂情况，对3组创面愈合情况及愈合时间进行统计分析。应用HE染色观察不同时间点大鼠创面肉芽生长情况。

2.4 统计学方法 采用SPSS 20.0进行统计数据。计量资料符合正态分布以（）表示，采用单因素方差分析。

3 结 果

3.1 不同时间点3组大鼠创面愈合情况 第3天换药时观察创面，创面少许渗血，较多组织渗出，创缘组织红肿，部分痂皮形成。第7天开始3组大鼠创面均见痂皮组织，创缘水肿减轻，但紫白膏组增生肉芽组织明显并向心性爬行生长。第14天时，3组创缘均有上皮组织，紫白膏组与红霉素软膏组及凡士林对照组比较创面明显缩小。至第 21天，3组创面均明显缩小，但紫白膏组大鼠创面痂皮基本脱落，大鼠创面基本修复；红霉素软膏组及凡士林对照组可见部分痂皮，创面未完全修复。见图1～4。3.2 不同时间点3组大鼠创面组织HE染色 第3天，3组大鼠创面组织镜下可见不同程度的表面坏死组织，炎性细胞增生。第7天紫白膏组大鼠创面组织表面坏死组织及炎性细胞较其他两组减少。术后第14天，紫白膏组肉芽组织较其他两组明显增生，可见少许炎性细胞浸润，3组均有成纤维细胞增生。术后第21天，再生上皮基本覆盖创面，纤维组织增生并炎性细胞明显减少。见图5～8。

图1 换药第3天3组大鼠创面愈合情况

图2 换药第7天3组大鼠创面愈合情况

图3 换药第14天3组大鼠创面愈合情况

图4 换药第21天3组大鼠创面愈合情况

图5 术后第3天大鼠创面组织HE染色图（×100）

图6 术后第7天大鼠创面组织HE染色图（×100）

图7 术后第14天大鼠创面组织HE染色图（×100）

图8 术后第21天大鼠创面组织HE染色图（×100）

3.3 3组大鼠创面愈合时间比较 见表1。

表1 3组大鼠创面愈合时间比较（）d

表1 3组大鼠创面愈合时间比较（）d

注：与紫白膏组比较，1）P＜0.05。

组别凡士林对照组红霉素软膏组紫白膏组n 40 40 40愈合时间23.50±1.591）23.05±1.661）21.02±1.23

4 讨 论

中医药在促进创面愈合方面具有良好疗效，临床上采用辨证论治的原则，综合应用多种疗法，不同的治则对应不同的“证”。根据中医辨证论治，可分为外治法和内治法。外治法是利用中药以散、膏、熏、敷、贴等多种不同形式作用于病变局部，药物借助腧穴进入皮毛，吸收后再经过经络的作用，使药物有效成分直达病灶，以达到祛除毒邪、消肿止痛、去腐生肌之功效；内治法的主要剂型是汤剂，常以清热解毒、凉血止血等药物为主。不管外治或内治，最终目的均为充分发挥中药的功效，以达到积极防治并发症的作用。利用中药的清热解毒作用，局部外用有杀菌、抗炎作用，内服又能清除血液中有害物质，可通络化瘀，修复血管内膜，改善血流状态。清热解毒中药还能降低创面局部温度，利于减少创面局部渗出及肉芽水肿，加速肉芽生成，促使创面愈合，与中医“化瘀利于生肌”的治疗思想一致［4］。

紫白膏是我院肛肠科临床常用外用膏剂，主要用于治疗肛门病术后，应用历史悠久，临床疗效显著。紫白膏主要由紫草、大黄、白及、煅石膏等组成，其中是以紫草、大黄为君，煅石膏、白及为臣。紫草取其凉血、活血、清热解毒之功效，现代研究发现紫草具有抗菌、抗炎、免疫调节、抗氧化等功效［5］；大黄具有清热泻火、活血祛瘀之功，药理研究表明大黄有泻下、止血、抗病原微生物、抗肿瘤、抗氧化等作用［6］，两味共为君药以增强清热解毒、活血祛瘀之功。石膏有泻火清热、敛疮生肌之功［7］；白及有收敛止血、消肿生肌之功，二味同用，可增加君药消肿生肌之功，促进伤口的愈合。

创面愈合可以分为止血期、炎症期、增殖期和组织重塑期，是一个动态的过程［8］。创面愈合又是一个复杂、连续的生物化学和细胞活动过程［9］。多种细胞因子参与创口愈合的过程，并彼此之间相互作用，使得创面的愈合顺利进行［10］。同时创面愈合过程中，重要的条件是毛细血管新生［11］。创伤局部的肉芽增生及新生的血管，能够保证组织修复过程所需要的营养，同时促进坏死物质的运输及吸收［12］。近年来，大量中药制剂应用于临床治疗各种急慢性创面，创面的愈合速度明显加速，效果明确［13］。研究发现，外用中药能促进创面肉芽组织相关生长因子的释放，同时创面氧自由基的量和活性也进一步降低，机体抗感染能力得到提高［14］。课题组成员在前期的临床研究也进一步说明紫白膏能有效控制术后创面炎症反应，促进创面的愈合［15］。本课题研究基于中医“化瘀利于生肌”的治疗思想及紫白膏的清热解毒、祛瘀生肌之功效，进一步将紫白膏应用于大鼠创面模型。研究发现在创面修复的不同时期，紫白膏相对于红霉素软膏和凡士林，表现出对创面肉芽组织的炎性细胞调节较好，明显加速创面肉芽组织增生，减低炎性细胞的浸润，加快创面愈合的速度，提高创面愈合的质量。

综上所述，本课题探讨紫白膏在大鼠创面愈合过程中影响，但是其干预的具体机制未明，而在创面愈合过程中存在着多种细胞因子、基因等的不断作用，是下一步研究重点。