某地区维生素D受体基因多态性与妊娠期糖尿病关系的研究

张 琰 王晓彩

（沈阳市妇婴医院，辽宁 沈阳 110011）

妊娠期糖尿病（GDM）是指妊娠期发生或首次发现的任何程度的糖代谢异常，不包括孕前已经诊断或已患糖尿病的患者[1]。该病发病率随着生活水平的提高、生育年龄的后移等因素而逐年上升。妊娠期糖尿病对母儿两代近远期都存在严重的影响，随着血糖的升高发生不良的妊娠结局，包括先兆子痫、胎膜早破、巨大儿以及新生低血糖等[2]情况随之增加。近年来随着对维生素D作用的深入研究，发现维生素D及其受体基因多态性与2型糖尿病、高血压、慢性阻塞性肺病甚至恶性肿瘤等疾病的发生、发展有关[3]。因此为了研究辽沈地区汉族人群维生素D受体（VDR）基因多态性与妊娠期糖尿病的关系，我们选择VDR基因ApaⅠ位点作为靶点，研究其基因多态性与GDM的关系，为临床早期预防和早期干预GDM提供新的思路和理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2017年1月至2018年1月孕＜14周的单胎、汉族孕妇240例作为研究对象，参照中国2型糖尿病指南（2017年）中关于GDM的标准：24～28周口服75 g葡萄糖行OGTT试验，空腹血糖≥5.1 mmol/L，服糖后1 h血糖≥10.0 mmol/L，2 h≥8.5 mmol/L，其中有一个值达到标准即可诊断GDM。根据是否为GDM分为两组进行研究。所有患者均签署知情同意书，并经我院伦理委员会讨论通过。平均年龄27～42岁，孕周6～14周。所有患者排除：排除：①妊娠期显性糖尿病及妊娠合并症、并发症；②孕前的糖尿病；③合并慢性阻塞性肺疾病、哮喘、慢性消化性疾病和慢性泌尿系统疾病；④恶性肿瘤；⑤血缘关系；⑥连续3个月口服维生素D以及其他钙制剂者。

1.2 方法：采用Promega全血基因组DNA提取试剂盒制备DNA，将VDR基因多态性待检测片段进行PCR扩增并直接进行Sanger法测序获得VDR多态性位基因型。采用电化学发光法检测，使用电化学发光全自动免疫分析仪测定血清1，25-二羟基维生素D水平。

1.3 统计学处理：SPSS17.0统计软件内分析，进行t或卡方检验，P＜0.05即代表差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较：两组在年龄方面差异不大，但孕期体质量、2型糖尿病家族史及孕早期维生素D水平两组差异显著，具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 VDR基因ApaⅠ位点基因分布及等位基因频率比较：见表2。从结果看GDM组患者ApaⅠ表达明显高于对照组，GDM组CC基因型明显高于对照组，以AA型作为对照参考，CC型是GDM发病的高危因素，CA型与GDM发病无关联，两组间等位基因频率分布无差异。

2.3 ApaⅠ基因型对GDM影响的多因素非条件Logistic：以是否为妊娠期糖尿病为应变量，调整相关混杂因素（年龄、孕次）建立多因素非条件Logistic回归模型，结果显示调整相关混杂因素后ApaⅠ、体质量指数、是否存在糖尿病家族史均是GDM发生的危险因素（OR=1.014，95%CI=1.027-1.115）。

表1 一般资料比较[n（%），]

表1 一般资料比较[n（%），]

表2 两组ApaⅠ及等位基因频率的比较[n（%）]

3 讨 论

3.1 维生素D及其受体基因：维生素D主要以1，25-二羟维生素D的形式起作用，后者通过与其细胞内特异性受体结合而发挥生物效应。维生素D缺乏在中国人群中非常普遍，低水平的维生素D被认为是2型糖尿病的危险因素。我们的研究也发现辽沈地区孕妇维生素D缺乏极其严重，分析原因可能与北方地区日照较少、饮食习惯、大气污染等因素有关。

VDR蛋白属于亲核蛋白，其结构的改变就会对所介导的生物功能产生巨大影响，因此VDR的基因多态性也一直是国内外研究的热点。人类VDR基因位于第12染色体长臂q13～14区，整个基因组由9个外显子和8个内含子组成，存在多个限制性内切酶酶切位点，其中常见的是TaqⅠ、FokⅠ、BsmⅠ和ApaⅠ的酶切位点。

3.2 维生素D及受体基因与GDM：本研究发现GDM患者体内维生素D水平明显降低，这与Khan的研究一致，他通过对维生素D与代谢性疾病的分析发现维生素D与2型糖尿病呈负相关。很多学者已经发现维生素D在调节细胞生长、存活、炎性反应和胰岛素分泌方面发挥着作用。近年来，针对VDR基因与2型糖尿病及其合并症的相关研究很多，但国内外的研究结果尚不一致。有学者[3]研究发现BsmⅠ和FokⅠ与2型糖尿病的发生有关，等位基因f可能是2型糖尿病的易感基因。在老年群体研究中发现，ApaⅠ酶切位点是与空腹血糖水平呈正相关。在本次研究中，我们发现VDR基因ApaⅠ酶切位点多态性与GDM的发生具有一定关联的，GDM患者血清中1，25-二羟基维生素D的水平较低。我们通过研究发现GDM患者更容易在维生素D缺乏的个体中发生，补充维生素D，能够有效改善胰岛素的分泌和合成，对于GDM的早期干预具有一定的意义。