研究黄芩苷提取方法和高效液相含量测定情况分析

摘 要：目的：本次主要对黄芩苷在实验之中的提取方法展开分析，了解HPLC（高效液相）含量的相关测定状况。方法：经正交实验设计，考查指标为黄芩苷总量，应用最佳的提取方法，应用HPLC法对黄芩苷的含量展开相应的测定。结果：提取的次数对水煎煮提取的工艺产生的极为明显的影响，其中提取的时间和溶剂倍数并没有明显的差异。考虑提取时间、能源成本，最佳水煎煮提取方法是药材量水煎煮的12倍，进行三次，每次1小时。在转移率实验之中，平均转移率超过77.5%，RSD为1.60%;提取方法合理且稳定。在工艺验证实验之中，黄芩苷含量为89.9%，RSD为1.15，筛选的工艺合理且稳定，可进行控制。在0.04655-0.4655ug范围之内其线性关系良，其加样回收率超过99.0%。讨论：这种提取黄芩苷的方法稳定且合理，在实验中的可实践性高。应用HPLC进行含量测定，可保障数据结果的准确性和精准性，且实验重复性佳，可在黄芩提取物含量控制之中应用该方法。

关键词：HPLC;黄芩苷;含量测定;提取方法

黄芩为唇形科植物，黄芪本身可起到泻火解毒、清热燥湿、安胎以及止血的效果。黄芩中主要是以黄芩苷、黄芩苷元以及汉黄芩素等成分，其中黄芩苷是最为有效的成分，主要可起到抗过敏、抗肿瘤和抗炎的效果。近些年来，临床的研究发现黄芩苷可有效的对HIV病毒感染、复制产生阻止作用，成为了艾滋治疗的有效药物[1]。为了保障黄芩能够更好的被利用，本次主要是应用黄芩苷总量作为本次的考察指标，对黄芩苷在实验之中的提取方法展开分析，了解HPLC（高效液相）含量的相关测定状况。

1 仪器和试药

1.1 仪器

本次主要是应用高效液相色谱仪、超声波清洗仪、旋转蒸发仪、循环水真空泵、真空干燥箱、电子恒温水浴锅。应用的试剂为：乙醇、磷酸、氢氧化钠、盐酸、水（超純水）、甲醇。

1.2 药品

本次主要是应用黄芩药材，药材主要是购买于药材市场，经过鉴定为正品的黄芩，黄芩苷对照品。

1.3 方法

本次实验设计主要是应用正交实验展开，水煮提取因受到多个因素产生的影响，其中主要包括由提取时间、溶剂倍数以及提取次数。在单个因素实验的基础之上，对三个因素进行分别设置，其中主要是应用L9正交表，误差项极为空白列，将黄芩苷干膏之中把黄芩苷总量作为本次考察的指标，将黄芩苷提取重量和黄芩苷百分含量进行相乘，极为黄芩苷的总量。在进行样品制备的时候，需要准备好9份黄芩药材，每一份均为80克。按照正交实验表之中列出的条件，先进行水煎煮，300目滤布进行过滤，滤液浓缩成400毫升，冷却到和室温保持一致，之后进行抽滤，将浓盐酸进行适量的加入，之中pH值在1-2之间。把沉淀防治在80摄氏度水浴之中保持1小时，室温静置，进行抽滤。沉淀应用蒸馏水洗涤，直至pH值为中性。在70摄氏度的状态之下进行减压干燥，之后对其进行称重。在转移率实验之中，准备好3份药材，每一份为240克，按照工艺选定的最佳条件进行制备，对黄芩苷的转移率进行测定。干膏重量和干膏之中黄芩苷含量相乘，将所得数据除以药材重量和药材之中的黄芩苷的含量，即为黄芩苷的转移率。在工艺验证实验之中，取3份黄芩药材，每一份为500克，选用优选的提取方法进行纯化工艺。黄芩苷的含量进行测定的时候，取黄芩苷标准品溶液、波长范围扫描200-400nm，浓度为46.52ug/mL，最强吸收为277nm，将其作为检测波长。

2 结果

经过实验统计计算、方差结果分析展开判断，提取的次数对水煎煮提取的工艺产生的极为明显的影响，其中提取的时间和溶剂倍数并没有明显的差异。考虑提取时间、能源成本，最佳水煎煮提取方法是药材量水煎煮的12倍，进行三次，每次1小时。在转移率实验之中，平均转移率超过77.5%，RSD为1.60%;提取方法合理且稳定。在工艺验证实验之中，黄芩苷含量为89.9%，RSD为1.15，筛选的工艺合理且稳定，可进行控制。在0.04655-0.4655ug范围之内其线性关系良，其加样回收率超过99.0%。

3 讨论

国内关于黄芩苷的提供方法研究文献有诸多报道，提取工艺主要是由超滤法、温浸法、微波法以及煎煮法。在实际工业生产之中，黄芩大多是是应用水提酸沉法进行提取，因此黄芩苷的提取方法、制备方法在临床研究之中变得越加重要[2]。在本次研究之中，经过实验统计计算、方差结果分析展开判断，提取的次数对水煎煮提取的工艺产生的极为明显的影响，其中提取的时间和溶剂倍数并没有明显的差异。考虑提取时间、能源成本，最佳水煎煮提取方法是药材量水煎煮的12倍，进行三次，每次1小时。在转移率实验之中，平均转移率超过77.5%，RSD为1.60%;提取方法合理且稳定。在工艺验证实验之中，黄芩苷含量为89.9%，RSD为1.15，筛选的工艺合理且稳定，可进行控制。在0.04655-0.4655ug范围之内其线性关系良，其加样回收率超过99.0%。概而言之，这种提取黄芩苷的方法稳定且合理，在实验中的可实践性高。应用HPLC进行含量测定，可保障数据结果的准确性和精准性，且实验重复性佳，可在黄芩提取物含量控制之中应用该方法。

参考文献：

[1]马敏怡.高效液相色谱法测定解毒祛痰浓缩丸中黄芩苷的含量[J].新疆中医药，2017，35（06）：39-42.

[2]杨必浩，周应硕.高效液相色谱法同时测定龙胆泻肝片中龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷的含量[J].系统医学，2017，2（08）：127-131.

作者简介：

井子伊禧（1985- ），女，彝族，四川金阳人，当前职务：中药室副主任，当前职称：助理工程师，本科学历，研究方向：中药检测、医药化工。