C反应蛋白、S100B蛋白和神经元特异性烯醇化酶水平与小儿癫痫之间的相关性分析*

郑凤丽,黎素清,谭志军,覃 聪,陈毅克,梁尚芝,韩 杰

(贵港市人民医院儿内科，广西贵港 537100)

小儿癫痫俗称“羊癫疯”，是由阵发性、暂时性脑功能紊乱所引发的惊厥发作[1]。研究表明，癫痫频繁而持续发作时，伴随脑内各种酶、神经递质、氨基酸及化学物质迅速变化，可导致脑细胞损伤[2-3]。近年来，通过联合癫痫病患者血清标志物与患者脑损伤严重程度的研究发现，在早期癫痫病发作时该类生化标记物检测优于计算机断层扫描(CT)及核磁共振成像(MRI)等影像学检查。这些生化标记物包括一些蛋白质、酶、神经递质、神经肽等，其中C反应蛋白(CRP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白在癫痫引发的脑损伤中的作用，已经受到人们的重视，成为监测癫痫病发作的生化标记物[4-6]。本研究旨在通过观察癫痫患儿临床发作后血清及脑脊液中CRP、NSE、S100B蛋白的变化并进一步分析二者之间的相关性,主要是依据患儿癫痫发作类型、持续时间及是否出现意识障碍、感知、情感的异常或错觉、幻觉等精神症状来明确是否发生脑损伤及脑损伤发生的程度与上述生化指标之间的相关性，为临床寻找一个客观、准确的癫痫患儿脑损伤的生化监测指标，并尝试探讨其在癫痫脑损伤的作用及意义，为癫痫发作后脑损伤的早期临床干预提供理论依据，减少患儿的后遗症。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年6月至2017年8月在本院住院治疗的癫痫患儿35例作为癫痫组，所有患儿均有典型癫痫发作现象，并经脑电图、头颅CT或MRI检查、脑脊液检查确诊为原发性癫痫，其中男14例，女21例；年龄1～12岁，平均(5.38±2.94)岁；病程6～38个月，平均(18.14±9.45)个月。另选取同期体检健康儿童50例作为对照组，其中男23例，女27例；年龄1～12岁，平均(5.50±2.78)岁。两组儿童性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，胸部X线片、血尿便常规、肝肾功能等生化检验结果无异常，无合并感染及免疫器官功能性障碍等。纳入标准：结合患儿临床表现和体征，诊断为原发性癫痫；患儿家属了解研究内容和风险，愿意参与调查研究。排除标准：癫痫患者首次采血标本后15 d内再出现临床发作者则排除本研究。本研究经医院伦理委员会批准，研究对象均自愿参与并签署知情同意书。

1.2方法 癫痫组于发病后第 1、 3、 7天及对照组在体检当天早晨8:00～9:00空腹抽取静脉血6 mL，并于 30 min 内离心取上清液，置-20 ℃冰箱内保存待测。癫痫组患儿在发病后第1、3、7天行腰穿并留取脑脊液，对照组患儿术前麻醉时留取脑脊液，放置在1.5 mL的PE管中并放置在-80 ℃冰箱保存。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清及脑脊液中S100B蛋白水平，试剂盒由上海江莱生物科技有限公司提供，检测仪器为美国产ELX808酶标仪；采用化学发光法检测NSE，试剂盒由深圳新产业生物医学工程有限公司提供，检测仪器为国产 MAGLUMI2000puls 型全自动化学发光免疫分析仪；采用免疫比浊法检测血清及脑脊液中CRP，试剂盒由上海执诚生物科技有限公司提供，检验仪器为日立7600-110，严格按照试剂盒说明书进行操作，所有标本均同一批次完成检测。

2 结 果

2.1血清S100B蛋白、NSE及CRP水平比较 癫痫组与对照组在发作后第1、3及7天血清标志物S100B蛋白、NSE及CRP水平比较见表1～3。癫痫组患儿发病后血清S100B蛋白、NSE及CRP水平均迅速升高，在发病后的第1、第3天均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；在发病后第7天时癫痫组患儿血清S100B蛋白、NSE及CRP水平均下降至正常水平，与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 两组研究对象血清S100B蛋白水平比较

表2 两组研究对象血清NSE水平比较

表3 两组研究对象血清CRP水平比较

2.2脑脊液S100B蛋白、NSE及CRP水平比较 癫痫组与对照组在发作后第1、3及7天脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平见表4～6。癫痫组患儿发病后脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平均迅速升高，在发病后的第1、3天均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；在发病后第7天时癫痫组患儿脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平均下降至正常水平，与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表4 两组研究对象脑脊液S100B蛋白水平比较

表5 两组研究对象脑脊液NSE水平比较

表6 两组研究对象脑脊液CRP水平比较

3 讨 论

癫痫发病率高，调查显示我国癫痫患病率为5‰，儿童和青少年为高发人群，长期反复癫痫性发作会导致进一步的脑损伤甚至持久性精神行为障碍，给患者本人及家属造成了巨大的心理和社会负担[7-10]。癫痫的发病机制非常复杂，关于癫痫发生发展的确切机制尚未完全阐明。无论是非抽搐性或是强至抽搐性癫痫发作，均会导致脑神经功能障碍并影响代谢，因而有理由推测，检测脑损伤的指标有望成为癫痫发作的鉴别指标[11]。

NSE、S100B蛋白、CRP已被证实是一种敏感、特异、可靠的脑损伤生化标记物。它们在健康人血清中水平极微，当中枢系统细胞受损时，由于血脑屏障的破坏，进入血液循环，使得颅脑损伤患者血清NSE、S100B蛋白水平明显升高[12-16]。大量研究表明，在脑外伤、脑出血、脑梗死等疾病中，血清和脑脊液NSE、S100B蛋白、CRP显著升高且与脑损害范围或疾病严重程度密切相关[17-18]。近年来，国内外也有少量研究表明癫痫发作时引起血清S100B蛋白、NSE升高，而关于CRP与癫痫的关系的研究极少，有研究发现，在排除任何系统感染的情况下，癫痫发作后血CRP显著升高，而关于癫痫患者脑脊液中CRP水平情况目前尚未见报道，同时，目前也未见将这3种生化指标同时研究并得出与癫痫患儿脑损伤严重程度的报道[19-20]。

本文通过比较癫痫组患儿与对照组在癫痫发病后第1、3和7天血清标志物S100B蛋白、NSE及CRP水平，发现癫痫患儿发病后第3 天血清S100B蛋白、NSE及CRP水平较对照组迅速上升，但从第3天之后开始下降，并在第7天与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。通过与对照组比较，癫痫组患儿脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平与血清中水平表现出相一致的规律，且脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平在不同时刻均高于血清中水平。S100B蛋白、NSE是神经元细胞浆内的特异性分子，其中S100B蛋白参与细胞内钙离子依赖性生物学行为的调节；NSE是糖酵解过程的关键酶，为神经元供能发挥重要作用。CRP是肝细胞合成和分泌的炎性反应介质，参与炎性反应的活化。通过研究发现癫痫组患儿血清及脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP的水平明显高于对照组，S100B蛋白、NSE及CRP水平的异常升高与癫痫的发生密切相关，S100B蛋白与NSE的升高表明癫痫患儿发生了神经元损伤，而CRP水平的升高则表明患儿体内通过免疫炎性反应来影响其神经元功能。

4 结 论

癫痫病患儿血清及脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平的异常升高与神经细胞凋亡有关，通过检测血清及脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平来反应神经元凋亡成都具有可行性，因而将血清及脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP水平作为癫痫发病标志具有可行性。将癫痫病患儿发病后，血清及脑脊液中S100B蛋白、NSE及CRP的检测方法逐步推广到县级乃至部分乡镇医院，不仅可以提高癫痫病的鉴别度，而且可操作性好,具有临床实用推广的价值。