7 种农药对菊花滑刃线虫室内毒力测定
2019-10-12田剑峰
罗 倩,田剑峰,向 准*
(1 贵州师范学院,贵州贵阳 550018;2 贵州科学院,贵州贵阳)
菊花滑刃线虫(Aphelenchoides ritzemabosi)别名菊花叶枯线虫或腋芽滑刃线虫[1],寄主范围广,包括园林观赏植物、小果类植物、蔬菜、杂草等200 多种植物,主要为害植物的叶片、幼芽和花,直接影响产花量,造成观赏价值的丧失,严重时可造成植株死亡,是菊花上的重要病害[2]。菊花滑刃线虫在全球分布广[3],为害重,被多个国家列为检验检疫对象。在我国,菊花滑刃线虫于2006 年被列为全国农业植物检疫性有害生物[1],2012年发布了该线虫检疫鉴定方法的国家标准。根据病害发生特点和为害规律预测菊花滑刃线虫在我国具有广泛的适生性,除东北、西北地区外,均适宜该线虫生长,具有潜在威胁[4]。目前,对菊花滑刃线虫防治主要是采用植物检疫、土壤消毒、抗病品种[5,6],对其化学防治研究较少。为了筛选出高效、低毒、低残留的杀线虫剂,选取市场上常见的7 种农药进行室内毒力测定,以期为以后菊花滑刃线虫化学防治提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
供试药剂:40%乐果乳油、10%吡虫啉粉剂、12%毒死蜱乳油、1%苦参碱乳油、20%丁硫克百威乳油、2.5%联苯菊酯乳油、5%阿维菌素。
供试菊花滑刃线虫由贵州大学农学院杨再福老师提供。
1.2 方法
1.2.1 线虫的培养与分离。将得到的菊花滑刃线虫纯化后扩大繁殖,在灭菌后的培养皿中放入胡萝卜愈伤组织,并在愈伤组织上接种纯化后的线虫,在培养箱23℃条件下培养。分离线虫采用贝尔曼漏斗法[7]。
1.2.2 线虫毒性试验。配制浓度为100mg/L 的药剂,取3 片干净的凹玻片加入25μL的无菌水,解剖镜下用挑取笔在线虫悬浮液中轻轻挑取10 条线虫加入凹玻片中,最后滴取25μL 测试农药溶液后盖上盖玻片制成临时玻片。另外取3 片凹玻片加入50μL 无菌水,挑取10 条线虫后盖上玻片作对照。解剖镜下仔细观察线虫的活动状态、活力情况与死亡条数,记录试验数据,每个处理5 个重复。计算菊花滑刃线虫的死亡率和校正死亡率。死亡率(%)=(死亡线虫数/线虫数)×100;校正死亡率(%)=[(处理死亡率-对照组死亡率)/(1-对照组死亡率)]×100。
2 结果与分析
2.1 7 种农药对菊花滑刃线虫的室内毒力测定
如表1,当药剂浓度为100mg/L 时,48h 内乐果、苦参碱、丁硫克百威、联苯菊酯对菊花滑刃线虫无毒性。100mg/L 阿维菌素表现出很高的活性,12h 内线虫死亡率达100%,继续设置浓度梯度,进行下一步试验。
2.2 5%阿维菌素的致死中浓度LC50测定
试验结果显示,5%阿维菌素对菊花滑刃线虫12h毒杀活性很强,且随浓度升高,死亡率升高。将浓度取对数值,线虫校正死亡率转换成几率值,利用最小二乘法求出阿维菌素毒力回归方程为y=3.37+1.37x,其中LC50是15.52mg/L(如表2)。
表1 7 种农药对菊花滑刃线虫的室内毒力测定
表2 5%阿维菌素的致死中浓度测定(12h)
3 讨论
我国花卉种植面积大,气候适宜,菊花滑刃线虫寄主分布广泛,可能对我国花卉市场构成了巨大的潜在威胁[8]。目前已在云南、贵州、浙江、河北、广东等个别省份有发现[9-12]。为了防止该线虫从国外传入和国内传播扩散,检验检疫为首要任务,但其他防治方法也需要综合利用。本研究利用7 种农药对菊花滑刃线虫进行室内毒力测定,结果表明,当浓度为100mg/L 时,5%阿维菌素乳油对菊花滑刃线虫的毒杀效果好,线虫的死亡率为100%,其LC50是15.52mg/L。阿维菌素是一类由灰色链霉菌发酵后产生,具有杀线虫活性的十六元大环内酯化合物,扰乱线虫神经活动,阻止运动神经之间的信息传递,是一类高安全性,对自然环境伤害小农药。阿维菌素对松材线虫的1h LC50为4.5mg/L[13],对绵羊消化道线虫致死率达100%[14],1.8%阿维菌素对南方根结线虫有很强的致死效果,LC50是1.48mg/L[15]。阿维菌素对线虫具有较好的毒杀活性,可作为防治线虫的首选药剂。本试验中的其余6 种农药对菊花滑刃线虫的毒杀效果不理想,100mg/L 浓度下,线虫死亡率低。在药剂作用的2h 内,菊花滑刃线虫均表现出盘旋静止、活力降低,随着时间推移,线虫恢复活力。这些药剂是如何影响菊花滑刃线虫的行动,药剂进入线虫体内又是如何被代谢的,这些问题有待以后进一步深入研究。