内生细菌对毛竹促生效果研究

袁宗胜

摘要 在毛竹中心产区，通过竹腔注射的方式接种复合微生物菌液，研究内生细菌对毛竹的促生效果。结果表明，促生内生细菌可以增加毛竹林立株数，提高毛竹冬笋营养品质，其中，施用复合微生物菌液的毛竹冬笋总糖含量与对照相比提高了25%，差异显著。施用复合微生物菌液的毛竹林地出笋数量提高，发笋期提早和延长，进一步提高了毛竹林成竹率，新生毛竹眉径与对照相比提高了3.85%。

关键词 毛竹;内生细菌;促生

中图分类号 S795.7文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2019）17-0120-03

Abstract In the main producing areas of Moso bamboo，the compound bacterial suspensions were injected into the bamboo cavity，and the effect of entophytic bacteria on the growthpromoting  bamboo was studied.The results showed that the entophytic bacteria could increase the number of bamboo shoots and improve the nutritional quality of winter bamboo shoots.Among them，the total sugar content of winter bamboo shoots which used the compound bacterial suspensions was increased by 25% compared with that of the control group，the difference was very significant.The number of bamboo shoots in bamboo forest which used the compound bacterial suspensions was increased，the time of bamboo shoots was earlier and prolonged，it also further improved the bamboo growth rate of bamboo forest，the eyebrow diameter of newborn bamboo was increased by 3.85% compared with that of the control.

Key words Moso bamboo;Entophytic bacteria;Growthpromoting

毛竹（Phyllostachys edulis）屬禾本科刚竹属，为散生型竹种，其生长快，适应性强，用途广，经济价值高，是我国南方地区重要的森林资源。根据第6次森林资源清查统计，我国的毛竹林面积约为337.2万hm 2，约占世界毛竹林总面积的47%。毛竹笋高蛋白、低淀粉，含有多种氨基酸、矿物质及维生素，素称“寒土山珍”[1-2]。

植物内生细菌生活史的一定阶段或全部阶段均生活在健康植物的各种组织和器官内部，并且与植物建立了和谐联合关系，因此内生细菌不易受环境条件影响而在植物体内长期定殖、传导，其对植物生长发育、抵抗疾病以及不良环境具有广泛的生物学作用[3-9]。笔者利用从毛竹体内分离并筛选出的具有高效解磷解钾固氮功能的促生内生细菌菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1[10]，通过竹腔注射接种的方式初步探讨内生细菌对毛竹促生的效果，以期为促生功能复合微生物菌剂的开发和利用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌株、培养基与试验毛竹林地基地

1.1.1 供试菌株。菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1是由实验室从毛竹体内分离并筛选出的具有高效解磷解钾固氮功能的促生内生细菌[10]。

1.1.2 培养基。

内生菌培养采用NA培养基：牛肉膏3 g，蛋白胨10 g，NaCl 5 g，琼脂18 g，水1 000 mL，pH7.0～7.2 （液体培养基则不加琼脂）。

1.1.3 试验毛竹林地基地。

在福建省毛竹林中心产区[11]将乐县龙栖山自然保护区毛竹林基地，选择立地条件、毛竹林分等相对一致的成片毛竹林地，采取随机区组法设置试验区组和对照区组。117°15′53.6″～117°16′0.4″E，26°31′32.2″～26°31′38.8″N，海拔为891 m。年平均气温为16 ℃，1月平均气温 6.2 ℃，7月平均气温 25.3 ℃，绝对最低气温-8.3 ℃，绝对最高气温 32.0 ℃，年平均降水雨量1 797 mm，雨季主要在春夏，秋冬降雨量较少。年平均相对湿度84%，年平均气压996.7 mPa，年日照时数1 701.5 h。无霜期长297 d，霜期约68 d。

1.2 复合微生物菌液的制备及接种

1.2.1 复合微生物菌液的制备。

将筛选出的促生内生细菌菌株CT-B09-2、JL-B06、WYS-A01-1分别接种于NA液体培养基中，28  ℃，180  r/min 条件下振荡培养 72 h，用无菌水稀释制成含1× 10 8 CFU/mL 的菌悬液，然后按照等比例混合，即制备好复合微生物菌液，待用。

1.2.2 竹腔注射法接种林间毛竹。在福建省将乐县龙栖山自然保护区毛竹林基地试验林地，选取 Ⅱ 度毛竹，先用电钻在距土表30 cm左右的竹秆部位钻孔，然后取上述复合微生物菌液50  mL用无菌注射器注射至毛竹竹腔内部，第2天重复接种50  mL，用泥土封住竹腔孔洞并做好标记。每处理 100 株，3 次重复，以清水为对照。试验年份的4、10月各接种1次。分别于试验年份冬笋采收季节、第2年春笋采收季节及毛竹新竹长成季节采样或进行林间调查。

1.3 试验毛竹林的保护与管理 试验毛竹林地设专人管理，遇有露根、露鞭，及时培土填盖。出笋前后，禁止人畜进入林地。试验年份毛竹林地内严禁放牧，不准砍竹，不准挖笋，让笋和竹自然生长。

1.4 毛竹冬笋样品采集与处理

1.4.1 冬笋样品的采集。

在冬笋发笋盛期（1月左右）选取大小均匀（200～300 g）、未出土、无破损、无病虫为害、笋身结实、不空洞、无畸形、不干缩的毛竹冬笋，试验处理及对照区域各设3个采集区域，每个采集区域采集冬笋5～8个，并形成混合样品。

1.4.2 冬笋样品的处理。

采集的毛竹冬笋剥去笋箨、切除笋蔸等，然后将可食部分的笋切成小方块，各处理冬笋样品充分混合并选取鲜样置于105 ℃烘箱杀青、60～70 ℃恒温干燥，然后过0.5 mm筛粉碎处理后，保存于干燥器中，用于冬笋营养成分测定。

1.4.3 冬笋营养成分的测定。

总糖的测定采用GB/T 5009.8 《食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》方法;粗纤维的测定采用GB/T 5009.10《植物类食品中粗纤维的测定》方法;脂肪的测定采用GB/T 5009.6《食品中脂肪的测定》方法;蛋白质的测定采用GB 5009.5《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》方法;氨基酸的测定采用GB/T 5009.124《食品中氨基酸的测定》方法。

1.5 林间调查

1.5.1 笋期调查。

在毛竹發笋期（3—5月），即从试验地少量发笋开始至新竹全部展枝放叶结束，派专人对试验毛竹林地进行笋期调查，调查发笋时间、出笋率、成竹率及新竹眉径。

出笋率=出笋数/总立竹数×100%

成竹率=新竹数/总立竹数×100%

1.5.2 立竹调查。

对试验和对照毛竹林地内毛竹进行每竹调查，测定其立株数、年龄（度）、眉径等指标，统计出各毛竹林地内单位面积立株数、平均眉径等指标[ 12-13]。

2 结果与分析

2.1 促生内生细菌对毛竹冬笋营养品质的影响

2.1.1 总糖、粗纤维、脂肪及蛋白质含量。

毛竹笋中的糖分是呈味物质，即甘甜味;毛竹笋中蛋白质含量是毛竹笋品质的一个重要指标，同时也是竹笋干物质含量较高的组成部分;粗纤维可以衡量毛竹笋的脆嫩程度，一般情况下粗纤维含量高则质地较为粗糙，含量低则质地较为脆嫩[14-15];粗脂肪含量也是评价竹笋品质的重要指标之一，竹笋的脂肪含量会随着毛竹笋不断生长而呈逐步下降趋势。

从表 1可以看出，与对照相比，施用复合微生物菌液的试验毛竹林地，冬笋的营养成分中蛋白质、 总糖、粗纤维等指标均有不同程度的提高，其中总糖含量提高了25%，表明施用复合微生物菌液能够明显改善竹笋的营养品质和口味，提高其经济价值。试验毛竹林地冬笋样品粗纤维、蛋白质含量略有提高，但差异不显著。

2.1.2 氨基酸含量。

采用氨基酸自动分析仪进行毛竹冬笋氨基酸含量的测定，结果表明，毛竹冬笋含有17种氨基酸，种类较为齐全。其中，天冬氨酸含量最高，谷氨酸、脯氨酸次之，蛋氨酸、胱氨酸含量最低。

毛竹冬笋样品中必需氨基酸的平均含量高低依次是赖氨酸、亮氨酸、缬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸。施用复合微生物菌液的试验毛竹林地冬笋样品中氨基酸总含量为 28.4 g/kg，与对照相比提高4.80%;人体所必需的氨基酸与对照相比提高2.63%，差异不显著（表2）。

2.2 促生内生细菌对毛竹生长的影响

以第1株笋破土为起始时间，定期记录，至无笋出土为终止时间。统计试验林地和对照林地出笋数、出笋率、成竹数、成竹率等。

从表3可以看出，施用复合微生物菌液的毛竹林地出笋数量提高，比对照增长34.06%;出笋率比对照提高7.84百分点，发笋期提早和延长，证明施用复合微生物菌液对毛竹促生效果明显。施用复合微生物菌液的毛竹林成竹数高于对照20%，成竹率提高2.42百分点。施用复合微生物菌液对笋高增长速度有一定控制作用，生长速度较均匀。

施用复合微生物菌液后第2年10月，对试验和对照林地内毛竹林资源进行调查，包括单位面积立株数、各度毛竹数、平均眉径等指标。

从表4可以看出，施用复合微生物菌液的毛竹林总立株数高于对照5.58%，毛竹眉径是构成毛竹产量和质量等级的重要指标之一。由表3、4可知施用复合微生物菌液新竹眉径增大，竹子增粗，对新竹生长有促进作用，新竹眉径由10.4 cm增至10.8 cm，提高3.85%，这对提高竹材质量和增加竹林收入非常有利。

3 结论与讨论

通过竹腔注射接种3种促生内生细菌的复合微生物菌液对毛竹生长具有促进作用。促生内生细菌可以增加毛竹林立株数，增大新生毛竹眉径，提高毛竹冬笋营养品质，特别是施用复合微生物菌液的毛竹冬笋总糖含量显著高于对照;施用复合微生物菌液的毛竹林地出笋数量提高，提早和延长了发笋期，进一步提高了毛竹林成竹率，同时对笋高增长速度有一定控制作用，生长速度较均匀。

该研究仅用3种促生内生细菌的发酵液等比例混合制成复合微生物菌液，下一步应继续深度探讨每种促生内生细菌发酵条件、不同菌剂的复配比例等工艺条件，以达到最佳的促生效果;对微生物菌液的其他接种方式也应进一步探讨。

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