急性白血病伴11q23/MLL基因易位和扩增临床特点

赵喜晨 孙晓云 伊丽安 赵丽 鞠波 赵洪国

[摘要] 目的 研究急性白血病（AL）伴混合系列白血病（MLL）基因易位和擴增的临床特点。

方法 初治成人AL病人112例，取其骨髓细胞经24 h短期培养，常规方法制备染色体标本，R显带行染色体核型分析;使用位点特异性识别（LSI）11q23/MLL双色分离DNA探针行间期荧光原位杂交（FISH），对异常信号者行中期FISH确定11q23/MLL异常。分析MLL基因易位和扩增者临床特征。

结果 FISH显示112例AL病人中9例（8.04%）存在11q23/MLL基因易位，8例（7.14%）存在MLL基因扩增。两者显示相似的临床特点：髓外浸润发生率高，对细胞毒药物敏感性低，治疗后早期复发率高，生存期短，预后不良。病人通常诊断为B-祖细胞急性淋巴细胞白血病、急性单核细胞白血病或双表型急性白血病。急性淋巴细胞白血病高表达CD34，急性髓系白血病高表达CD117、CD56、CD11b和CD64并有明显骨髓病态造血。MLL基因扩增病人发病年龄较大、外周血白细胞计数较低，有更明显的病态造血。

结论 11q23/MLL基因易位和扩增的成人AL病人具有相似的临床特点，MLL基因在AL发病中为功能获得性异常。

[关键词] 白血病，双表型，急性;易位，遗传;基因扩增

[中图分类号] R733.71

[文献标志码] A

[文章编号]  2096-5532（2019）06-0679-06

doi：10.11712/jms201906012

[开放科学（资源服务）标识码（OSID）]

CLINICAL FEATURES OF ACUTE LEUKEMIA WITH 11Q23/MLL TRANSLOCATIONS OR AMPLIFICATIONS

ZHAO Xichen， SUN Xiaoyun， YI Li′an， ZHAO Li， JU Bo， ZHAO Hongguo

（Department of Hematology， Qingdao West Coast New Area Central Hospital， Qingdao， 266555， China）

[ABSTRACT] Objective To investigate the clinical features of acute leukemia （AL） with mixed-lineage leukemia （MLL） gene translocations or amplifications.

Methods Bone marrow cells were collected from 112 previously untreated adult patients with AL， and then cultured for a short period of 24 h followed by conventional chromosome preparation. The R-banding technique was applied for karyotype analysis. Interphase-fluorescence in situ hybridization （FISH） was used to detect gene abnormalities using the locus-specific identifier 11q23/MLL dual-color break-apart probe. Abnormal signals of the 11q23/MLL screened out by interphase-FISH would be further determined by metaphase-FISH. The clinical features of the patients with MLL translocations or amplifications were analyzed.

Results The 11q23/MLL translocations were observed in 9 cases （8.04%） and MLL amplifications in 8 cases （7.14%） of all the 112 AL patients according to FISH. There were similar clinical features between the patients with 11q23/MLL translocations and those with 11q23/MLL amplifications： a high incidence of extramedullary infiltration， a low sensitivity to cytotoxic drugs， a high early recurrence rate after treatment， a short survival time， and a poor prognosis. The patients with MLL gene abnormalities were frequently diagnosed with B-progenitor acute lymphoblastic leukemia， acute monocytic leukemia， or biphenotypic acute leukemia. A high expression of CD34 was observed in acute lymphoblastic leukemia， while a high expression of CD117， CD56， CD11b， and CD64 along with obvious dysplasia was observed in acute myeloid leukemia. The patients with MLL amplifications had an older age of onset， a relatively low white blood cell count， and more obvious dysplasia.

Conclusion There are similar clinical features between AL patients with MLL translocations and MLL amplifications. The MLL gene develops gain-of-function abnormalities in the pathogenesis of AL.

[KEY WORDS] leukemia， biphenotypic， acute; translocation， genetic; gene amplification

急性白血病（AL）伴混合系列白血病（MLL）基因重排是常見的重现性细胞遗传学异常。常规细胞遗传学分析（CCA）检出11q23异常占全部AL病人的5%～10%。MLL基因异常的形式较多，包括易位、扩增、部分串连重复（PTD）和PHD结构域缺失等 [1-3]。伴11q23/MLL基因异常的AL病人临床上往往表现有外周血白细胞计数增高、髓外浸润发生率增高、对细胞毒药物敏感性低、治疗后早期复发率高、生存期短、预后不良。病人通常诊断为B-祖细胞急性淋巴细胞白血病（pro-B ALL）、急性单核

细胞白血病（AMoL）或双表型急性白血病（BAL）。

急性淋巴细胞白血病（ALL）和BAL高表达CD34，急性髓系白血病（AML）高表达CD117、CD56和CD64并常有明显骨髓病态造血[4-7]。荧光原位杂交（FISH）结合分子生物学和细胞遗传学技术，可有效揭示染色体易位和基因扩增[8]。本文使用位点特异性识别（LSI） 11q23/MLL双色分离DNA探针，对112例AL病人行FISH检测，分析11q23/MLL易位和基因扩增病人的临床特点，为AL临床诊治提供参考。现将结果报告如下。

1 资料和方法

1.1 病例选择

AL病人112例为已行CCA检查的初治病人，男73例，女39例;年龄12～78岁，中位年龄36岁。形态学+免疫学诊断：AML 67例，其中M1 4例，M219例，M4a5例，M4b7例，M4C3例，M5a9例，M5b17例，M63例;ALL 22例，其中pro-B ALL 4例，普通型B细胞 ALL（com-B ALL）12例 （其中ph+3例），前B细胞ALL（pre-B ALL）3例，T淋巴细胞ALL（T-ALL）3例;BAL 14例，其中My+B 标志10例，My+T 标志4例;慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）9例，其中转变为ALL者 4例，转变为AML者 5例。

1.2 骨髓细胞分裂间期FISH（interphase-FISH）筛选MLL基因异常信号

冷冻保存的CCA检查标本气干法滴片，系列乙醇梯度脱水，气干过夜。选择细胞分散良好的区域作杂交部位，73.5 ℃变性3 min，系列乙醇梯度脱水，温箱烘干。使用LSI 11q23/MLL双色分离信号DNA探针（美国Vysis公司）行FISH检测MLL基因异常信号，按说明书操作。橡皮泥密封，37 ℃湿盒中恒温杂交过夜，DAPⅡ/antifade复染。Olympus荧光显微镜观察间期细胞荧光信号，计数1 000个间期细胞。正常为黄色重叠信号，红色与绿色信号分离为易位，黄色信号数量增加为扩增。

1.3 骨髓细胞分裂中期FISH（metaphase-FISH）确定MLL基因异常

冷冻保存的CCA检查标本使用R显带技术按标椎方法制作染色体玻片，选择分散较好、带型清晰的分裂象，记录坐标并摄像。然后，二甲苯脱油，甲醇脱色，新鲜固定液浸泡10 min，系列乙醇梯度脱水，气干过夜。75～78 ℃变性5 min，其他条件同常规FISH。根据先前记录的坐标，在Olympus荧光显微镜下找到相应的分裂象并摄像。对照相应分裂象确定异常信号的位点。

1.4 临床特点分析

查阅病人病历资料，记录初诊时的病史、体格检查、影像学检查、血常规、骨髓细胞学、白血病免疫分型和CCA结果以及治疗反应，总结后续治疗的疗效和临床经过。

2 结 果

2.1 interphase-FISH筛选11q23/MLL异常信号

本文112例AL病人9例（8.04%）存在累及11q23/MLL的易位，8例（7.14%）存在MLL基因的扩增，MLL基因拷贝数3～17个。

2.2 metaphase-FISH确定11q23/MLL异常

本文3例t（4;11）（q21;q23）易位者2例诊断为BAL，1例诊断为ALL;其余3例t（6;11）（q27;q23）、1例ins（9;11）（p23;q23） 和1例t（10;11）（q11;q23） 易位者诊断为AML，1例因标本量少未行metaphase-FISH，也诊断为AML。8例MLL基因扩增者同源染色区（hsr）1例，双微染色体（dmin）1例，片段跳跃性易位（SJT）1例，三倍体4例，四倍体1例。见表1。

2.3 11q23/MLL异常病人的免疫表型

本文9例MLL易位者根据分化抗原表达，1例诊断为pro-B ALL，2例诊断为BAL，6例诊断为AML。所有ALL病人均表达CD34、CD19以及HLA-DR。诊断为com-B ALL的病人还同时表达CD10，应诊断为pro-B ALL伴CD10表达。12例诊断AML的病人均表达CD34、CD117和HLA-DR，6例表达CD56，8例表达CD64，5例表达CD11b，4例表达CD14。11q23q/MLL易位和基因扩增有极为相似的免疫学表型，均分化阻滞在造血的早期阶段。见表2。

2.4 11q23/MLL异常病人的外周血和骨髓细胞学特点

本文3例MLL易位的ALL病人，1例WBC为187.32×109/L，外周血幼稚细胞98%，骨髓增生极度活跃，骨髓原幼淋巴细胞比例98%。2例BAL病人WBC分别为18.06×109/L和133.24×109/L，外周血幼稚细胞分别为42%和64%，骨髓增生明显活跃，骨髓原幼淋巴细胞比例分别为49%和

94%。其中WBC较低者化疗前连续复查血常规呈快速增加趋势。以上3例病人骨髓均无明显髓系病态造血。

本文2例MLL基因扩增的ALL病人外周血WBC相对较低，幼稚细胞也较少。诊断ALL的病人WBC 18.85×109/L，外周血幼稚细胞2%，骨髓增生活跃，原幼淋巴细胞比例47.5%，伴有明显髓系病态造血，MLL基因扩增形式为hsr。诊断为BAL的病人WBC 61.50×109/L，外周血幼稚细胞84%，骨髓增生极度活跃，原始粒细胞比例84%，MLL基因扩增形式为三倍体。此病人因MPO染色阳性，细胞形态学曾确认为原始粒细胞。病人因原始细胞极高，无法确认有无病态造血。

本文6例MLL易位的AML病人中，2例病人的WBC>100×109/L，2例WBC为（30～100）×109/L，1例在正常范围内，1例低于正常值，外周血幼稚细胞比例0～98%;骨髓增生极度活跃者3例，明显活跃者2例，明显减低者1例，6例病人均有不同程度的单核细胞分化倾向，原始和幼稚单核细胞比例16%～97%。4例伴有明显的髓系病态造血，表现为粒细胞颗粒过多或过少、核浆发育不平衡、Auer小体、成熟粒细胞分叶过少、多种形态的巨核细胞（包括淋巴样小巨核细胞）、外周血出现有核红细胞等。白细胞增高的病人乳酸脱氢酶（LDH）和羟丁酸脱氢酶（HBDH）增高。

本文6例AML扩增病人中，除1例WBC为87.85×109/L、1例为14.62×109/L外，其余4例WBC均<5×109/L，WBC与MLL基因拷贝数无明显相关性。骨髓增生极度活跃者2例，明显活跃者3例，增生减低者1例，其中4例有明显髓系病态造血。WBC较低者病态造血更明显，WBC高者可能是因为骨髓原始细胞比例极高无法辨认病态造血。5例有明显的单核细胞分化倾向。1例AML病人骨髓原始粒细胞50.5%，红系细胞40.5%，形态学诊断为AML-M6，但免疫分型高表达CD64，说明也有单核细胞分化倾向。MLL基因扩增的病人较MLL易位的病人外周血白细胞计数低，但骨髓病态造血更为明显。

2.5 11q23/MLL异常病人的临床特点

11q23/MLL异常病人的FAB分型和初诊时的主要表现见表3。3例MLL易位的ALL病人平均年龄41.7岁（分别为25、36和64岁），2例治疗过程中早期复发（CR1期分别为3个月和4个月）后死于疾病进展，1例在骨髓抑制期自动出院后失访。2例MLL基因扩增的ALL病人平均年龄36.5岁（分别为57和16岁），1例经VDLP方案化疗获完全缓解（CR），但8个月后在治疗过程中复发。BAL病人经1个VDCP和1个VDLP方案化疗未获CR，放弃治疗。

本文6例MLL易位的AML病人平均年龄为31.7岁（分别为30、47、26、28、19和40岁），1例入院后很快发生弥散性血管内凝血（DIC）而死亡，2例在治疗过程中早期复发（CR1期分别为3个月和5

个月）后死于疾病进展，1例诱导化疗骨髓抑制期死于败血症，1例诱导化疗骨髓抑制期自动出院，1例未在本院治療。6例AML病人平均年龄为50.7岁（分别为57、44、38、39、54和72岁），2例病人有骨髓增生异常综合征（MDS）病史。2例诱导化疗2疗程未获CR，1例诱导化疗中长期骨髓抑制期第64天因颅内出血死亡，1例治疗过程中早期复发（CR1期4个月）后死于疾病进展，2例未在本院治疗。MLL基因扩增的AML病人平均年龄较MLL易位的AML者大，疗效均极差，有很低的缓解率和很高的早期复发率。

3 讨 论

人类的MLL（也称为MLL1、ALL1、HTRX、HRX、TRX1、KMT2A）基因位于11q23，编码为3 969个氨基酸的大分子蛋白质，具有甲基转移酶活性，是表观遗传学修饰的重要因子。MLL蛋白在苏氨酸-门冬氨酸酶-1（taspase-1）作用下裂解为N-端的MLLN和C-端的MLLC两个片段，通过FYR及SET结构域形成自身二聚体。二聚化的MLL蛋白结合于已被始动转录因子作用的DNA序列，至少募集29种蛋白质，形成一个复杂的多蛋白复合体。MLL虽不始动转录，但维持已活化基因的持续转录状态[9-10]。现已发现MLL的靶基因有100多种，但最重要的是维持同源盒（HOX）基因及其共因子MEIS1的转录激活，在正常胚胎发育和成人造血细胞的自我更新中起重要作用[9-12]。

在AL中研究较多的是累及11q23/MLL的易位，造成不同染色体或不同区段的两个基因重排形成融合基因，转录翻译成一种新的融合蛋白。致病性MLL融合蛋白均包含N-端的AT吊钩、SNL1、SNL2和MT结构域，C-端连接伙伴基因。在所有累及MLL基因重排的AL病人，都造成MLL基因功能的异常活化，从而导致HOX及MEIS1的异常表达，促使造血细胞发生恶性转化[1-3，13]。细胞学和动物实验研究结果均表明，在髓系前体细胞单独导

入MLL融合基因足以促使细胞自我更新和自主增

殖，抑制细胞定向分化和凋亡[14]，这种转化作用（转化为ALL或是AML）还受到发育环境的影响[15]。而11q23/MLL重排则主要见于AL病人，尤其是婴儿ALL、成人AML和治疗相关的AL（t-AL），也可见于MDS[1-3]。

已发现11q23/MLL重排的位点多达80余个，几乎累及了各条染色体，CCA只能检出少数形态变化明显的易位。除易位外，MLL基因异常还有基因扩增、PTD和PHD结构域缺失[1-3]。CCA不能检出这3种基因异常，因此需要多种方法加以确定。随着表观遗传学和靶向药物的研究进展，确定各种形式的MLL基因异常具有更重要和更现实的意义[16-18]。应用11q23/MLL双色分离DNA探针进行FISH检测，可同时检出累及11q23/MLL的各种易位而不需预先明确伙伴基因，易于在分裂间期细胞确定易位的存在，在中期分裂象明确伙伴基因的位点，同时还有效揭示MLL基因的扩增。文献报道AML伴t（8;21）（q22;q22）/AML1-ETO、t（15;17）（q22;q11～12）/PML-RARa、inv（16）（p13;q22）/CBFβ-MYH11的病人未见11q23/MLL基因重排[19]。本研究使用LSI 11q23/MLL双色分离DNA探针对112例成人AL病人进行FISH检测，结果显示9例存在累及11q23/MLL的易位（检出率8.04%），8例存在MLL基因的扩增（检出率7.14%）。一方面说明FISH检测MLL基因易位具有高效性和针对性，另一方面说明MLL基因扩增在成人AL中发生率高。如果加上PTD和PHD结构域缺失，则MLL基因异常在AL中发生率可能会很高，尤其pro-BALL和AML M1、M2、M4、M5、M6病人更应注意MLL基因异常。同时，有些累及11q/23的细胞遗传学异常不一定是MLL基因异常[19-21]。理想的方法是在一张玻片上能同时检测以上4种异常，但目前尚无此项技术。

本文重点讨论11q23/MLL易位和MLL基因扩增的临床和实验室特点。相关研究显示，伴MLL基因扩增的AML病人占全部AML病人的1%～2%，发病年龄较大、外周血WBC较低、骨髓病态造血更明显、常为复杂核型（通常有5q-、7q-、17p-等），但均有单核细胞分化倾向、治疗反应差、预后不良等特征[22-31]。目前，ALL病人伴MLL基因扩增的报道极少。

本文对11q23/MLL易位和MLL基因扩增病人的分化抗原标志检测显示，二者具有几乎完全相同的免疫表型。本文11q23/MLL易位和MLL基因扩增的ALL和BAL病人均表达pro-B细胞标志CD34、CD19、HLA-DR，均可以看作是pro-B ALL伴有其他系列表面标志的异常表达。11q23/MLL易位和MLL基因扩增的AML病人均表达干/祖细胞表面标志CD34、CD117、HLA-DR，表明白血病细胞分化阻滞在造血干/祖细胞的早期阶段。髓系标志除CD13、CD33外，CD56、CD64、CD11b和CD14呈现高表达率，说明单核细胞分化倾向，与文献报道相符[19-31]。细胞转化和动物实验的研究表明，转导MLL融合基因后髓系细胞“返祖”停留在粒-单核祖细胞阶段，并且不需要其他异常基因的参与[14]，转化细胞检测到高水平的HOXA9和MEIS1的表达[12-13]。也有研究结果表明，转化细胞主要是自我更新能力增加和凋亡减少而不影响其分化，其结果是粒-单核祖细胞数量增多和逐步出现的正常造血被抑制。伴MLL基因异常的AML病人诊断为M1、M2、M4、M5和M6，极少数诊断为M7，但免疫分型均有单核细胞分化倾向[25-27]，也说明MLL基因主要影响粒-单核祖细胞。

本文11q23/MLL易位和MLL基因扩增的成人ALL病人因检出例数较少、年龄分布范围较大，很难进行对照。MLL基因扩增的成人AML病人较11q23/MLL易位的成人AML病人发病年龄大，白细胞计数低，与相关文献报道相符[28-30]。但文献报道MLL基因扩增标本主要是有特殊染色体异常如hsr、dmin、SJT、环形染色体和标记染色体者，本文研究事先不关心染色体核型。也就是说本文研究更有随机性。骨髓病态造血是11q23/MLL基因异常的AML病人最明显的特征。无论是11q23/MLL易位还是MLL基因扩增的病人，白细胞计数较低、骨髓中白血病细胞较少者病态造血更明显，可能是因为白血病细胞较多者分化细胞的数量较少，对病态造血的描述较为困难。MLL基因扩增者较11q23/MLL易位者形态学异常更明显。有研究报道MLL基因扩增者细胞遗传学多存在复杂核型（常伴有5q-、7q-、17p-等）[31]，本文研究并没有发现该特点。单独的MLL基因扩增可能足以致细胞转化，而且在MDS中也常可检测到MLL基因扩增，说明伴MLL基因扩增的AML与MDS有更密切的关联性，也容易解释其他的临床特点。伴MLL基因擴增的ALL也可能与MDS有密切关联性。

综上所述，MLL基因扩增和11q23/MLL易位的成人AL病人具有几乎完全相同的免疫学表型，极差的治疗反应和不良预后。但MLL基因扩增较11q23/MLL重排的成人AL病人也有其特点：病人发病年龄较大，外周血白细胞计数较低，骨髓增生程度较低，病态造血更明显，与MDS的关系可能更密切。成人AL病人MLL基因扩增的发生率较高。

[参考文献]

[1]KRIVTSOV A V， HOSHII T， ARMSTRONG S A. Mixed-lineage leukemia fusions and chromatin in leukemia[J]. Cold Spring Harbor Perspectives in Medicine， 2017，7（11）：1-21.

[2]SLANY R K. The molecular mechanics of mixed lineage leukemia[J]. Oncogene， 2016，35（40）：5215-5223.

[3]MARSCHALEK R. Systematic classification of Mixed-Lineage leukemia fusion partners predicts additional cancer pathways[J]. Annals of Laboratory Medicine， 2016，36（2）：85-100.

[4]ISHIZAWA S， SLOVAK M L， POPPLEWELL L， et al. High frequency of pro-B acute lymphoblastic leukemia in adults with secondary leukemia with 11q23 abnormalities[J]. Leukemia， 2003，17（6）：1091-1095.

[5]SUN Y N， HU Y X， GAO L， et al. The therapeutic efficacy of pediatric ALL patients with MLL gene rearrangement treated with CCLG-ALL2008 protocol[J]. European Review for Medical and Pharmacological Sciences， 2018，22（18）：6020-6029.

[6]BAER M R， STEWART C C， LAWRENCE D， et al. Acute myeloid leukemia with 11q23 translocations： myelomonocytic immunophenotype by multiparameter flow cytometry[J]. Leukemia， 1998，12（3）：317-325.

[7]GRIMWADE D， WALKER H， HARRISON G， et al. The predictive value of hierarchical cytogenetic classification in older adults with acute myeloid leukemia （AML）： analysis of 1 065 patients entered into the United Kingdom Medical Research Council AML11 trial[J]. Blood， 2001，98（5）：1312-1320.

[8]VAN DER BURG M， BEVERLOO H B， LANGERAK A W， et al. Rapid and sensitive detection of all types of MLL gene translocations with a single FISH probe set[J]. Leukemia， 1999，13（12）：2107-2113.

[9]MARSCHALEK R， NILSON I， LOCHNER K， et al. The structure of the human ALL-1/MLL/HRX gene[J]. Leukemia & Lymphoma， 1997，27（5/6）：417.

[10]COSGROVE M S， PATEL A. Mixed lineage leukemia： a structure-function perspective of the MLL1 protein[J]. FEBS Journal， 2010，277（8）：1832-1842.

[11]YIP B H， SO C W. Mixed lineage leukemia protein in normaland leukemic stem cells[J]. Experimental Biology and Medi-cine， 2013，238（3）：315-323.

[12]LUESCHER F J， CHATAIN N， KUO C C， et al. Hemato-poietic stem and progenitor cell proliferation and differentiation requires the trithorax protein Ash2l[J]. Scientific Reports， 2019，9（1）：1-16.

[13]FABER J， KRIVTSOV A V， STUBBS M C， et al. HOXA9 is required for survival in human MLL-rearranged acute leuke-

mias[J]. Blood， 2009，113（11）：2375-2385.

[14]KRIVTSOV A V， FENG Z， ARMSTRONG S A. Transformation from committed progenitor to leukemia stem cells[J]. Annals of the New York Academy of Sciences， 2009（1176）：144-149.

[15]WEI J P， WUNDERLICH M， FOX C， et al. Microenvironment determines lineage fate in a human model of MLL-AF9 leukemia[J]. Cancer Cell， 2008，13（6）：483-495.

[16]CHAN A K N， CHEN C W. Rewiring the epigenetic networks in mll-rearranged leukemias： epigenetic dysregulation and pharmacological interventions[J]. Front Cell Dev Biol， 2019，7：81. doi：10.3389/fcell.2019.00081.

[17]AHO E R， WEISSMILLER A M， FESIK S W， et al. Targeting WDR5： a WINning anti-cancer strategy[J]？ Epigenet Insights， 2019，18（12）：1-5.

[18]ROOLF C， RICHTER A， KONKOLEFSKI C， et al. Deci-

tabine demonstrates antileukemic activity in B cell precursor acute lymphoblastic leukemia with MLL rearrangements[J]. Journal of Hematology & Oncology， 2018，11（1）：1-13.

[19]ARNAUD B， DOUET-GUILBERT N， MOREL F， et al Screening by fluorescence in situ hybridization for MLL status at diagnosis in 239 unselected patients with acute myeloblastic leukemia[J]. Cancer Genet Cytogenet， 2005，161（2）：110-115.

[20]KIM H J， CHO H I， KIM E C， et al. A study on 289 conse-

cutive Korean patients with acute leukaemias revealed fluorescence in situ hybridization detects the MLL translocation wi-

thout cytogenetic evidence both initially and during follow-up[J]. British Journal of Haematology， 2002，119（4）：930-939.

[21]CUTHBERT G， THOMPSON K， MCCULLOUGH S， et al. MLL amplification in acute leukaemia：a United Kingdom Cancer Cytogenetics Group （UKCCG） study[J]. Leukemia， 2000，14（11）：1885-1891.

[22]MICHAUX L， WLODARSKA I， STUL M， et al. MLL amplification in myeloid leukemias：a study of 14 cases with multiple copies of 11q23[J]. Genes Chromosomes & Cancer， 2000，29（1）：40-47.

[23]RAYEROUX K C， CAMPBELL L J. Gene amplification in myeloid leukemias elucidated by fluorescence in situ hybridization[J]. Cancer Genetics and Cytogenetics， 2009，193（1）：44-53.

[24]ZATKOVA A， MERK S， WENDEHACK M， et al. AML/MDS with 11q/MLL amplification show characteristic gene expression signature and interplay of DNA copy number changes[J]. Genes Chromosomes & Cancer， 2009，48（6）：510-520.

[25]KOKA R， MAINOR C B， BANERJEE A， et al. Concomitant amplification of the MLL gene on a ring chromosome and a homogeneously staining region （hsr） in acute myeloid leuke-

mia： mechanistic implications[J]. Leukemia & Lymphoma， 2017，58（5）：1250-1253.

[26]REDDY K S， PARSONS L， MAK L， et al. Segmental amplification of 11q23 region identified by fluorescence in situ hybridization in four patients with myeloid disorders： a review[J]. Cancer Genetics and Cytogenetics， 2001，126（2）：139-146.

[27]HERRY A， DOUET-GUILBERT N， GUGANIC N， et al. Del（5q） and MLL amplification in homogeneously staining region in acute myeloblastic leukemia： a recurrent cytogenetic association[J]. Annals of Hematology， 2006，85（4）：244-249.

[28]TANG G L， DINARDO C， ZHANG L P， et al. MLL gene amplification in acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndromes is associated with characteristic clinicopathological findings and TP53 gene mutation[J]. Human Pathology， 2015，46（1）：65-73.

[29]DE OLIVEIRA F M， LUCENA-ARAUJO A R， SANTOS G A， et al. Segmental amplification of MLL gene associated with high expression of AURKA and AURKB genes in a case of acute monoblastic leukemia with complex karyotype[J]. Can-

cer Genetics and Cytogenetics， 2010，198（1）：62-65.

[30]MAITTA R W， CANNIZZARO L A， RAMESH K H. Association of MLL amplification with poor outcome in acute myeloid leukemia[J]. Cancer Genetics and Cytogenetics， 2009，192（1）：40-43.

[31]POPPE B， VANDESOMPELE J， SCHOCH C， et al. Expression analyses identify MLL as a prominent target of 11q23 amplification and support an etiologic role for MLL gain of function in myeloid malignancies[J]. Blood， 2004，103（1）：229-235.