高效液相色谱检测水产品中甲氧苄啶残留量

佟晓波 孙晓娟 张京华

摘要：本文建立了水产品中甲氧苄啶残留量的高效液相色谱（HPLC）的检测方法。该方法操作简便，准确度高，适用于水产品中甲氧苄啶残留检测。

关键词：高效液相色谱;水产品;甲氧苄啶

目前，水产品中甲氧苄啶的检测方法主要有紫外分光光度法[4-5]、吸附溶出伏安法[6]、液相色谱法等[7-9]。本文以市售的鲜鱼为研究对象，对其中的甲氧苄啶检测前处理条件进行了选择和优化，高效液相色谱紫外检测器检测条件的建立和优化，建立了高效液相色谱法检测水产品中甲氧苄啶的方法。

结果与讨论

样品前处理條件的优化

（1）提取溶剂的选择。水产品基质复杂，且含有较多的脂肪和蛋白等成分，而甲氧苄啶属于弱碱性化合物，易溶于酸性溶液，而纯水相的提取液在净化时易出现乳化，不利于分层，因此本研究中选择酸化的甲醇作为提取液。考虑样品基质中含有蛋白，硫酸具有一定的沉淀蛋白的作用，因此选择硫酸化的甲醇溶液，分别考察了甲醇-硫酸体积比为7：3、6：4、5：5、4：6、3：7时对水产品中甲氧苄啶的提取效果，当比例为7：3时效果最好，因此最终选择甲醇-硫酸体积比7：3的溶液作为提取液。

（2）净化条件的优化。在酸性条件下，甲氧苄啶几乎不溶于三氯甲烷，而水产品中含有较多的脂肪、蛋白和部分色素等，三氯甲烷可以除去脂。分别考察了在提取过程中和提取之后加入三氯甲烷的净化和回收效果，发现在提取过程中加入三氯甲烷，首次提取液未见溶入三氯甲烷，但在第二次提取过程中，有部分三氯甲烷溶于提取液中，提取液体积明显大于理论加入体积，最终造成提取液中溶入了三氯甲烷相，引入杂质，净化效果变差，同时因杂质的引入，使得回收率不到70.0%;与此同时我们在提取过程之后向合并后的提取液中加入三氯甲烷，未发现有三氯甲烷相溶于提取液中的情况，且回收率均在80.0%以上，因此选择在提取过程之后加入三氯甲烷进行净化。

（3）线性方程与定量限。按照1.4项的方法配制6水平标准曲线，并在优化色谱条件下进行检测，以甲氧苄啶的峰面积为纵坐标，甲氧苄啶的浓度为横坐标绘制曲线，甲氧苄啶的线性范围为0.05～1.0 μg/mL，相关系数r为0.9998，线性关系良好，定量限为15 μg/kg。

（4）回收率和精密度。在空白样品中添加甲氧苄啶标准溶液，制备含量分别为20、40和200 μg/kg的加标样品，按照1.4项处理方法及仪器测定条件进行测试，每个添加水平平行测定6份，结果见表1。各化合物的平均回收率为80.2～91.7%，相对标准偏差为1.1～1.7%，采用本方法检测水产品中的甲氧苄啶含量，准确度和精密度均较好。

采用本研究建立的检测方法，对市售的10批次鲜鱼进行检测，其中3批检出甲氧苄啶，但检出值均小于农业部235号公告附录2：已批准的动物性食品中最高残留限量规定的限量要求50 g/kg范围内，可以放心食用。

结论

本研究采用酸化的甲醇提取水产品中甲氧苄啶，用三氯甲烷除脂等杂质，二氯甲烷反萃取的方法，结果准确可靠，精密度高，重现性好。与国家标准《GB 29702-2013水产品中甲氧苄啶残留量的测定》相比，操作简单、快速，除杂效果更优，适用于食品检验检测机构进行水产品中的甲氧苄啶的检测。