超声波辅助酸酶法提取碎米抗性淀粉工艺的优化

祝水兰 周巾英 刘光宪 冯健雄 张灿权 杨平

摘要：【目的】優化超声波辅助酸酶法提取抗性淀粉工艺条件，为碎米抗性淀粉的提取和高值化利用提供技术支持。【方法】以碎米淀粉为原料，抗性淀粉提取率为评价指标，在单因素试验基础上，利用Design-Expert 8.05进行响应面分析，并建立二次多项式数学模型，依据回归分析确定超声波辅助酸酶法提取抗性淀粉的最优工艺条件。【结果】建立了抗性淀粉提取率（Y）对盐酸浓度（A）、酶用量（B）、酸解时间（C）和超声波时间（D）的二次回归方程：Y=51.99+1.03A+0.93B+0.88C-0.64D-0.55AB+0.58AC-0.73AD+1.12BC+0.56BD+0.52CD-1.25A2-2.28B2-5.24C2-1.60D2。各因素对碎米抗性淀粉提取率的影响排序为盐酸浓度>酶用量>酸解时间>超声波时间;酶用量与酸解时间的交互作用对碎米抗性淀粉提取率影响极显著（P<0.01），盐酸浓度与超声波时间的交互作用影响显著（P<0.05）。超声波辅助酸酶法提取抗性淀粉最优工艺条件为：盐酸浓度0.5 mol/L、酶用量3.5 U/g、酸解时间1.5 h、超声波时间25 min，在此条件下，抗性淀粉提取率为51.99%，与预测值（52.44%）接近。【结论】通过响应面试验优化的超声波辅助酸酶法可有效提取碎米抗性淀粉，建立的回归模型可用于实际生产预测。

关键词： 碎米;超声波;酸酶法;抗性淀粉提取率;响应面分析

中图分类号： S511.2; TS201.21                  文献标志码： A 文章编号：2095-1191（2019）08-1814-08

Optimization of ultrasonic-assisted acid enzymatic extraction of resistant starch from broken rice

ZHU Shui-lan， ZHOU Jin-ying， LIU Guang-xian， FENG Jian-xiong，

ZHANG Can-quan*， YANG Ping*

（Jiangxi Academy of Agricultural Sciences， Nanchang  330200， China）

Abstract：【Objective】The presented study aimed to optimize the process conditions of ultrasonic-assisted acid and enzymatic extraction of resistant starch and provide technical support for extraction and high-value utilization of resistant starch from broken rice. 【Method】Broken rice starch was used as raw material， and the resistant starch yield was as the evaluation indicator. Based on the results of single factor experiment， response surface analysis by Design-Expert 8.05 software was conducted to establish mathematical models for the extraction process of resistant starch of broken rice， and the optimal protease conditions were determined by regression equation. 【Result】The quadratic regression equation of yield of resistant starch（Y） to hydrochloric acid concentration（A）， enzyme dosage（B）， acidolysis time（C） and ultraso-nic time（D） was established： Y=51.99+1.03A+0.93B+0.88C-0.64D-0.55AB+0.58AC-0.73AD+1.12BC+0.56BD+0.52CD-1.25A2-2.28B2-5.24C2-1.60D2. The effects of various factors on the extraction rate of the order of resistant starch was as fo-llows：the hydrochloric acid concentration>enzyme dosage>acidolysis time>ultrasonic time. The interaction between enzyme dosage and acid hydrolysis time had extremely significant effects on the extraction rate of resistant starch from broken rice（P<0.01）， and the interaction between hydrochloric acid concentration and ultrasonic time had significant effects（P<0.05）. The optimal resistant starch extraction by ultrasonic-assisted acid and enzymatic extraction method was： hydrochloric acid concentration 0.5 mol/L， enzyme adding was 3.5 U/g， acidolysis time 1.5 h and ultrasonic time 25 min. Under this condition， the extraction rate of resistant starch was 51.99%， which was similar to the theoretical value（52.44%）. 【Conclusion】The ultrasonic-assisted acid and enzymatic extraction process optimized by response surface test can effectively extract the resistant starch from broken rice. The established regression model can be used to predict the actual production.

Key words： broken rice; ultrasonic; acid and enzyme method; resistant starch yield; response surface

0 引言

【研究意义】大米抗性淀粉是以大米淀粉为基质的天然存在或人工制备的抗性淀粉。抗性淀粉（Resistant starch，RS）是一种抗消化性淀粉，健康者小肠中不吸收的淀粉及降解物（张志英和沈建福，2005）。其具有特殊生理功能，可控制体重、抗癌、预防糖尿病、调节血脂、促进矿物质吸收及提高膳食纤维成分等（Topping and Clifton，2001;蒋展，2014），并广泛应用于主食制品、焙烤食品、蒸煮食品、保健食品、发酵制品及饮料中。因此，研究碎米抗性淀粉的提取工艺，对改善膳食纤维对产品口感、外观等影响和提高大米加工产品的附加值及经济效益均具有重要意义。【前人研究进展】国内外学者对大米抗性淀粉提取方法进行了不少研究，刘一洋（2010）利用酸酶结合沸水浴提取抗性淀粉，获得最高提取率为24.31%;周颖等（2014）以大米淀粉为原料、α-淀粉酶和普鲁兰酶为酶制剂，利用单因素试验研究得到大米抗性淀粉制备条件：pH 5.5、温度80 ℃、反应时间40 min、酶用量4 U/g，抗性淀粉得率为45.2%;许诗尧（2016）以大米粉为原料，考察了压热法、湿热法和韧化法处理对大米粉抗性淀粉含量的影响，结果表明，3种处理均能提高大米粉中的抗性淀粉含量，其中压热处理大米粉的抗性淀粉含量最高，可达12.70%;杨帆等（2018）研究超声波—湿热法结合酸水解制备大米RS3型抗性淀粉的最佳工艺条件，结果表明，大米淀粉含水量30%、处理温度130 ℃、处理时间10 h，RS3型抗性淀粉得率为32.173%，在此基础上结合酸水解的最佳工艺条件（柠檬酸浓度0.15 mol/L、加热时间20 min、老化时间24 h），RS3型抗性淀粉得率为40.672%;Jeong和Shin（2018）通过酸水解法从糯米淀粉中提取获得抗性淀粉。【本研究切入点】目前利用响应面优化超声波—酸酶水浴结合提取碎米抗性淀粉工艺的研究鲜见报道。【拟解决的关键问题】通过单因素试验和响应面试验优化碎米抗性淀粉的提取工艺，为碎米抗性淀粉的提取利用提供技术支持。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

碎米淀粉为自制，纯度高，淀粉含量88%;普鲁兰酶（1000 ASPU/g）购自江苏锐阳生物科技有限公司，盐酸、冰乙酸、氢氧化钠、氢氧化钾和二水合氯化钙等均为国产分析纯。主要仪器设备：FS1000Y-3摇摆式粉碎机（广州雷迈机械设备有限公司）、UP250型超声波细胞粉碎仪（宁波新芝生物科技股份有限公司）、B-260型恒温水浴锅（上海亚荣生化仪器厂）、SHA-B型水浴恒温振荡器（常州润华电器有限公司）。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 碎米抗性淀粉制备 准确称取碎米淀粉20 g，加入一定浓度的盐酸溶液，调成固液比1∶4（g/mL），用超声波细胞粉碎仪辅助振荡一定时间，在水温30 ℃时盐酸酸解一定时间，加入4%氢氧化钠溶液，调pH至7，再加0.1%柠檬酸调pH至5，加入普鲁兰酶，在60 ℃水浴条件下水解4 h，取出加入4%氢氧化钠溶液5 mL终止反应，离心，自然冷却，放入4 ℃冰箱回生24 h，之后取出置于50 ℃烘箱烘干，粉碎制得抗性淀粉。

1. 2. 2 抗性淀粉提取单因素试验

1. 2. 2. 1 盐酸浓度 固定水浴时间4 h、酶解温度60 ℃和酶解时间3 h，控制超声波时间20 min、酸解时间1.5 h和普鲁兰酶用量4.0 U/g，调控盐酸浓度分别为0.2、0.3、0.4、0.5和0.6 mol/L，考察盐酸浓度对碎米抗性淀粉提取率的影响。

1. 2. 2. 2 超声波时间 固定水浴时间4 h、酶解温度60 ℃和酶解时间3 h，控制盐酸浓度0.5 mol/L、酸解时间1.5 h和普鲁兰酶用量4.0 U/g，调控超声波时间分别为10、15、20、25和30 min，考察超声波時间对碎米抗性淀粉提取率的影响。

1. 2. 2. 3 酸解时间 固定水浴时间4 h、酶解温度60 ℃和酶解时间3 h，控制盐酸浓度0.5 mol/L、超声波时间20 min和普鲁兰酶用量4.0 U/g，调控酸解时间分别为0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 h，考察酸解时间对碎米抗性淀粉提取率的影响。

1. 2. 2. 4 酶用量 固定水浴时间4 h、酶解温度60 ℃和酶解时间3 h，控制盐酸浓度0.5 mol/L、超声波时间20 min和酸解时间1.5 h，调控普鲁兰酶用量分别为2.5、3.0、3.5、4.0和4.5 U/g，考察酶用量对碎米抗性淀粉提取率的影响。

1. 2. 3 响应面优化 在单因素试验的基础上，通过SPSS 19.0进行方差分析，选择对抗性淀粉提取率有显著影响的因素，根据Box-Behnhen中心组合试验设计原理（陈胜军等，2018），以抗性淀粉提取率为评价指标进行响应面试验，进一步优化碎米抗性淀粉提取工艺。响应面因素水平设计如表1所示。

1. 2. 4 抗性淀粉提取率计算 根据NY/T 2638—2014《稻米及制品中抗性淀粉的测定》对抗性淀粉进行测定，计算公式如下：

E=[mM×ω]×100

式中，E为抗性淀粉提取率（%），m为纯抗性淀粉样品质量（g），M为样品质量（g），ω为总淀粉含量（%）。

1. 3 统计分析

所有试验均重复3次，数据分析采用平均值。采用Excel 2007作图，Design-Expert 8.05对试验数据进行响应曲面分析。

2 结果与分析

2. 1 单因素试验结果

2. 1. 1 盐酸浓度对抗性淀粉提取率的影响 由图1可看出，盐酸浓度从0.2 mol/L到0.5 mol/L递变时，碎米抗性淀粉提取率逐渐增加，在0.5 mol/L时达最大值（49.99%）。盐酸浓度0.4、0.5和0.6 mol/L的抗性淀粉提取率间无显著差异（P>0.05，下同），但三者均与盐酸浓度0.2和0.3 mol/L的抗性淀粉提取率存在显著差异（P<0.05，下同）。这是由于盐酸浓度增加，水解作用加强，酸可以水解破坏淀粉链的结构，淀粉颗粒破裂溶出较多直链淀粉，增加分子间距离，有利于结晶，使抗性淀粉提取率增加，但增加至一定程度后会达到平衡。综合考虑，提取碎米抗性淀粉的最适盐酸浓度为0.5 mol/L。

2. 1. 2 超声波时间对抗性淀粉提取率的影响 由图2可看出，超声波时间从10 min到30 min递变时，碎米抗性淀粉提取率逐渐增加，超声波时间20、25和30 min的抗性淀粉提取率间无显著差异，但三者与超声波时间10和15 min存在显著差异。超声波通过机械断裂和空化效应能破坏和改变淀粉的结构及性质（Iida et al.，2008;Luo et al.，2008;Jambrak et al.，2010），促进分子间聚合形成抗性淀粉。超声波时间对淀粉分子结构也有重要影响，作用时间越长，淀粉颗粒的破坏程度越大（余世锋等，2013）。由于超声波可引发聚合物降解，促使淀粉链断裂，导致抗性淀粉提取率增加。但随作用时间增加，上述作用效应不能无限增加，当作用时间达25 min后，抗性淀粉提取率增加平缓。综合考虑，提取碎米抗性淀粉的最适超声波时间为25 min。

2. 1. 3 酸解时间对抗性淀粉提取率的影响 由图3可看出，酸解时间从0.5 h到2.5 h递变时，抗性淀粉提取率逐渐增加，酸解时间在1.5、2.0和2.5 h时，抗性淀粉提取率间无显著差异，但三者与酸解时间0.5和1.0 h存在显著差异。在酸解过程中，酸解时间能提高抗性淀粉提取率，随着酸解时间的延长，淀粉分子链被充分水解，直链淀粉被游离出来，碎米淀粉能更充分发生脱支化反应，提高碎米抗性淀粉的形成（刘一洋，2010）。但酸解到一定时间后增加平缓，所以选择酸解时间为1.5 h。

2. 1. 4 酶用量对抗性淀粉提取率的影响 从图4可看出，酶用量从2.5 U/g到3.5 U/g递变时，碎米抗性淀粉提取率逐渐增加，在酶用量3.5 U/g时达最大值（50.32%），酶用量从3.5 U/g到4.5 U/g递变时抗性淀粉提取率逐渐降低。酶用量3.0～4.5 U/g的抗性淀粉提取率间无显著差异，但酶用量3.5 U/g的抗性淀粉提取率与酶用量2.5 U/g存在显著差异。由于普鲁兰酶具有很强的脱支活性，能同时在淀粉分子内部和外部随机切开α-1，6糖苷键（余世锋等，2015），当酶用量少时，淀粉切断不完全，黏度大，不利于直链淀粉结晶;酶用量增加，直链淀粉分子数量会增加;普鲁兰酶添加量过高，则因脱支过度而形成过短的直链淀粉，在回生过程中较难聚集重结晶形成抗性淀粉。因此，选择酶用量3.5 U/g为宜。

2. 2 响应面结果分析

2. 2. 1 回归方程及参数分析 从图1～图4可发现，上述4个因素对碎米抗性淀粉的提取率均有显著影响。因此，选择这4个因素为自变量，以抗性淀粉提取率（Y）为考察指标进行响应面试验，结果见表2。通过Design-Expert 8.05对表2的试验结果进行拟合分析，得到二次回归方程：Y=51.99+1.03A+0.93B+0.88C-0.64D-0.55AB+0.58AC-0.73AD+1.12BC+0.56BD+0.52CD-1.25A2-2.28B2-5.24C2-1.60D2。

对回归方程进行方差分析，结果（表3）表明，该回归模型P<0.01，表明二次方程拟合极显著，失拟项P=0.9732>0.05不显著，说明该回归方程对试验拟合情况好，对试验干扰少。根据F大小，各因素对碎米抗性淀粉提取率影响顺序为盐酸浓度（A）>酶用量（B）>酸解时间（C）>超声波时间（D）;根据P变化可知，A、B、C、D、A2、B2、C2、D2和BC对抗性淀粉提取率影响极显著（P<0.01），AD对抗性淀粉提取率影響显著。

2. 2. 2 响应曲面三维图和等高线分析 采用Design-Expert 8.05对表2数据进行回归拟合，并绘制响应面图和等高线图，其结果如图5～图10所示，反映了任意两个变量取零水平时，其他两个自变量之间交互作用对碎米抗性淀粉提取率的影响程度。从拟合的响应面可直观看出各因素间的交互作用，曲面图的陡峭程度代表各因素对抗性淀粉提取率的影响程度;响应面坡度越陡，说明该因素影响较大。从图5～图10可看出，AD和BC响应面坡度较陡，而AB、AC、BD和CD响应面坡度较平缓，说明盐酸浓度与超声波时间、酶用量与酸解时间的交互作用对碎米抗性淀粉提取率影响显著，而盐酸浓度与酶用量、盐酸浓度与酸解时间、酶用量与超声波时间、酸解时间与超声波时间的交互作用对抗性淀粉提取率影响不显著;盐酸浓度响应面的陡峭程度大于酶用量、酸解时间和超声波时间，酶用量的陡峭程度大于酸解时间和超声波时间，酸解时间的陡峭程度大于超声波时间，说明盐酸浓度对抗性淀粉提取率的影响最大，其次为酶用量和酸解时间，超声波时间对抗性淀粉提取率的影响最小，与表3的方差分析结果一致，表明回归模型的可靠性与真实性。

2. 3 提取工艺优化及验证试验结果

采用Design-Expert 8.05对回归模型进行分析，获得最佳工艺参数为：盐酸浓度0.55 mol/L、酶用量3.57 U/g、酸解时间1.56 h、超声波时间23.65 min，碎米抗性淀粉提取率的预测值为52.44%。为实际操作方便，将最佳参数调整为：盐酸浓度0.5 mol/L、酶用量3.5 U/g、酸解时间1.5 h、超声波时间25 min，在此条件下提取率为51.99%，与理论预测值相差0.86%，说明该回归模型用于提取碎米抗性淀粉是可靠的。

3 讨论

抗性淀粉的制备方法主要有压热处理法、酸解脱支法、螺杆挤压法、酶解脱支法、微波膨化处理、超声波辅助法等（杨小玲等，2017）。余世锋等（2015）以大米淀粉为原料，比较了α-淀粉酶、葡萄糖淀粉酶和普鲁兰酶对大米RS3型抗性淀粉得率的影响，结果表明，普鲁兰酶影响最显著，在普鲁兰酶添加量为40 μL/g淀粉、酶解12 h、淀粉浓度20%的条件下，大米RS3型抗性淀粉得率最高为20.57%，但纯酶法提取抗性淀粉的酶用量大，提取成本高，提取率较低。叶文峰和周秀玲（2015）以新鲜脚板薯为主要原料，采用超声波及酸处理粗淀粉制备抗性淀粉，得出制备抗性淀粉的最佳工艺条件：配制浓度为15%的淀粉乳，加入2 mol/L盐酸用量1.5%，在超声波温度80 ℃、超声波时间40 min条件下进行酸水解，制备的抗性淀粉得率为25.3%，但此法盐酸浓度和超声波温度高，抗性淀粉得率低;余世锋等（2013）以大米淀粉为原料，研究了超声处理对大米RS3型抗性淀粉得率的影响，结果表明，在最佳制备工艺条件（超声波功率200 W、超声波时间30 min、淀粉乳浓度60%、糊化温度120 ℃）下，大米RS3型抗性淀粉产率最高为12.87% ，其使用的超声设备是JBT/C-YCL400T/3PD超声波药品处理机，糊化温度高，抗性淀粉提取率低。

本研究以碎米淀粉为原料，通过超声波细胞粉碎仪辅助，采用向淀粉悬浮液中加入普鲁兰酶和盐酸，以抗性淀粉提取率为考察指标，响应面优化抗性淀粉提取条件，在盐酸浓度0.5 mol/L、酶用量3.5 U/g、酸解时间1.5 h、超声波时间25 min条件下得到抗性淀粉提取率为51.99%，较纯酶法（余世锋等，2015）用酶量少，较酸解法（叶文峰和周秀玲，2015）的盐酸浓度低，用时缩短。这是由于超声波空化效应加速溶剂与聚合物分子间的摩擦作用，提高脱支酶的酶解速率和无机盐的降解作用，缩短提取时间，减少酸酶用量，使淀粉水解得到更多游离的直链分子，再通过双螺旋相互缔结，形成高抗性晶体结构，从而提高抗性淀粉提取率。本研究获得的碎米抗性淀粉提取率高于赵力超等（2013）采用压热法获得的抗性淀粉得率（20.1%），说明超声波细胞粉碎仪提取抗性淀粉比压热法优越;相比于姜志杰等（2017）添加磷酸2.0%提取抗性淀粉的得率25.95%高，可能是由于盐酸水解速率强于磷酸。可见，本研究采用超声波细胞粉碎仪辅助酸酶法提取碎米抗性淀粉具有明显优势，酶用量少，盐酸浓度低，超声波时间短，抗性淀粉提取率高等。

4 结论

通过单因素试验和响应面分析法优化的超声波辅助酸酶法（盐酸浓度0.5 mol/L、酶用量3.5 U/g、酸解时间1.5 h、超声波时间25 min）可有效提取碎米抗性淀粉，酶用量少，用时缩短，提取率较高，建立的回归模型能较好地预测碎米抗性淀粉提取率。

参考文献：

陈胜军，刘先进，杨贤庆，李来好，黄卉，李春生. 2018. 酶法提取鲍鱼内脏多糖工艺的优化[J]. 南方农业学报，49（7）：1389-1395. [Chen S J，Liu X J，Yang X Q，Li L H，Huang H，Li C S. 2018. Optimization of enzymatic extraction of visceral polysaccharide from abalone[J]. Journal of Sou-thern Agriculture，49（7）：1389-1395.]

蒋展. 2014. 高抗性淀粉龙口粉丝的评价体系及标准的研究[D]. 济南：济南大学. [Jiang Z. 2014. Study on the eva-luation system and standard of high resistant starch vermicelli[D]. Jinan：University of Jinan.]

姜志杰，潘飞燕，苏立杰，陈樱萌，钟永怡，邱振阳，陈骁熠. 2017. 压热酸解法优化木薯抗性淀粉的制备工艺[J]. 农产品加工，（7）：26-29. [Jiang Z J，Pan F Y，Su L J，Chen Y M，Zhong Y Y，Qiu Z Y，Chen X Y. 2017. The optimal preparation of cassava resistant starch combined with the autoclaving processing and acid hydrolysis method[J]. Farm Products Processing，（7）：26-29.]

刘一洋. 2010. 大米淀粉提取及抗性淀粉的制备及特性研究[D]. 长沙：湖南农业大学. [Liu Y Y. 2010. Rice starch extraction and preparation of resistant starch[D]. Changsha：Hunan Agricultural University.]

许诗尧. 2016. 水热处理大米粉制备抗性淀粉的研究[D]. 武汉：武汉轻工大学. [Xu S Y. 2016. Effects of hydrothermal treatments on preparation of resistant starch with rice powder[D]. Wuhan：Wuhan Polytechnic University.]

杨帆，肖華西，林亲录，张倩，王素艳，罗非君，叶雅. 2018. 超声波—湿热法结合酸水解制备大米抗性淀粉及其理化性质研究[J]. 中国粮油学报，33（7）：43-50. [Yang F，Xiao H X，Lin Q L，Zhang Q，Wang S Y，Luo F J，Ye Y. 2018. Ultrasound-damp heat method combined with acid hydrolysis in preparation of rice resistant starch and its physico-chemical properties[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，33（7）：43-50.]

杨小玲，赵维，陈佑宁，孟小华. 2017. 超声酶解法制备玉米抗性淀粉的结构及性质[J]. 食品研究与开发，38（24）：11-14. [Yang X L，Zhao W，Chen Y N，Meng X H. 2017. Properties and structural characterization of maize resistant starch by ultrasound assisted enzyme method[J]. Food Research and Development，38（24）：11-14.]

叶文峰，周秀玲. 2015. 超声波—酸解法制备脚板薯抗性淀粉的工艺条件[J]. 江苏农业科学，43（7）：281-283. [Ye W F，Zhou X L. 2015. Technological conditions for prepa-ring resistant starch from cassava by ultrasound-acidolysis[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences，43（7）：281-283.]

余世锋，杨庆余，刘军，王强，张永春，郑喜群. 2015. 酶解处理对大米RS3型抗性淀粉产率的影响[J]. 食品工业，36（7）：179-183. [Yu S F，Yang Q Y，Liu J，Wang Q，Zhang Y C，Zheng X Q. 2015. Effects of enzymatic hydrolysis on the yield of rice RS3[J]. Food Industry，36（7）：179-183.]

余世锋，张莹，孙天颖，公莹莹，张永春，葛印，焦岩，郑喜群. 2013. 超声处理对大米RS3型抗性淀粉产率的影响[J]. 食品科技，38（3）：134-138. [Yu S F，Zhang Y，Sun T Y，Gong Y Y，Zhang Y C，Ge Y，Jiao Y，Zheng X Q. 2013. Effects of ultrasonic treatment on the yield of rice RS3[J]. Food Science and Technology，38（3）：134-138.]

张志英，沈建福. 2005. 抗性淀粉最新研究进展[J]. 粮油食品科技，13（4）：29-31. [Zhang Z Y，Shen J F. 2005. The recent research development on resistant starch[J]. Science and Technology of Cereals，Oils and Foods，13（4）：29-31.]

赵力超，于荣，刘欣，周爱梅，曹庸. 2013. 大米抗性淀粉制备工艺优化及特性分析[J]. 农业工程学报，29（12）：277-285. [Zhao L C，Yu R，Liu X，Zhou A M，Cao Y. 2013. Preparation technology optimization and characteristic analysis of rice resistance starch[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering，29（12）：277-285.]

周颖，章萍萍，孟少华，王勇，袁怀波. 2014. 大米抗性淀粉双酶制备及其结构表征[J]. 中国粮油学报，29（2）：22-25. [Zhou Y，Zhang P P，Meng S H，Wang Y，Yuan H B. 2014. Preparation and structural characterization of resistant starch from rice by dual enzyme method[J]. Journal of the Chinese Cereals and Oils Association，29（2）：22-25.]

Iida Y，Tuziuti T，Yasui K，Towata A，Kozuka T. 2008. Control of viscosity in starch and polysaccharide solutions with ultrasound after gelatinization[J]. Innovative Food Science & Emerging Technologies，9（2）：140-146.

Jambrak A R，Herceg Z，Subaric D，Babić J，Brnčić M，Brnčić S R，Bosiljkov T，Čvek D，Tripalo B，Gelo J. 2010. Ultrasound effect on physical properties of corn starch[J]. Carbohydrate Polymers，79（1）：91-100.

Jeong O，Shin M. 2018. Preparation and stability of resistant starch nanoparticles，using acid hydrolysis and cross-lin-king of waxy rice starch[J]. Food Chemistry，256：77-84.

Luo Z G，Fu X，He X W，Luo F X. 2008. Effect of ultrasonic treatment on the physicochemical properties of maize starches differing in amylose content[J]. Starch-Starke，60（11）：646-653.

Topping D L，Clifton P M. 2001. Short-chain fatty acids and human colonic function：Roles of resistant starch and nonstarch polysaccharides[J]. Physiological Reviews，81（3）：1031-1064.

（責任编辑 罗 丽）