羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的影响*

郑红波

（沈阳药科大学，辽宁 沈阳 110016）

近几年，食用菌发展较为迅速，目前大概有350多种供人类食用，食用菌指的是实体硕大，可以食用的大型真菌，常见的食用菌主要包括木耳、香菇、银耳、蘑菇、松茸、虫草、松露等，而羊肚菌是其中一种较为珍贵的食用菌，主要是因为该菌菇表面形状与羊肚相似，并且凹凸不平，固将其称为羊肚菌[1]。同时，羊肚菌还被称为草笠竹，还具备药用的功效，可以改善痰壅气逆喘咳、脘腹胀满、食积气滞等[2]。羊肚菌一般生长在经历过山火的山上，从而产量较为稀少，故此而变得比较珍贵。另外，羊肚菌胞内具有多糖类物质，其具有抗肿瘤、抗疲劳、抗菌、增强免疫力等特性，可以对生物体运动心肌损伤产生一定的影响[2]。为了证明羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的具体影响，设计试验就羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的影响进行相应的分析[4]。

1 材料与方法

1.1 试验材料

针对羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的影响进行相应的分析，首先采用乙醇对羊肚菌内的多糖进行相应的提取，得知羊肚菌多糖主要是由摩尔比1∶1.059的甘露糖与半乳糖组成。将提取得到的羊肚菌多糖调制成一定的浓度，作为试验的主要材料[5]。

1.2 试验对象

利用100只患有运动心肌损伤的昆明小鼠，保证小鼠的体质重量为（20±2）g，雌性小鼠与雄性小鼠的数量比为1∶1，并且保证小鼠有同等级别的运动心肌损伤疾病。

1.3 试验方法

将试验对象小鼠根据雌、雄进行正比例分配，分为A组与B组，均分别含有25只雌小鼠、25只雄小鼠。

A组：在试验前4周对该组的小鼠口服安慰剂，剂量为1 g·d-1。安慰剂主要是由糊精装入空胶囊内构成，安慰剂对小鼠不存在任何功能。

B组：在试验前4周对该组的小鼠口服多糖肠溶胶丸，剂量也为1 g·d-1。多糖主要是通过乙醇在羊肚菌胞内提取而来，性状为深褐色粉末，将其装入胶囊，投喂给小鼠。

将上述服用了4周安慰剂与多糖胶囊的两组小鼠进行一次大强度运动，以此来验证羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的影响[6]。具体的运动试验如下所示。

首先，在正式运动试验前，使A组、B组小鼠在无坡度、速度为5 m·h-1的跑台上进行短时间的适应性运动，然后进行同等时间的休息。其次，进行正式运动。运动方法为：设定跑台坡度为零，起始速度为5 m·h-1，随着时间的增加，不断增加跑台的速度，加速度为1/3 m ·h-1，当速度增加到15 m·h-1或者小鼠的心率维持在170 bpm以上时，加速度设置为0，并稳定跑台速度，在这样的运动强度下，每隔3 min对小鼠的RPE等级进行测量，同时对小鼠的心率进行全程的监控[7]。当小鼠心率在180 bpm以上，RPE等级在19～20范围内，小鼠出现呼吸困难，运动动作不协调，不能坚持运动时，终止运动试验。最后，在运动试验的过程中需要注意的是，在运动前以及服药期间小鼠必须保证正常的饮食与作息，在正式运动试验前72 h小鼠不能进行剧烈的运动[8]。

为了对小鼠运动心肌损伤的影响进行分析，对小鼠的相关数据进行相应的采集。

1.4 检测指标与检测方法

为了验证羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的影响，对小鼠心肌损伤恢复蛋白T浓度进行检测，利用相关的公式对心肌损伤恢复率进行计算[7]。

心肌损伤恢复蛋白T主要存在于心肌原纤维丝中，主要采用目前最先进的第三代检测技术ECLIA法对其进行检测与测定。在检测过程中采用的试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，测定仪器为FT-630+探头微机γ仪[9-11]。

1.5 统计学处理

检测指标数据一致采用平均值±标准差，即以x±s形式对数据进行相应的表示，采用SPSS 18. 0软件对检测数据进行统计与分析。对于同一时间的两组数据之间主要通过独立t检验进行比较与分析，差异显著性标准为P<0.05，当P<0.01时认为数据之间具有极显著差异[12-14]。

2 结果与分析

为了验证羊肚菌胞内多糖对小鼠运动心肌损伤的具体影响，分别在羊肚菌胞内多糖浓度为20%、40%、80%的情况下进行运动试验，然后分别对试验结果进行相应的分析，对结果进行统计，得到试验结论。

小鼠心肌损伤的恢复主要由心肌损伤恢复率来体现。因此，在试验过程中，主要观察小鼠心肌损伤恢复率的变化。心肌损伤恢复率主要由心肌损伤恢复蛋白T来决定。一般情况下，心肌损伤恢复蛋白T的浓度越高，则表示心肌损伤恢复率越大。

心肌损伤恢复蛋白T主要存在于心肌原纤维丝中，用于心肌损伤的恢复。该指标被美国心脏协会认定为判断急性心肌梗死的标准指标，健康动物血液中心肌损伤恢复蛋白T的含量应该较低。具体的试验结果如下。

2.1 20%多糖浓度对心肌损伤的影响分析

当多糖浓度为20%时，通过运动试验得到两组小鼠运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况见表1。

表1 运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况Tab.1 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表1可知，A、B两组小鼠在运动前的心肌损伤恢复蛋白T浓度值没有明显的差异，但是经过运动试验后，A、B两组小鼠的心肌损伤恢复蛋白T浓度值显著性增加，其中，A组P<0.01，表示运动试验后小鼠的心肌损伤恢复蛋白T浓度值得到了显著性的增加；B组P<0.05，也表示小鼠的心肌损伤恢复蛋白T浓度得到了显著增加。

在运动试验过程中，A组10号小鼠运动前心肌损伤恢复蛋白T浓度为0.05 ng·mL-1，运动后心肌损伤恢复蛋白T浓度为0.16 ng·mL-1，超出了心肌损伤恢复蛋白T浓度度的标准水平，对于此类数据，将其判定为异常数据，并且不对其进行统计分析。

通过计算得到当多糖浓度为20%时，B组小鼠心肌损伤恢复率为23.26%。说明多糖浓度为20%时，其对小鼠运动心肌损伤恢复具有一定的促进作用，但是促进作用不太明显。

2.2 40%多糖浓度对心肌损伤的影响分析

当多糖浓度为40%时，通过运动试验得到两组小鼠运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况见表2。

表2 运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况Tab.2 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表2可知，运动前B组小鼠心肌损伤恢复蛋白T浓度与A组相同，两组之间并无统计学差异；随着运动试验的进行，时间与运动强度的增加，两组小鼠运动后心肌损伤恢复蛋白T浓度均得到了增长，B组小鼠心肌损伤恢复蛋白T浓度明显高于A组。

通过计算得到当多糖浓度为40%时，B组小鼠心肌损伤恢复率为45.21%。说明多糖浓度为40%时，其对小鼠运动心肌损伤恢复具有较大的促进作用。

2.3 80%多糖浓度对心肌损伤的影响分析

当多糖浓度为80%时，通过运动试验得到两组小鼠运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况见表3。

表3 运动前后心肌损伤恢复蛋白T浓度变化情况Tab.3 Changes of cardiac troponin T concentration before and after exercise

由表3可知，运动前B组小鼠心肌损伤恢复蛋白T浓度与A组相近，2组之间并无统计学差异；随着运动试验的进行，时间与运动强度的增加，两组小鼠运动后心肌损伤恢复蛋白T浓度均得到了增长，B组小鼠心肌损伤恢复蛋白T浓度明显高于A组。

通过计算得到当多糖浓度为40%时，B组小鼠心肌损伤恢复率为68. 94%。说明多糖浓度为40%时，其对小鼠运动心肌损伤恢复具有极大的促进作用。

2.4 试验结果对比

将上述的试验结果进行整合，得到B组试验对比情况见图1。

图1 试验结果多糖浓度对比Fig.1 Comparison of polysaccharide concentration

由图1可知，随着投喂多糖胶囊浓度的增加，B组小鼠运动后心肌损伤恢复蛋白T浓度也越来越高，得到的心肌损伤恢复率也越来越大，其对小鼠运动心肌损伤恢复的促进作用也就越大。说明羊肚菌胞内多糖浓度越大，其对小鼠运动心肌损伤恢复的促进作用越大。

3 结语

心肌是生物体的重要组成部分，从试验结果可以看出，随着羊肚菌胞内多糖浓度的增加，小鼠运动后心肌损伤恢复蛋白T浓度也越来越高，得到的心肌损伤恢复率也越来越大，其对小鼠运动心肌损伤恢复的促进作用也就越大。因此，对羊肚菌胞内多糖的作用进行详细验证，若是羊肚菌胞内多糖的作用是有利的，可以采用羊肚菌胞内多糖对运动心肌损伤进行治疗。