香菇中抗氧化成分对消除自由基的效果研究*

张小蒙，孙 玲，李 凤

（江苏医药职业学院 药学院, 江苏 盐城 224005）

食用菌是一类可供食用的大型真菌类植物，其中富含人体所需的大量氨基酸及蛋白质、脂肪、微量元素等，不仅具有较高的药用价值，还是很好的营养保健食材。在对人体癌细胞、肿瘤、病毒等具有抑制作用，增强人们身体素质增强免疫力。有研究结果表明，香菇中的多糖及部分糖蛋白分子对人体中的活性物质进行干扰，激发人体免疫功能，从而提高人体抗肿瘤、抗癌、降“三高”等功效。随着科研技术的深入，香菇中的营养成分及药用性能逐渐被开发，广泛用于制药及保健品的制作中，例如香菇多糖、金针菇多糖及灵芝多糖等，对抗氧化具有显著效果。

超氧化物歧化酶（SOD）作为小鼠体内含量最多的抗氧化酶，可通过清除自由基有效避免体内自由基过多导致的细胞氧化。丙二醛（MDA）则表示体内细胞遭受自由基氧化的程度。两者存在较大差别，在实际进行机体抗氧化能力检测时，通常需对二者进行联合检测。因小鼠繁殖能力较强，以小鼠为试验对象，试验效果较为显著，并且小鼠与人同为哺乳动物，通过香菇对小鼠抗氧化的研究，对人而言，具有较高的参考价值。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

香菇粉、80只清洁度为ICR的雄性小鼠；足量的硫酸、浓硫酸、苦味酸、生理盐水、肌糖元测定试剂盒、肝糖元测定试剂盒、丙二醛测定试剂盒、肌糖原测定试剂盒、甘肽过氧化物酶测定试剂盒、磷酸激酶测定试剂盒、超氧化物歧化酶测定试剂盒。

1.2 试验方法

购入的小鼠因采取适应性饲养7 d左右，按照小鼠体重差异分为4个试验小组，每组小鼠20只，一笼安置6只小鼠，对同组小鼠以方差分析法进行统计，以防止小鼠间的体重差异。用含量为5%的苦味酸对每组小鼠进行涂抹标记，头部1号，左前腿标记为2号，左后腿标记为3号，尾巴部分标记为4号，右前腿标记为5号，右后腿标记为6号。在饲养方面以自由饮食喂养，以相同饲料及白开水为基础。在试验过程中室温保持恒温26℃，室内湿度保持在55%，每天在日光与暗室中分别放置12 h，每天早上08∶00，按照不同剂量的香菇粉及生理盐水溶液混合后，对每组试验小鼠分别以灌胃的方式进行喂养，对照组只喂养相等质量的生理盐水，不添加任何物质，持续进行28 d。在试验中对鼠笼每日换水及时更换鼠垫。详细记录每天小鼠体重的变化情况，饮水、饮药、饲料消耗量的生活情况。

为保证各组小鼠的机体性能区域一致，每组小鼠按照此方式正常养殖28 d，在最后5 d以每天15 min的游泳进行适应性训练，在规格大小为1 m2，水深35 cm的铁质泳池中进行，水温保持在26℃，正负温差不超过2℃，小鼠密度以50 cm2为宜进行对比试验。

试验方法为： 用相同长度棉线系上金属铁丝环，离小鼠尾部2 cm～3 cm为宜；用已经连续采取灌胃法饲养4周的小鼠，剩下的10只小鼠进行最后灌胃，在最后1次灌胃30 min后，把小鼠放入泳池中进行负重游泳50 min，游泳结束后捞出，等到捞出的小鼠休息20 min后，采取小鼠眼眶内血液进行化验，将小鼠眼眶内的血液放置于室温恒定的化验器材内静置30 min使其血液凝固，在以每分钟3 000 r·min-1的速度冷冻分离15 min，在小鼠血液分离的血清样本中，储存在零下20℃待用。其中小鼠体内SOD活性、 MDA含量的测定都按照试剂盒中的说明书进行操作， 采用PASW statistics 18软件进行试验数据的统计，其中平均值±标准差（X±SD）表示，以t为显著性检验表示，显著性水平以P＜0.05。

2 试验结果

2.1 不同剂量香菇干粉对小鼠饲料食用量的影响

连续28 d对各香菇试验组内的小鼠喂食低、中、高剂量的香菇干粉。同时，生理盐水对照组与各香菇试验组小鼠每天的饲料喂食量需保持一致。排除浪费的饲料量，记录每天各组中小鼠的饲料食用量，并提取其中第1天、第14天、第28天的数据，结果见表1。

表1 各组小鼠的饲料食用量Tab.1 Feed consumption of mice in each group

由表1可知，各组中小鼠每天的进食量并无明显差异，即不同剂量的香菇干粉均未对小鼠的食量产生明显影响。

2.2 不同剂量香菇干粉对SOD活性的影响

通过连续28 d对小鼠喂食不同剂量的香菇干粉，并检测各小鼠体内SOD的活力，与对照组进行比较，具体数据见表2。

表2 不同剂量香菇干粉对超氧化物歧化酶活性的影响Tab.2 Effect of different treatment of dried Lentinus edodes on the activity of superoxide dismutase

由表2可知，3种不同剂量的香菇干粉试验组小鼠体内SOD的活性均明显高于生理盐水对照组，且剂量为2.1 g·kg-1最为显著。经过显著性水平计算后得出以下结论：各剂量下的香菇干粉试验组均可极为显著地提高血清中SOD的活性；仅高剂量的香菇干粉试验组可在一定程度上提高脑中SOD的活性；此外，通过对肝脏中SOD的活性分析发现，中剂量的香菇干粉便可对SOD活性产生一定的促进作用，而高剂量的香菇干粉将极为显著地提高SOD活性。

2.3 不同剂量香菇干粉对丙二醛（MDA）含量的影响

连续喂食28 d不同剂量香菇干粉及对照组的小鼠体内MDA的含量，主要检测部位包括小鼠的血清、脑及肝脏，结果见表3。

表3 不同剂量香菇干粉对MDA含量的影响Tab.3 Effect of different treatment of dried Lentinus edodes on content

由表3可知，与对照组相比，从摄入中等剂量的香菇干粉开始，血清及脑中的MDA含量便开始逐渐降低，当摄入高剂量的香菇干粉时，MDA的含量将呈现出较大幅度的降低；而对于肝脏而言，当摄入中等剂量的香菇干粉开始，其MDA含量便可产生极为显著降低。香菇干粉剂量达到2.1 g·kg-1时，可显著降低机体MDA含量，即香菇可较好的降低体内细胞的氧化程度。

3 结语

自由基具有攻击生物分子的功能，较高的氧化水平，会发生超氧化化学反应，从而破坏细胞作用及其组织。当自由基清除能力由于其他因素而减小或增大时，也会破坏自由基的组成。许多人体与动物试验表明，疲劳运动会使身体形成很多自由基，提高脂质过氧化水平，从而发生运动倦怠的现象，更严重的则会引发多种疾病。过量的形成自由基已超过机体的抗氧化水平，MDA成分大幅度增多，导致SOD、GSH-px的活性大幅度减小，削弱了机体抗氧化水平。自由基导致的运动倦怠与人体病理变化、脂质过氧化紧密相关。

对动物试验进行研究，分析了香菇的抗氧化水平，研究了香菇对小鼠抗氧化水平的作用与影响。试验结果表明：灌洗后4周，采用不相同剂量的香菇，低、中、高剂量组可以在一定程度上增加SOD的活性，提升肝脏与血清中的氧化酶活性，减少大脑、肝脏与血清中的MDA成分。表明了香菇采用提升身体的总抗氧化水平，除去体内形成大量的自由基，并提高分解有害成分的化学反应速率，更好地预防或避免机体由于自由基引起的氧化损害，具有抗氧化的功效。