鸽圆环状病毒感染诊断与控制

陆雨楠　陈俊红　陈羽　朱秋阳　曹彬彬　陈瑾　戴鼎震

摘要：鸽圆环病毒感染严重损害青年鸽的健康，严重损伤鸽的经济价值，影响赛鸽和肉鸽的培育和饲养。该文针对鸽圆环病毒的临床症状和诊断方法开展具体研究，得出相关结论和结果，并提出预防和控制方法。

关键词：鸽;鸽圆环病毒;临床症状;诊断方法;预防和控制

中图分类号：S858.39

文献标识码：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.15.068

基金项目：江苏省大学生创新训练重点项目（ 2018135730132）

作者简介：陆雨楠（1997-），女，江苏南通人，硕士研究生，主要从事兽医学研究工作。

通信作者：戴鼎震（1964-），男，江苏兴化人，博士，主要从事预防兽医学及中兽医研究工作。

0引言

鸽圆环病毒最早被发现是在1993年的美国，在其后加拿大、澳大利亚、英国、法国、意大利、比利时和美国等国家相继发现并进行报道。浙江省是中国最早发现鸽圆环病毒感染的地方，余旭平等对此次发现的鸽圆环病毒基因组结构进行了分析。鴿圆环状病毒感染（ pigeon clrcovlrus infection，PCI）是一种以侵害2～12月龄青年鸽为主的传染性疾病，本身不致死，但由继发感染引起的死亡率可高达100%。该病毒主要引起严重的免疫抑制，导致机体对病毒、细菌、真菌和寄生虫等各种病原体应答不足，进而引起严重的复发性感染，并表现出相应的临床症状，严重时可致死亡。

1 鸽圆环病毒基因组

鸽圆环病毒（ Pigeon circovlrus，PiCV）结构为球体，没有囊膜，直径为15～18 nm，且二十面体对称。PiCV是一种DNA病毒，其基因组为单股负链环状，大小为2.0 kb，是目前已知最小的一种无囊膜、单股负链环状DNA病毒。PiCV有5个主要的开放阅读框（Open Reading Frame，ORF），分别为V1、C1、C2、5’基因间区域和3’基因间区域。编码复制相关的蛋白（ Rep），ORF V1以AGT为起始密码子，由316个左右的氨基酸组成，分离株的Rep蛋白氨基酸序列同源性较高，为91.5% ～99. 1%。互补链上的ORF Cl起始密码子为ATG/ATA，主要用于编码壳蛋白（ Cap），由270、273或274不等的氨基酸组成，其所分离病毒的Cap蛋白氨基酸序列同源性较分散，为73.0% ～ 99.3%，Cap蛋白抗原性良好。ORF C2与CI-样在互补链上，其主要的功能还未发现。5’基因间区域在ORFV1和ORF V2的起始密码子之间，存在茎环结构，茎环的九碱基序列（ TAGTATTAC）是高度保守序列，八碱基序列（ GGAGCCAC）在下游是重复保守序列。3’基因间区域在ORF V1和ORF V2终止密码子之间，长170 nm。

2流行病学

PiCV通常感染1岁以下的青年鸽，成年鸽感染现象并不明显，且主要侵害鸽的免疫系统。目前，世界各地有关于PiCV传播的报道和相关的研究资料较少，已有的研究报道和发表的相关文章表明经口摄入病原可能是引起PiCV的主要途径，同样也有证据表明禽类的蛋也可以做为PiCV传播的1种途径。对鸽圆环病毒的传播方式研究结果表明，除通过繁育垂直传播，如禽蛋，还可以水平传播，如排泄。

圆环病毒感染多发生于包括鸽在内的禽鸟类，且青年和幼龄禽鸟较多（金丝雀、鹅、鹦鹉鹉、南方黑背鸥、梅花雀、鸵鸟）。鹦鹉喙羽病是鸟类感染圆环病毒感染后研究最全面的。

3临床症状

从临床试验分析，圆环病毒病感染的发病率高，但死亡率低，圆环病毒主要侵害免疫器官，本身不致死，其总体死亡率取决于继发感染的轻重情况，实际死亡率为1% ～100%。

鸽圆环病毒感染没有非常明显的具有特征性临床症状，其临床症状与其发生的继发感染有直接关系，通常临床症状表现为精神委顿、呼吸困难、食欲减退、体重减轻、腹泻等消耗性症状。其临床典型症状包括眼砂变淡，可视黏膜如喙、口、咽等处黏膜，颜色苍白，有时也会出现羽毛渐进性营养不良而大量脱落秃毛和喙变形。因此，临床症状和继发感染的病原比较相关。

4病理变化

法氏囊萎缩是感染圆环病毒的禽类，在解剖时唯一常见、肉眼可见的病变，但不是所有感染禽类都有发生，其他肉眼病变和继发感染有直接联系。组织学检查发现免疫相关器官衰竭和淋巴细胞坏死，如法氏囊、肝脏等，禽类的免疫器官以法氏囊为主，法氏囊萎缩是最明显的病变。慢性肠炎、坏死性喉气管炎、慢性支气管炎、坏死性肠炎、纤维素性肺泡炎、肝炎等病变也可在感染鸽身上观察到，主要与继发感染相关。5诊断

（1） DNA探针原位杂交法：相较于其他方法，原位杂交法是最准确的诊断方法。其PiCV检出率可高达8g%，运用常规的组织学方法检测，检出率为66%。同时对于常规镜检不明显的，鸽的非免疫相关器官组织，如肺脏、肾脏、大小肠、胰脏、嗉囊等组织器官中同样能检测出PiCV。对于自然感染的病鸽也可用此方法在多种组织（如法氏囊、脾、胸腺、肾和肝）中检测出PiCV。多数PiCV感染是呈亚临床型，与免疫抑制的程度有关，因此从临床与病理学正常的鸽中也可检测到圆环病毒的存在。在成年鸽身上有时也可检测到PiCV，因为PiCV会大量消耗T细胞和B细胞群，进而严重阻碍宿主对病毒感染的应答反应，导致病程延长。

（2）聚合酶链式反应法（PCR）：是目前较为常见的检测鸽圆环状病毒的分子生物学方法，它的特点是特异性高、快捷。聚合酶链式反应的目的是对PiCV扩增。通过温度变化控制病毒基因的变性和复性，并针对PiCV设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP等材料完成对PiCV扩增。对PCR产物分析，可深入了解鸽圆环病毒的特异性基因片段，有利于认识鸽圆环病毒特异性和遗传特性。对鸽圆环病毒全基因序列分析，可掌握鸽圆环病毒的变异和发展，深入了解鸽圆环病毒，对检测病原和疾病预防有极为重要的意义。

（3）斑點杂交法：将PiCV变性后固定在硝酸纤维素膜上，用已标记的探针进行杂交，运用放射自显影技术进行病毒检测。斑点杂交法检测鸽圆环病毒非常方便和快捷，已有的研究表明其检出率为63%。

上述方法中，最为准确的诊断方法为原位杂交法。由于病毒可从临床上表现正常的鸽分离到，许多感染可能呈亚临床表现，因此无论是PCR检测还是斑点杂交法，都必须结合原位杂交才能进行确诊。随着研究技术和检测技术的不断发展，各种检测技术和研究手段使得探索鸽圆环病毒的特性成为可能。

6结束语

鸽圆环病毒病没有有效的特异性、针对性的治疗方法，且还未开发出合适的疫苗进行预防，合理的喂养及严格的饲养管理至关重要。由于大多数感染鸽主要死于免疫力低下导致的继发感染，因此临床上诊断和治疗必须针对相应的症状和继发感染的病原进行。

参考文献

[1]余旭平，竺春，郑新添，等.鸽圆环病毒浙江株全基因组的克隆及序列分析[J].病毒学报，2009，25 （5）：355-361.

[2]张勇.鸽圆环病毒病防治[J].四川畜牧兽医，2016，43（9）：53.

[3]栗文文，袁海霞，徐雅萍，等.鸽圆环病毒研究进展[J].中国畜牧兽医，2011，38（8）：236-238.

[4]孙兴臣，熊晓妍，李敏婕，等.一株赛鸽源鸽圆环病毒全基因克隆与序列分析[J].病毒学报，2017，33 （5）：720-727.

[5] Todd D. Avian circovirus diseases： lessons for the study of PMWS[J]. Veterinary Microbiology， 2004. 98（2）：169-174.

[6] Smyth J A， Weston J，Moffett D A. et al. Detection of circovirus infection in pigeons by in situ hybridization using cloned DNA probes. [J]. Journal of Veterinary Diagnostic Investigation， 2001. 13（ 6）： 475-482.

[7] Abadie J，Nguyen F，Groizeleau C，et al.Pigeon circovirus infection： pathological observations and suggested pathogenesis.[J]. Avian pathology： journal of the W.V.P.A. 2001，30（2）：149-158.