UPLC法测定醋酸阿托西班注射液含量

陈鸿英 王燕玲

摘要：目的 建立测定醋酸阿托西班注射液含量的UPLC法并进行方法学验证。方法 色谱条件：以0.05mol/L的磷酸盐缓冲液pH2.3为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；进样量2μl，流速0.4ml/min，检测波长215nm。结果：在0.75～2.25μg范围内与主峰面积呈良好的线性关系（R2=0.9999）；空白溶剂对该法无干扰；重复性RSD为0.1%，中间精密度RSD为0.2%；溶液稳定性实验RSD为0.3%；不同加标量的平均回收率为100.10%；耐用性实验结果显示各条件检测结果RSD在1.0%以内；采用HPLC与UPLC对3批样品的含量测定进行对比，两法相对偏差均未超过0.5%。结论 UPLC法快速、简便、准确、专属性强，适用于醋酸阿托西班注射液含量测定。

关键词 醋酸阿托西班注射液 UPLC 含量

【中图分类号】186.3 【文献标识码】A 【文章编号】2107-2306（2019）02-135-02

Abstract： Objective Establish the UPLC method for assay of Atosiban Acetate Injection and carry out the methodology validation. Method Chromatographic Conditions： 0.05 mol/L phosphate buffer solution pH 2.3 was used as mobile phase A and acetonitrile was used as mobile phase B to carry out the gradient elution. Injection volume was 2 μl. Flow rate was 0.4 ml/min. Detection wavelength was 215 nm. Results： There was a good linear relationship with the area of the principal peak within the range of 0.75～2.25 μg （R2=0.9999）. The blank solvent had no interference with this method. The RSD of repeatability was 0.1%， the RSD of the intermediate precision was 0.2%， and RSD of the solution stability test was 0.3%. The average recovery rate of different spike quantities was 100.10%. The robustness results revealed that the RSD of the test results under different conditions was within 1.0%. HPLC and UPLC were adopted to compare the assay of 3 batches of sample， and the relative deviations of the two methods were both not more than 0.5%. Conclusions UPLC method was rapid， simple and convenient， accurate and had strong specificity， and it was suitable for assay of Atosiban Acetate Injection.

Key Words；Atosiban Acetate Injection ；UPLC； Content

引言

醋酸阿托西班是催产素拮抗剂，代表一种新的抗分娩药【1】。醋酸阿托西班注射液能有效抑制宫缩，无明显副作用，是治疗先兆早产有效而安全的方法。【2】目前国内采用HPLC测定其含量和有关物质，其方法检测时间长，化学试剂用量大，本文参照HPLC含量测定方法建立其含量UPLC测定法。

1 材料

【样品与对照品】醋酸阿托西班注射液（20180602、20180603、20180701），工作对照品（S01820171101）海南中和药业股份有限公司制。

【主要试剂及仪器】CQUITY UPLC H-Class型超高效液相色谱仪，ACQ TUV 紫外检测器；waters C18 2.1 x 50 mm，1.7um色谱柱；磷酸二氢钾（广州化学试剂厂 AR）、磷酸（成都市科隆化学品有限公司2017060501、AR）、三乙胺（西陇化工股份有限公司110722、AR）、乙腈（上海星要可高纯溶剂有限公司011471201、色谱纯）

【色谱条件】以0.05mol/L的磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，加水1000ml，用磷酸调pH至2.3，再加入120μl三乙胺，即得）为流动相A，乙腈为流动相B，线性梯度洗脱；流速为0.4ml/min；检测波长为215nm。同时精密称取醋酸阿托西班对照品和杂质A对照品适量，加流动相A溶解并制成每1ml分别含醋酸阿托西班和杂质A约0.5mg的混合溶液，作为系统适应性溶液；精密量取2μl注入液相色谱仪。阿托西班峰与杂质A峰的分离度应不少于2.0，理论塔板数按阿托西班峰计算应不低于5000。

2 方法与结果

【系统适用性实验】称取醋酸阿托西班对照品和杂质A对照品适量，加流动相A溶解并制成每1ml中分别含醋酸阿托西班和杂质A约0.5mg的混合溶液，作为系统适应性溶液。实验结果显示分离度为3.1，理论塔板数为16885。

【专属性】配制空白溶剂、空白辅料溶液、对照品溶液与供试品溶液，进行辅料干扰分析。结果显示，空白溶剂与空白辅料在该条件下无吸收峰，对本法无干扰，方法专属性良好。

【重复性、中间精密度试验】结果显示重复性RSD值为0.1%，中间精密度RSD值为0.2%。

【线性实验】制备含量为0.75mg/ml 的对照品溶液，分别精密量取0、1、1.5、2、2.5、3μl进样，以主峰峰面积A为纵坐标，进样体积（μl）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=1949417x-160684，相关系数为R2=0.999，表明，在进样量为0.75～2.25μg范围内与主峰面积呈良好的线性关系。

【准确度试验】在空白辅料中加入对照品制成加标对照品约为0.6mg/ml、0.75mg/ml、0.9mg/ml的溶液各三份，计算回收率。回收率分别为99.92%、100.53%、99.86%，平均回收率为100.10%，表明方法准确度高。

【溶液稳定性试验】取供试品溶液，于第0、2、4、8、12小时进样，进样5次，计算峰积RSD值。结果显示RSD为0.3%，表明样品溶解后在12小时内稳定性良好。

【耐用性试验】结果显示RSD均在1.0%以内，表明当色谱柱、流速、柱温等条件发生微小变化时对含量测定结果无影响。

【UPLC法與HPLC法对比试验】结果表明，相对偏差均未超过0.5%，该方法与HPLC法的测定结果一致性良好。

3 讨论

UPLC分析方法是一种高效、快捷的检测方法，比HPLC法在检测时间上节省80%，检出能力与HPLC法一致。方法验证结果表明，该法是一种准确、可靠的测定方法。

参与文献

[1]姚志勇，李新宇，支钦.醋酸阿托西班注射液的处方工艺开发[J]. 中国当代医药， 2014（28）.

[2]朱国栋.阿托西班及弥新平用于早产儿的治疗.世界核心医学期刊文摘妇产科学分册，2006 ，（ 2）： 58.