肉制品中人工合成着色剂的测定

2019-09-10张红芬周刚

科学导报·学术 2019年21期

张红芬周刚

摘要：目的建立固相萃取高效液相色谱同时测定肉制品中柠檬黄、新红、胭脂红、苋菜红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红8种合成色素。方法样品采用乙醇-乙腈-甲醇-氨水=30：30：30：10提取，阴离子固相萃取小柱净化，经Inspire C18色谱柱分离，乙腈和 0.02 mol/L乙酸铵为流动相梯度洗脱，流速1.0mL/min。采用二极管阵列检测器，采集254nm色谱合成图进行外标法定量，并通过与对照品的光谱比对进行确证。结果 8种合成色素在30min内可有效分离，平均回收率为80.3%～98.0%，。结论该方法前处理简单、检测快速、回收率满意且重复性好，可作为肉制品中8种合成色素的检测方法。

关键词：肉制品;固相萃取;色素

食用合成着色剂简称合成色素，为增进人们的食欲，保持食品色泽鲜艳而添加的非营养成分，多以煤焦油中提煉出的苯胺染料为原料研制而成，有含R-N=N-R键、苯环或氧杂蒽等结构[1-3]。合成色素色泽鲜艳、用量少、性质稳定、易着色，且价格相对便宜，但超标、超范围等不规范使用则会造成人体被动的摄入过量的食用合成色素，导致出现嗳气、偏头痛、多种过敏症状以及中毒等症状，更有甚者造成致癌、致畸、致突变等危害。目前食品合成色素的检测主要参照国标GB/T5009.35-2003《食品中合成着色的测定》[4]、GB/T5009.141-2003《食品中诱惑红的测定》[5]、SN/T1743-2006《食品中的诱惑红、酸性红、亮蓝、日落黄的含量检测》[6]需采用多个液相系统才能完成对8合成色素的检测，且样品前处理较复杂，检测耗时长。文献报道[7-8]的这些检测方法多是针对这些人工合成色素中的一种或几种，而没有关于这8种人工合成色素在肉制品中同时检测的报道。并且这些检测方法的样品净化过程一般都采用聚酰胺吸附法或是液液萃取法（赤藓红）等，这些前处理方法具有操作环境差、操作费时繁琐、回收率低等特点。鉴于此，本方案采用ProElut PWA固相萃取小柱对样品进行前处理，对8种常见的合成色素进行检测。

一、本方案适用范围

本方案适用于肉肠（不含淀粉或含淀粉较少的火腿肠）中人工合成着色剂的检测。同样适用于其他熟食类样品中色素的测定。

二、样品提取

（1）取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液

（2）取下层残留物，加入10 mL提取液A，振荡2 min，超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液;

（3）将下层残留物用10mL提取液A按照步骤（2）重复提取一次，合并三次上清液;

（4）将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约3 mL，再加入2 mL水混匀，用甲酸调pH至5.0左右，待净化。

备注：提取液A：乙醇-乙腈-甲醇-氨水=30：30：30：10

三、固相萃取柱净化

1）活化：依次用5 mL甲醇、5 mL水活化固相萃取柱;

2）上样：加入待净化液，弃去流出液;

3）淋洗：依次加入5 mL2%甲酸水溶液、5 mL水、5 mL甲醇，弃去流出液，真空泵抽干2min;