慢性乙型肝炎病毒感染患者血清IL-33、sST2、MCP-1水平变化及其临床意义

李劲　骆仲榆　陈刘镇　林沛基

[摘要] 目的 探討慢性乙型肝炎病毒感染患者血清白细胞介素-33（IL-33）及其受体可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）与单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）表达水平变化，并分析其临床意义。 方法 选取2017年1月～2018年1月广东省东莞市人民医院收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者作为观察组，其中单纯慢性乙肝患者67例（慢性乙肝组），合并肝衰竭38例（肝衰竭组），同期选择50名无肝脏疾病的健康志愿者作为对照组。分别测定各组血清IL-33、sST2以及MCP-1水平，并根据Ishak病理评分对慢性乙肝组患者的肝纤维化程度进行评定，比较不同肝纤维化程度患者的上述指标表达情况。 结果 慢性乙肝组与肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1水平均明显高于对照组，且肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1表达水平明显高于慢性乙肝组，差异有统计学意义（P < 0.05）。与轻度肝纤维化组比较，中度肝纤维化组、重度肝纤维化组和肝硬化组的IL-33、sST2与MCP-1均升高，且重度肝纤维化组和肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于中度肝纤维化组，肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于重度肝纤维化组，差异有统计学意义（P < 0.05）。经Pearson相关分析显示，慢性乙肝组患者IL-33、sST2与MCP-1与Ishak评分呈正相关（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。 结论 血清IL-33、sST2与MCP-1对慢性乙型肝炎病毒感染及其病情加重有评估预测作用，对患者开展血清指标检验有助于疾病诊断与预后评估。

[关键词] 慢性乙型肝炎病毒;可溶性生长刺激表达基因2蛋白;单核细胞趋化蛋白-1;白细胞介素-33

[中图分类号] R575.1          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）06（b）-0125-04

Changes of serum IL-33， sST2 and MCP-1 levels in patients with chronic hepatitis B virus infection and its clinical significance

LI Jin1   LUO Zhongyu1   CHEN Liuzhen2   LIN Peiji1

1.Department of Infectious Diseases， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan   523000， China; 2.Medical Department， Dongguan People′s Hospital， Guangdong Province， Dongguan   523000， China

[Abstract] Objective To investigate the changes of serum levels of interleukin-33 （IL-33） and its receptor soluble growth STimulation expressed gene 2 （sST2） and monocyte chemotactic protein-1 （MCP-1） in patients with chronic hepatitis B virus infection， and to analyze their clinical significance. Methods One hundred and five patients with chronic hepatitis B virus infection in Dongguan People′s Hospital from January 2017 to January 2018 were selected as the observation group， including 67 patients with simple chronic hepatitis B （chronic hepatitis B group）， 38 patients with hepatic failure （hepatic failure group）， and 50 healthy volunteers without liver diseases were selected as the control group. Serum levels of IL-33， sST2 and MCP-1 were measured in each group， and the degree of hepatic fibrosis in chronic hepatitis B group was assessed according to Ishak pathological score. The expression of the above indicators in patients with different degrees of hepatic fibrosis was compared. Results The levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in chronic hepatitis B group and hepatic failure group were significantly higher than those in control group， and the expression of IL-33， sST2 and MCP-1 in hepatic failure group was significantly higher than those in chronic hepatitis B group （P < 0.05）. Compared with mild hepatic fibrosis group， the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in moderate hepatic fibrosis group， severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group increased， and the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in severe hepatic fibrosis group and cirrhosis group were higher than those in moderate hepatic fibrosis group， while the levels of IL-33， sST2 and MCP-1 in cirrhosis group were higher than those in severe hepatic fibrosis group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. Pearson correlation analysis showed that IL-33， sST2 and MCP-1 was positively correlated with Ishak score in patients with chronic hepatitis B （r = 0.573， 0.728， 0.654， P < 0.05）. Conclusion Serum IL-33， sST2 and MCP-1 can evaluate and predict chronic hepatitis B virus infection and the aggravation of the disease. The test of serological indexes for the patients is helpful for disease diagnosis and prognosis evaluation.

[Key words] Chronic hepatitis B virus; Soluble growth STimulation expressed gene 2; Monocyte chemotactic protein-1; Interleukin-33

目前，乙型肝炎病毒感染仍是我國公共卫生事业重点关注的问题，根据统计我国约有乙型肝炎感染者1.5亿，感染者人数众多，且是演变为肝硬化的最主要原因[1]。目前，对于肝硬化的发病机制仍未完全明确，相关研究表明，炎症损伤、纤维细胞转化等在肝硬化发生、发展中起到重要作用[2-3]。白细胞介素-33（IL-33）是新近发现的具备多类生物效应的细胞因子，可溶性生长刺激表达基因2蛋白（sST2）是IL-33的重要受体[4]。研究发现，当IL-33与sST2结合后可以介导细胞内信号转导，启动一系列炎性变化过程[5];单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）为CC趋化因子家族成员之一，在人体发生炎性反应时会出现异常表达[6]。本研究分析了上述三种因子对人体肝组织炎症的评估作用，选择慢性乙型肝炎病毒感染患者为分析对象，旨在提出新的肝组织炎症血清学指标。现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取广东省东莞市人民医院（以下简称“我院”）2017年1月～2018年1月收治的105例慢性乙型肝炎病毒感染患者为观察组，其中单纯慢性乙肝患者67例（慢性乙肝组），合并肝衰竭患者38例（肝衰竭组）。纳入标准：①符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015年版）》[7]中关于慢性乙型肝炎的诊断标准，以及《肝衰竭诊治指南（2012年版）》[8]中关于肝衰竭的诊断标准;②患者经乙型肝炎病毒-DNA检测确诊为乙型肝炎病毒感染;③未进行抗病毒治疗;④慢性乙肝患者接受肝组织穿刺活检，病历资料完整;⑤患者及其家属知情本研究并签署同意书。排除标准：①合并其他肝脏疾病;②合并其他病原体感染;③先天性免疫异常患者。慢性乙肝组67例，男37例，女30例;年龄22～61岁，平均（37.81±13.66）岁。肝衰竭组38例，男22例，女16例;年龄24～64岁，平均（38.29±13.84）岁。同时选择无肝脏疾病的健康志愿者50名为对照组，男28名，女22名;年龄24～63岁，平均（38.34±14.52）岁。各组受检者年龄、性别等基线资料比较差异无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究已获我院伦理学委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 血清学检查  检验前1 d对受检者进行健康教育，检验当日于清晨采集所有受检者的空腹静脉血，置入离心机，以3500 r/min、离心半径8 cm离心处理7 min后获得血清标本，再分别采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定IL-33、sST2与MCP-1水平。江苏江莱生物科技有限公司提供的IL-33与可溶性ST2 ELISA试剂盒（生产批号：20161121），上海江莱生物科技有限公司提供的MCP-1 ELISA试剂盒（生产批号：20160724），根据产品指示说明书完成检验，测定上述指标的具体表达。

1.2.2 肝组织活检  所有慢性乙肝患者进行肝脏穿刺组织活检，应用活检针在B超引导下进行肝脏穿刺，取至少2 cm肝脏组织，由病理学医师制片，苏木精-伊红染色，参照Ishak评分标准[9]对慢性乙肝组患者的肝脏纤维化进行判定，Ishak评分为0～6分，其中0分表示未见纤维化;1～2分表示部分汇管区纤维组织增生，有或无短纤维间隔形成（轻度肝纤维化）;3～4分表示大部分汇管区纤维组织增生，汇管区间的桥状纤维间隔明显或汇管区-中央静脉纤维隔形成（中度肝纤维化）;5分表示汇管区间的桥状纤维间隔或汇管区-中央静脉纤维隔明显，偶见结节形成（重度肝纤维化）;6分表示肝硬化。根据判定结果，将慢性乙肝组患者进一步分为轻度肝纤维化组（13例）、中度肝纤维化组（14例）、重度肝纤维化组（14例）、肝硬化组（26例）。

1.3 统计学方法

数据处理采用SPSS 19.0统计学软件，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，应用t检验，多组间计量资料比较采用单因素方差分析。计数资料应用χ2检验，应用Pearson相关分析分析相关性。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组受检者的IL-33、sST2与MCP-1比较

慢性乙肝组与肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1水平均明显高于对照组，并且肝衰竭组的IL-33、sST2与MCP-1表达水平明显高于慢性乙肝组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表1。

2.2 慢性乙肝组中不同肝纤维化程度患者的IL-33、sST2与MCP-1比较

与轻度肝纤维化组比较，中度肝纤维化组、重度肝纤维化组和肝硬化组的IL-33、sST2与MCP-1均升高，且重度肝纤维化组和肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于中度肝纤维化组，肝硬化组IL-33、sST2与MCP-1水平高于重度肝纤维化组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.3 慢性乙肝组患者IL-33、sST2、MCP-1与Ishak评分的相关性分析

经Pearson相关分析显示，慢性乙肝组患者IL-33、sST2与MCP-1与Ishak评分呈正相关（r = 0.573、0.728、0.654，P < 0.05）。见图1。

3 讨论

慢性乙型肝炎病毒的变异性与异源性均较为严重，机体发生慢性乙型肝炎病毒感染后，病毒会在体内长时间存在，并促使病情不断进展，加重肝纤维化，诱发肝硬化甚至恶性肿瘤[10]。现阶段研究已证实人类感染病毒后并不会形成肝部的直接损伤，而由于感染而引发的免疫反应过程为其肝部损伤的重要原因，机体免疫失衡是疾病的主要发生机制，其中免疫细胞因子对疾病发生、进展及预后均形成影响作用[11-12]。目前，临床评定肝纤维化程度主要采用病理组织活检方法，但该种检验方式具备一定的有创性，容易对患者形成临床风险[13]。近年临床影像学技术也不断发展，部分医院针对患者开展瞬时弹性成像检查，虽能在避免穿刺创伤的基础上了解患者的肝脏损伤程度，但其影响因素较多，导致诊断评估作用有所限制[14]。近年来，不断有研究分析慢性乙型肝炎病毒感染患者的血清学指标，发现部分免疫学因子在疾病发生与进展过程中均发挥着影响作用。

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